抗核小體抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的應(yīng)用價(jià)值

張國(guó)慶 逯自明

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種以多系統(tǒng)損害伴多種自身抗體為特征的自身免疫性疾病，其主要特征是人體內(nèi)產(chǎn)生抗多種抗原的自身抗體。近年來(lái)研究顯示核小體是SLE發(fā)病的重要靶抗原［1］，AnuA的重要性也日益受到關(guān)注。本研究通過(guò)免疫印跡法測(cè)定SLE患者、其他風(fēng)濕病患者及健康對(duì)照組人群的血清AnuA水平。探討AnuA在SLE實(shí)驗(yàn)診斷中的價(jià)值及與其他自身抗體的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2010年6月至2011年10月我院門(mén)診及風(fēng)濕免疫科住院的SLE患者58例，其中男4例，女54例，年齡15～62歲，診斷均符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE分類診斷標(biāo)準(zhǔn)。疾病對(duì)照組為其他風(fēng)濕性疾病4l例，男5例，女36例，年齡17～66歲，均為我院門(mén)診和住院患者，其中類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎25例，皮肌炎5例，干燥綜合征4例，混合性結(jié)締組織病3例，系統(tǒng)性硬化癥4例。健康人對(duì)照組30例，男10例，女20例，年齡21～50歲，為我院體檢中心體檢健康者。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)本的采集與處理 受檢者均空腹抽取靜脈血液3～5 ml，3000r/min離心分離血清，-70℃冰箱保存。

1.2.2 AnuA檢測(cè) SLE患者、疾病對(duì)照組及健康人對(duì)照組AnuA及其他自身抗體的檢測(cè)均采用德國(guó)歐蒙公司提供的免疫印跡法ANA譜(IgG)檢測(cè)試劑盒。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，最后與標(biāo)準(zhǔn)條帶比較判定結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，數(shù)據(jù)的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各觀察組三種抗體檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)(表1)。SLE中自身抗體的陽(yáng)性率依次為AnuA最高，為72.4%;抗ds-DNA抗體次之，為48.3%;抗Sm最低，為31.0%。

2.2 三種抗體的敏感性和特異性比較 見(jiàn)(表2)。SLE患者的各種抗體的比較可以看出，AnuA的敏感性明顯高于抗ds-DNA、Sm抗體，差異具有顯著性(P＜0.01);而對(duì)SLE診斷的特異性比較，三種抗體無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。

表1 3種自身抗體在SLE患者及對(duì)照組中的陽(yáng)性率(%)

2.3 抗ds-DNA、Sm抗體陰性的SLE患者AnuA檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)(表3)。其結(jié)果顯示AnuA在抗ds-DNA、Sm抗體陰性的SLE患者中有較高的陽(yáng)性率。說(shuō)明檢測(cè)AnuA可以提高抗ds-DNA、Sm抗體陰性的SLE的診斷率。

表3 AnuA在抗dsDNA、Sm抗體陰性的SLE患者中的陽(yáng)性率

3 討論

核小體是染色體功能亞單位，它由4對(duì)核心組蛋白(H2A、H2B、H3、H4)構(gòu)成八聚體，被 ds-DNA 包繞后組成，其中組蛋白Hl粘附在DNA鏈上。1990年，在抗ds-DNA抗體陽(yáng)性的患者外周血中發(fā)現(xiàn)了核小體，并認(rèn)為核小體主要是細(xì)胞凋亡過(guò)程中產(chǎn)生的，這種凋亡是有序地消化核染色體，產(chǎn)生完整的寡聚核小體，核小體又作為一種免疫原驅(qū)動(dòng)了自身免疫反應(yīng)，誘導(dǎo)AnuA的產(chǎn)生。在病理情況下，大量細(xì)胞發(fā)生壞死或凋亡，產(chǎn)生的核小體不能被及時(shí)清除，大量釋放到細(xì)胞間質(zhì)中，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生一系列自身抗體，早期以AnuA為主，后期出現(xiàn)抗ds-DNA抗體［2］。

迄今，臨床SLE特異性抗體檢測(cè)項(xiàng)目主要為抗ds-DNA抗體和抗Sm抗體，但抗ds-DNA抗體和抗Sm抗體的敏感性較低，在SLE早期不易發(fā)現(xiàn)。本實(shí)驗(yàn)顯示，SLE患者中AnuA與抗ds-DNA抗體及抗Sm抗體比較，AnuA陽(yáng)性率最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01):分別為72.4%、48.3%、31.0%，特異性與其他抗體無(wú)明顯差異(P＞0.05)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致［3］。說(shuō)明AnuA與其他抗體相比對(duì)SLE的診斷具有更重要的臨床意義。AnuA在抗ds-DNA或抗Sm抗體陰性的SLE患者中有較高的陽(yáng)性率，分別為53.3%、47.5%，與蘇茵等報(bào)道的一致［4］，說(shuō)明AnuA在SLE的診斷中可以彌補(bǔ)其他抗體的不足，特別是抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體陰性的SLE患者的診斷更有意義。雖然AnuA與抗ds-DNA抗體同屬抗核抗體中AnuA家系，但因其可出現(xiàn)于疾病的不同階段，因此不一定能被同時(shí)檢出。

綜上所述，本研究結(jié)果表明AnuA對(duì)SLE診斷的敏感性高、特異性強(qiáng)，可作為除抗ds-DNA抗體和抗Sm抗體外診斷SLE的一種新的特異性標(biāo)記抗體，AnuA的檢測(cè)對(duì)于SLE的診斷具有重要意義。聯(lián)合檢測(cè)AnuA和抗ds-DNA抗體能提高SLE的檢出率，而不降低其特異性，有利于SLE的早期診斷和治療。

［1］帖彥清，陳華偉，吳朝梅，等.用ELISA檢測(cè)抗核小體抗體對(duì)SLE的診斷價(jià)值.臨床檢驗(yàn)雜志，2006，24(5):375.

［2］趙建強(qiáng).抗核小體抗體測(cè)定對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷價(jià)值的研究.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床，2007，18(6):19-21.

［3］Bossuyt X，F(xiàn)rans J，Hendrichx A，et al.Detection of anti-nucleosome antibodies In a routine clinical laboratory setting.Clin Exp Heumatol，2008，26(2):387-388.

［4］蘇茵，韓蕾，粟占國(guó)，等.抗核小體抗體測(cè)定在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義.中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2003，7(8):474-478.