當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)環(huán)磷酰胺所致家兔血細(xì)胞減少的影響

張 敏，李旭廷，曾富強(qiáng)，袁定勝，李金良，王 斌

（四川省畜牧科學(xué)研究院，四川 成都 610066）

當(dāng)歸補(bǔ)血湯是經(jīng)典的氣血雙補(bǔ)名方，由金元四大家之一的李東垣所創(chuàng)制，首見(jiàn)于《內(nèi)外傷辨惑論·暑傷胃氣論》。該方由黃芪和當(dāng)歸以5∶1比例組成，臨床主要用于勞倦內(nèi)傷、氣弱血虛和陽(yáng)浮外越等癥?，F(xiàn)代研究表明，當(dāng)歸補(bǔ)血湯水煎液中含有當(dāng)歸多糖、黃芪多糖以及阿魏酸等多種生物活性成分，具有改善血液系統(tǒng)功能，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、保肝、抗氧化等多種功能。本研究選擇家兔作為研究對(duì)象，使用環(huán)磷酰胺制造家兔血虛證模型，考察當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)家兔血虛證的治療效果，為其在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 8周齡左右的健康新西蘭白兔40只，體重1.7～1.9kg，雌性，購(gòu)自成都某兔業(yè)發(fā)展有限責(zé)任公司。

1.1.2 藥品 黃芪、當(dāng)歸飲片均購(gòu)至成都某藥業(yè)有限公司，按照5∶1比例用純凈水浸泡1 h，加熱煎煮2次，每次2 h，合并2次濾液，減壓濃縮至生藥含量為1 g/mL。注射用環(huán)磷酰胺，通化某制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：100101；玉屏風(fēng)口服液，廣州某藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：100302。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮儀器廠生產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)家兔的分組與處理 將40只家兔空腹稱重后，隨機(jī)分為4組，每組10只。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組按75mg/kg體重腹腔注射環(huán)磷酰胺（Cy），連續(xù)3d，誘發(fā)家兔血細(xì)胞減少，Ⅳ組等劑量注射生理鹽水作為健康空白對(duì)照。試驗(yàn)第4日起，Ⅰ、Ⅱ組分別口服給予1mL/kg的當(dāng)歸補(bǔ)血湯和玉屏風(fēng)口服液直至試驗(yàn)結(jié)束，Ⅲ組、Ⅳ組口服等量生理鹽水至試驗(yàn)結(jié)束。試驗(yàn)期為15d。觀察白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、平均血紅蛋白含量（HGB）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）等血液學(xué)指標(biāo)和增重等生長(zhǎng)性能指標(biāo)。

1.2.2 樣品的采集與檢測(cè) 各組均于試驗(yàn)的第15 d空腹稱重，然后在耳緣靜脈采血，肝素抗凝，檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、平均血紅蛋白含量（HGB）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS軟件進(jìn)行分析處理，LSD比較差異顯著性；所有數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)家兔血液學(xué)指標(biāo)的影響 各組家兔于試驗(yàn)的第15d進(jìn)行耳緣靜脈采血，肝素抗凝，檢測(cè)血常規(guī)，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 DBT對(duì)環(huán)磷酰胺造模家兔血液學(xué)指標(biāo)的影響（n=10）

從表1可見(jiàn)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與Ⅳ組相比，WBC、RBC、HGB、PLT 指標(biāo)均下降，且達(dá)到差異顯著（P＜0.05）。表明環(huán)磷酰胺所致家兔血細(xì)胞減少的“血虛”病癥模型造模成功。Ⅰ、Ⅱ組各項(xiàng)血液學(xué)指標(biāo)均顯著優(yōu)于Ⅲ組（P＜0.05），Ⅰ組與Ⅱ組相比，各項(xiàng)指標(biāo)Ⅰ組也高于Ⅱ組（P＜0.05）。表明中藥制劑DBT和YPF對(duì)環(huán)磷酰胺所致的家兔血細(xì)胞減少有顯著的恢復(fù)作用，且DBT對(duì)血細(xì)胞生成的促進(jìn)作用要優(yōu)于傳統(tǒng)中藥制劑YPF，但仍不能恢復(fù)至正常水平。

2.2 DBT對(duì)家兔體重指標(biāo)的影響 DBT對(duì)家兔體重的影響見(jiàn)表2。Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ組在增重和增重率的數(shù)值上要高于Ⅲ組，但統(tǒng)計(jì)學(xué)顯示差異不顯著（P＞0.05）。表明環(huán)磷酰胺對(duì)成年家兔生長(zhǎng)并無(wú)明顯的抑制作用，但有減緩生長(zhǎng)性能的趨勢(shì)，而DBT和YPF對(duì)環(huán)磷酰胺導(dǎo)致的家兔生長(zhǎng)性能下降有一定的抵抗作用，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 DBT對(duì)環(huán)磷酰胺造模家兔體重增長(zhǎng)的影響（n=10）

3 討論

3.1 環(huán)磷酰胺作為臨床常用的抗腫瘤藥物具有一定的細(xì)胞毒性，本試驗(yàn)利用其對(duì)動(dòng)物機(jī)體免疫功能和造血功能有損害從而制造出免疫抑制動(dòng)物模型。本試驗(yàn)首次選用成年新西蘭白兔腹腔注射75 mg/kg的環(huán)磷酰胺，造成血細(xì)胞減少的“血虛”病證模型，從造模后家兔的血液學(xué)指標(biāo)（WBC、RBC、HGB、PLT）檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，均顯著低于正常對(duì)照組（P＜0.05），證明以血細(xì)胞減少為主要癥狀的家兔“血虛”模型建立成功。

3.2 當(dāng)歸補(bǔ)血湯作為傳統(tǒng)經(jīng)典治療“氣血兩虛”的中藥方劑，自李東垣創(chuàng)制以來(lái)已近千年，在臨床中有著豐富的應(yīng)用成果，并取得了很好的療效。本試驗(yàn)在造模后分別給予DBT和YPF治療，可明顯提高造模家兔的白細(xì)胞、紅細(xì)胞生成，提高血紅蛋白含量，與DBT在其他實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)作用的研究結(jié)果相同。在生長(zhǎng)性能影響方面，未能觀察到DBT對(duì)環(huán)磷酰胺所致家兔的增重有明顯影響，一方面可能是因?yàn)檫x擇了成年家兔作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，其生長(zhǎng)發(fā)育本身已經(jīng)成熟，可變化程度不如仔幼兔；另一方面也符合其他學(xué)者在DBT相關(guān)研究中得出的DBT對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能影響不大的結(jié)論。

綜上所述，當(dāng)歸補(bǔ)血湯具有顯著的促進(jìn)“血虛”動(dòng)物血細(xì)胞生成的作用，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能無(wú)負(fù)面影響，可作為畜牧生產(chǎn)和獸醫(yī)臨床上畜禽各種原因所致的貧血、白細(xì)胞減少的治療用藥。

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