麻蘇平喘合劑藥理實(shí)驗(yàn)研究*

梅 嬌 萬 鵬 林 敏 黃崇剛

（1.重慶市北碚區(qū)中醫(yī)院，重慶 400700；2.重慶市中藥研究院，重慶 400065）

麻蘇平喘合劑由炙麻黃、杏仁、地龍、石膏、枳殼、黃芩等14味中藥組成，是在經(jīng)典方麻杏石甘湯的基礎(chǔ)上加減而得，全方具有清熱化痰，降氣平喘的功效。臨床上主要用于痰熱雍肺的咳嗽痰黏，喘促氣逆，胸膈滿悶，急性支氣管哮喘及慢性阻塞性肺病。為驗(yàn)證其功效及安全性，采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對該藥物進(jìn)行了主要藥效學(xué)和急性毒性實(shí)驗(yàn)研究。

1 材 料

1.1 藥物 麻蘇平喘合劑：棕黃色液體，生藥含量為7.15g/mL，由北碚區(qū)中醫(yī)院提供，批號：100310，臨用前用蒸餾水配制。氯化銨，廣東汕頭新寧化工廠，批號：20 090317；氨茶堿，山西太原藥業(yè)有限公司，批號： 090306；蒸餾水，重慶市中藥研究院制藥廠提供。

1.2 動(dòng)物 昆明種小鼠，雌雄兼用，SPF級，重慶市中藥研究院動(dòng)物室提供，動(dòng)物合格證號：SCXK（渝）20070006，適應(yīng)性飼養(yǎng)2d。豚鼠，雌雄兼用，普通級，重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號：SCXK（渝）20070001。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在重慶市中藥研究院藥理研究室三級實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.3 儀器與試劑 多功能誘咳引喘儀，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站，型號：YLS-8A。紫外可見分光光度計(jì)，上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司，型號：756PC。苯酚紅，上?；瘜W(xué)試劑總廠，批號：050615。組胺磷酸鹽，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：F20040315。氯化乙酰膽堿，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：WF20060314。

2 方法與結(jié)果

2.1 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)

2.1.1 對小鼠祛痰實(shí)驗(yàn)的影響（酚紅排泄法）［1］將50只小鼠隨機(jī)分為5組，按組別給藥，每日1次，連續(xù)5d。于末次給藥后30min，每鼠腹腔注射0.5%酚紅生理鹽水溶液0.1mL／10g體質(zhì)量。0.5h后處死動(dòng)物，分離氣管，剪下甲狀軟骨至氣管分支處，放入加有2mL生理鹽水的試管中，再加入1mol/L的NaOH溶液0.1mL，用紫外可見分光光度計(jì)于546nm處測OD值，y為酚紅質(zhì)量濃度，x為OD值，計(jì)算回歸方程為y=20.562x+0.2395。酚紅排泄量見表1。由表可見，麻蘇平喘合劑7.15g／kg及14g/kg劑量組能明顯增加小鼠的酚紅排泄量。提示麻蘇平喘合劑有祛痰作用。

表1 麻蘇平喘合劑對小鼠氣管段酚紅排泄量的影響（）

表1 麻蘇平喘合劑對小鼠氣管段酚紅排泄量的影響（）

與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。下同。

組 別 n 劑量（g/kg） 酚紅排泄量（μg／mL）對照組 10 0.069±0.22麻蘇平喘合劑低劑量組 10 3.58 0.92±0.26麻蘇平喘合劑中劑量組 10 7.15 1.04±0.32*麻蘇平喘合劑高劑量組 10 14.00 1.20±0.26**氯化銨組 10 1.00 1.48±0.33**

2.1.2 對豚鼠平喘實(shí)驗(yàn)的影響［1］取豚鼠60只，于實(shí)驗(yàn)前1d將其逐一放入誘咳引喘儀內(nèi)，噴入2%氯化乙酰膽堿和0.1%磷酸組胺的混合液1mL。150s內(nèi)出現(xiàn)哮喘反應(yīng)（哮喘反應(yīng)按程序分4級，Ⅰ級呼吸加速，Ⅱ級呼吸困難，Ⅲ級抽搐，Ⅳ級跌倒，以抽搐、跌倒的時(shí)間作為潛伏期）為合格的敏感動(dòng)物［2］。取合格豚鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。分別為對照組，氨茶堿組，麻蘇平喘合劑小、中、大劑量組。按組別給藥，每日1次。除氨茶堿組連續(xù)灌胃給藥3d外，其余各組均連續(xù)灌胃給藥5d。末次給藥1h后，將豚鼠按篩選時(shí)的方法給予混合液噴霧刺激，觀察360s，記錄豚鼠出現(xiàn)哮喘反應(yīng)的時(shí)間（引喘潛伏期），超過360s不發(fā)生抽搐者按360s計(jì)算。結(jié)果見表2。由表可見，麻蘇平喘合劑中、高劑量組能明顯延長磷酸組胺混合液所致豚鼠哮喘反應(yīng)的潛伏期。

表2 麻蘇平喘合劑對豚鼠哮喘的影響（）

表2 麻蘇平喘合劑對豚鼠哮喘的影響（）

組 別 引喘潛伏期（s） 延長率（%）n 劑量（g/kg）對照組 56.90±16.83 10 -麻蘇平喘合劑低劑量組 72.80±14.08 27.94 10 2.5麻蘇平喘合劑中劑量組 99.80±16.29** 75.40 10 5.0麻蘇平喘合劑高劑量組 124.10±17.85** 118.10 10 10.0氨茶堿組 211.50±18.54** 271.70 10 0.1

2.2 急性毒性實(shí)驗(yàn)［3］

2.2.1 劑量設(shè)置 根據(jù)預(yù)試結(jié)果，給予6只小鼠（雌雄各半）一次性最大質(zhì)量濃度（7.15g/mL），最大給藥體積（0.4mL／10g）的麻蘇平喘合劑灌服，無動(dòng)物死亡，不能測出小鼠LD50。故進(jìn)行最大給藥量測定。參照《中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》［4］要求，采用藥物組與對照組進(jìn)行對照比較。每日兩次灌胃給藥，間隔4h。

2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 適應(yīng)性飼養(yǎng)后，30只健康小鼠均用于實(shí)驗(yàn)。稱重后按體質(zhì)量分為麻蘇平喘合劑組（20只）、對照組（10只）。將小鼠禁食不禁水12h，按最大質(zhì)量濃度（7.15g/mL），最大給藥體積（0.4mL/10g）分別給動(dòng)物1d內(nèi)兩次灌服（對照組給予蒸餾水），記錄動(dòng)物毒性反應(yīng)及死亡情況，連續(xù)觀察14d。同時(shí)稱量給藥后第1、2、3、7、14日的小鼠體質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對小鼠進(jìn)行解剖觀察。

2.2.3 結(jié)果 見表3。小鼠給予麻蘇平喘合劑后10min后，動(dòng)物開始出現(xiàn)倦臥、自發(fā)活動(dòng)減少、身體僵住、呼吸加深頻率減慢等現(xiàn)象，持續(xù)時(shí)間15～30min不等，30min后基本恢復(fù)正常。給藥組連續(xù)觀察14d無動(dòng)物死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對小鼠進(jìn)行解剖，肉眼觀察臟器無明顯改變。對小鼠的體質(zhì)量等無明顯影響。

表3 麻蘇平喘合劑最大給藥量對小鼠體質(zhì)量的影響（g，）

表3 麻蘇平喘合劑最大給藥量對小鼠體質(zhì)量的影響（g，）

給藥后體質(zhì)量增長值第1日 第2日 第3日 第7日 第14日麻蘇平喘合劑組 20 19.93±1.15 3.31±1.05 6.10±1.21 7.30±1.22 12.59±3.09 17.65±4.25對照組 10 20.15±0.96 4.67±0.80 5.26±1.69 7.69±1.60 12.16±2.35 17.28±4.63組 別 n 給藥前

3 結(jié) 論

在小鼠祛痰實(shí)驗(yàn)中，麻蘇平喘合劑7.15、14g／kg劑量組能明顯增加小鼠的酚紅排泄量；在磷酸組胺致豚鼠哮喘試驗(yàn)中，麻蘇平喘合劑5、10g／kg劑量組能明顯延長磷酸組胺混合液所致豚鼠哮喘的潛伏期。試驗(yàn)結(jié)果表明麻蘇平喘合劑對模型動(dòng)物有明顯的祛痰、平喘作用。

麻蘇平喘合劑給小鼠1d內(nèi)兩次灌服的最大給藥量為572.00g／kg，該劑量相當(dāng)于成人臨床每日用藥量［0.715g／（kg·d），以60kg計(jì)］的800倍。給予麻蘇平喘合劑后，小鼠有倦臥、自發(fā)活動(dòng)減少、身體僵住、呼吸加深頻率減慢等現(xiàn)象，無死亡發(fā)生，解剖肉眼觀察臟器未見明顯器質(zhì)性改變。對體質(zhì)量增長無明顯影響。提示麻蘇平喘合劑對小鼠毒性較低。

麻蘇平喘合劑為一清化熱痰方劑，具有清熱化痰，降氣平喘的功效。臨床上主要用于痰熱雍肺的咳嗽痰黏，喘促氣逆，胸膈滿悶，急性支氣管哮喘及慢性阻塞性肺病。通過對麻蘇平喘合劑藥效學(xué)及急性毒性試驗(yàn)研究，證明其藥效學(xué)結(jié)果與臨床功能主治基本一致，而且毒性很低，為臨床合理應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

［1］陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：631，637.

［2］葉曉宗，何艷玲，劉新貴.復(fù)方甘草口服溶液止咳平喘祛痰的實(shí)驗(yàn)研究［J］.今日藥學(xué)，2009，19（12）：24-26.

［3］國家食品藥品監(jiān)督管理局.藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范［S］.2003：9.

［4］《中藥、天然藥物急性毒性試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》課題研究組.中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則［S］.2005：3.