復(fù)方泥鰍超微粉膠囊抗疲勞的動(dòng)物性實(shí)驗(yàn)研究

張家國(guó)，孫靜，潘洪民

（1.國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品現(xiàn)代物流工程技術(shù)研究中心，山東 濟(jì)南 250103；2.山東省農(nóng)產(chǎn)品貯運(yùn)保鮮技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250103）

疲勞是指人們從事體力或腦力活動(dòng),經(jīng)過(guò)一定的時(shí)間和達(dá)到一定的程度后出現(xiàn)的活動(dòng)能力下降,表現(xiàn)為疲倦、肌肉酸痛或全身無(wú)力的現(xiàn)象。疲勞可以分為急性疲勞和慢性疲勞。急性疲勞主要是由于頻繁而強(qiáng)烈的肌肉活動(dòng)所引起的；慢性疲勞主要是長(zhǎng)時(shí)間而反復(fù)的活動(dòng)所引起的。而現(xiàn)代生活中大多數(shù)人出現(xiàn)的以及對(duì)人的身心危害最大的就是慢性疲勞[1]。

為消除體力疲勞，除了充分注意營(yíng)養(yǎng)和休息外，發(fā)現(xiàn)疾病還應(yīng)須及早治療，在藥物治療方面可適當(dāng)運(yùn)用維生素、氨基酸、激素等。但通過(guò)西藥解除疲勞畢竟不是好辦法，而且長(zhǎng)期服用可能有副作用。中藥對(duì)于消除疲勞雖見(jiàn)效慢，但一般沒(méi)有副作用，效果較好[2]。

泥鰍（Misgurnus anguillicaudatus），又名鰍（《爾雅》）、鰍魚(yú)（《本草拾遺》），屬于鯉形目、鯉亞目、鰍科的小型魚(yú)類(lèi)。該魚(yú)食性雜，抗病力強(qiáng)，生長(zhǎng)快，是我國(guó)重要的名優(yōu)經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)，分布在我國(guó)除青藏高原外的各地溝渠、稻田、池塘、河流、湖泊及水庫(kù)等水域中。近年來(lái)，隨著我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展和人工飼養(yǎng)技術(shù)的不斷提高，泥鰍的產(chǎn)量逐年增長(zhǎng)，但關(guān)于泥鰍的深加工和綜合利用探討甚少[3]。泥鰍的肉或全體均可入藥，也是人們常食的魚(yú)類(lèi)，其體表的皮膚能夠分泌出豐富的黏液，具有重要的生理功能。目前，人們從泥鰍黏液中已經(jīng)分離到多種生物活性物質(zhì)，如糖蛋白[4]、凝集素[5]、抗菌肽[6]、不飽和多烯脂肪酸、?；撬岷唾?lài)氨酸等必需氨基酸以及鋅硒等微量營(yíng)養(yǎng)元素[7]等。泥鰍的食用常見(jiàn)方法主要是高溫烹調(diào)，造成其活性成分的喪失，如何在保持其活性成分的前提下，開(kāi)發(fā)出食用方便、攜帶便捷的功能性食品是泥鰍加工領(lǐng)域的關(guān)鍵[8-10]。針對(duì)以上問(wèn)題，本實(shí)驗(yàn)研制了一種復(fù)方泥鰍超微粉膠囊，并對(duì)其抗疲勞功效進(jìn)行了動(dòng)物性實(shí)驗(yàn)研究。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 泥鰍

大鱗副泥鰍（Paramisgurnus dabryanus（Sauvage））（臨沂水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)）規(guī)格海尾10 g～15 g，無(wú)病無(wú)傷。泥鰍購(gòu)入后水中暫養(yǎng)3 d，以使其吐凈消化系統(tǒng)的內(nèi)容物，并去除泥鰍的腥味?；钅圉q先在-30℃以下預(yù)凍，完全凍結(jié)后，在一定的真空條件下（真空度26.66 Pa～0 Pa，溫度-45℃以下）凍干，從而達(dá)到低溫脫水的目的。

1.1.2 中草藥材

實(shí)驗(yàn)用中草藥材均購(gòu)自濟(jì)南建聯(lián)中藥店。

1.1.3 膠囊的組方

膠囊由凍干泥鰍、枸杞子、太子參、黃精、百合和桑椹子共6種原料組成。

1.1.4 膠囊的制備

超微粉碎：按一定的重量比稱(chēng)取凍干泥鰍，把稱(chēng)取的凍干泥鰍與經(jīng)過(guò)干燥的其它藥材按配方混合，然后在BFM-6超微粉碎機(jī)內(nèi)進(jìn)行超微粉碎，粉碎粒度為200目以上。

高效混合：采用SYH-5型三維運(yùn)動(dòng)高效混合機(jī)(常州產(chǎn))進(jìn)行攪拌混合，攪拌的時(shí)間為3 min。

膠囊灌裝：加入制備膠囊劑型所需的各種常規(guī)輔料，采用NJP-200型自動(dòng)膠囊灌裝機(jī)（浙江產(chǎn)）進(jìn)行灌裝，制成膠囊劑。

滅菌：裝瓶封口后放置在微波爐中用微波滅菌5min于陰涼干燥處保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雄性昆明種小白鼠48只，體重18 g～22 g，由山東大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 溶液配制

分別稱(chēng)取膠囊粉末0.75、1.50、3.00 g溶于100 mL蒸餾水中，依次配成濃度為 7.5×10-3、1.50×10-2、3.00×10-2g/mL的供試液備用。

1.2.2 分組與給藥方法

將小白鼠隨機(jī)分成4組各10只，分別為本品0.15、0.30、0.60 g/kg組和溶劑對(duì)照組（蒸餾水灌胃），各組經(jīng)口灌胃1次/d，小鼠灌胃體積為0.2 mL/10 g體重。受試物給予時(shí)間30 d，然后分別進(jìn)行抗疲勞能力測(cè)定。

1.2.3 小白鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)

末次給藥30 min后，將小鼠置游泳箱中，水深30 cm、水溫（25±0.5）℃，鼠尾根部負(fù)荷 5%體重的鉛皮。小鼠自游泳開(kāi)始至死亡的時(shí)間為小鼠游泳時(shí)間。

2 結(jié)果與分析

2.1 膠囊主要成分測(cè)定

膠囊由山東省疾病預(yù)防控制中心監(jiān)測(cè)，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1～表3。

表1 膠囊主要功效成分的含量Table 1 The main efficacious composition indicators of the compound loach superfine powder capsules

從表1可以看出，實(shí)驗(yàn)?zāi)z囊中含有皂苷、多糖和蛋白質(zhì)3種活性成分，其含量分別達(dá)到3.18、5.68 mg/g和27.3%。

表2 膠囊有毒、有害物質(zhì)的含量Table 2 The poisonous and harmful substances indicators of the compound loach superfine powder capsules mg/kg

從表2看出，實(shí)驗(yàn)?zāi)z囊中有毒有害物質(zhì)鉛、總砷及總汞的含量遠(yuǎn)低于GB16740-1997《保?。üδ埽┦称吠ㄓ脴?biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定。

表3 實(shí)驗(yàn)?zāi)z囊微生物學(xué)指標(biāo)監(jiān)測(cè)情況Table 3 The microbiological indicators of the compound loach superfine powder capsules

從表3看出，實(shí)驗(yàn)?zāi)z囊微生物學(xué)指標(biāo)符合GB 16740-1997《保?。üδ埽┦称吠ㄓ脴?biāo)準(zhǔn)》要求，對(duì)人體是安全的。

2.2 實(shí)驗(yàn)?zāi)z囊對(duì)小白鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響

實(shí)驗(yàn)?zāi)z囊對(duì)小白鼠負(fù)重游泳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 實(shí)驗(yàn)?zāi)z囊對(duì)小鼠游泳時(shí)間的影響()Table 4 The capsule on the influence of the time of swimming in small mice

表4 實(shí)驗(yàn)?zāi)z囊對(duì)小鼠游泳時(shí)間的影響()Table 4 The capsule on the influence of the time of swimming in small mice

注：*為與溶劑對(duì)照組和0.15 g/kg組比較具有顯著性差異（P<0.05）。

從表4可以看出，小白鼠負(fù)重游泳時(shí)間隨著劑量的增加而延長(zhǎng)，并且給藥量達(dá)到0.6 g/kg時(shí)，游泳時(shí)間達(dá)最大值113.79 min。方差檢驗(yàn)表明，0.3 g/kg和0.6 g/kg兩組與低劑量組（0.15 g/kg）及溶劑對(duì)照組有顯著性差異。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，復(fù)方泥鰍超微粉膠囊具有顯著的抗體力疲勞功能。

復(fù)方泥鰍超微粉膠囊采用凍干泥鰍、枸杞子、太子參等6味藥食兩用的原料精制而成，復(fù)方泥鰍超微粉膠囊中活性成分有皂苷、蛋白質(zhì)和多糖等，其多糖的來(lái)源主要是泥鰍、枸杞和太子參[12]。據(jù)研究，從泥鰍黏液中分離提取的中性粗多糖，用凝膠過(guò)濾色譜柱在高效液相色譜儀上分離和測(cè)定，結(jié)果表明該多糖由1個(gè)高聚糖（MAP，19.1%）和 1個(gè)寡糖（MAO，80.9%）組成。通過(guò)化學(xué)模擬體系研究MAP對(duì)活性氧自由基的清除作用，結(jié)果表明，MAP對(duì)活性氧自由基O2-、-OH和H2O2有清除作用；對(duì)DNA鏈起到保護(hù)作用[13]。周軍等[14]連續(xù)給小鼠灌胃不同劑量的MAP 14 d后進(jìn)行密閉缺氧試驗(yàn)、亞硝酸鈉中毒試驗(yàn)和急性腦缺血性缺氧試驗(yàn)，表明可明顯延長(zhǎng)小鼠在不同缺氧條件下的存活時(shí)間。MAP可增高小鼠血紅蛋白含量，抑制組織脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)以及增加血漿中超氧化物歧化酶活性。增強(qiáng)血液的載氧能力可能是其耐氧的原因之一，其抗氧化機(jī)制可能與其清除活性氧的作用有關(guān)。李金華等[13]研究表明泥鰍粉有提高小鼠耐缺氧能力的作用。吳亞君[15]對(duì)小鼠的抗疲勞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，MAP可顯著延長(zhǎng)小鼠的游泳時(shí)間和爬桿時(shí)間，說(shuō)明MAP有抗疲勞作用。枸杞為茄科植物枸杞（Lycium barbarum L.）的成熟果實(shí)，具有滋補(bǔ)肝腎,益精明目之功效,含有枸杞多糖、多種氨基酸、微量元素、維生素、?；撬?、生物堿、揮發(fā)油等化學(xué)成分。一般認(rèn)為，其主要有效成分為枸杞多糖[16-17]。龔濤等[18]證實(shí)，枸杞粗多糖能較顯著提高小鼠血清、肝臟及腦組織中SOD活性,降低MDA含量；極顯著提高正常小鼠常壓耐缺氧能力和游泳抗疲勞能力。太子參所含有的水提物還具有抗氧化活性的作用，實(shí)驗(yàn)證實(shí)，太子參提取液具有穩(wěn)定的非酶類(lèi)除超氧自由基的“SOD樣作用”物質(zhì)，提示太子參具有一定的體外SOD樣的藥理活性[19]。由于實(shí)驗(yàn)?zāi)z囊中含有枸杞子和太子參兩種原料，因此，該膠囊同樣具有一定的抗缺氧之功效。

3 結(jié)論

通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)和分析，充分證明復(fù)方泥鰍超微粉膠囊具有顯著的抗疲勞之功效，是有效消除體力疲勞的功能食品。

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