高效液相色譜法測定腰息痛膠囊中對乙酰氨基酚溶出度的研究

陳驍勇 葛玉松

1.江蘇省鹽城市第一人民醫(yī)院，江蘇鹽城 224001；2.江蘇省鹽城市藥品檢驗(yàn)所，江蘇鹽城 224002

高效液相色譜法測定腰息痛膠囊中對乙酰氨基酚溶出度的研究

陳驍勇1葛玉松2

1.江蘇省鹽城市第一人民醫(yī)院，江蘇鹽城 224001；2.江蘇省鹽城市藥品檢驗(yàn)所，江蘇鹽城 224002

目的 建立腰息痛膠囊中對乙酰氨基酚的溶出度測定方法。 方法 采用轉(zhuǎn)藍(lán)法，以0.1 mol/L鹽酸溶液為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為 100 r/min，取樣時(shí)間為 30 min。液相色譜柱為 CAPCELL PAK C18色譜柱（4.6×150 mm，5 μm）；流動(dòng)相為甲醇-0.5%冰醋酸溶液（20∶80）；檢測波長為 249 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣體積 10 μL。 結(jié)果 乙酰氨基酚在0.210 8～1.054 0 μg線性范圍內(nèi)（r=0.999 99）呈良好的線性關(guān)系，平均回收率為99.4%。 結(jié)論 本法操作簡便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。能夠用于測定腰息痛膠囊中對乙酰氨基酚的溶出度測定。

腰息痛膠囊；溶出度；對乙酰氨基酚；轉(zhuǎn)藍(lán)法

腰息痛膠囊收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十一冊[1]，是常用的中西藥復(fù)方制劑，具有舒筋活絡(luò)、祛瘀止痛、活血驅(qū)風(fēng)作用。主要用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肥大性腰椎炎、肥大性胸椎炎、頸椎炎、坐骨神經(jīng)痛、腰肌勞損。對乙酰氨基酚是其主要成分之一，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中沒有其溶出度檢查項(xiàng)，而目前國家對固體藥品溶出度要求較高[2]，為了解其溶出度情況，本文采用HPLC法測定腰息痛膠囊中對乙酰氨基酚在人工胃液中的溶出度。報(bào)道如下：

1 儀器與試劑

RCZ-8M溶出試驗(yàn)儀、RZQ-8D取樣收集系統(tǒng)（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；Aglinet 1200高效液相色譜儀，包括G1311A四元泵高效液相色譜儀、G1329A自動(dòng)進(jìn)樣器、G1322A真空脫氣機(jī)、G1316A柱溫箱、G1314B紫外檢測器、Aglinet 1200化學(xué)工作站（美國安捷倫科技有限公司）；XS205DU電子天平（梅特勒-托利多國際股份有限公司）。對照品為對乙酰氨基酚 （中國藥品生物制品檢定所，批號：100018-200408，含量測定用）。腰息痛膠囊（吉林省輝南輝發(fā)制藥股份有限公司，規(guī)格：0.3 g/粒，批號 A：20100709，B：20101221，C：20110601），甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出條件的選擇

采用《中華人民共和國藥典》2010年版二部附錄溶出度測定法中的轉(zhuǎn)藍(lán)法[3]，取樣6片，每個(gè)轉(zhuǎn)藍(lán)中放入1片，以人工胃液900 mL（0.1mol/L鹽酸溶液）作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 min/轉(zhuǎn)，溫度為37℃，取樣時(shí)間為30 min，依法操作。腰息痛原標(biāo)準(zhǔn)采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定對乙酰氨基酚含量測定[1]，此方法操作比較繁瑣，重現(xiàn)性差；經(jīng)參照有關(guān)文獻(xiàn)[4-9]，并考慮到高效液相色譜法在測定復(fù)方制劑中單一成分的較強(qiáng)專屬性，故采用高效液相色譜法。

2.2 色譜條件

色譜柱：CAPCELLPAK MG C18色譜柱（4.6×150 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇-0.5%冰醋酸溶液（20︰80）；檢測波長：249 nm；流速：1 mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣體積：10 μL。 理論板數(shù)按對乙酰氨基酚計(jì)算不少于1 500。

2.3 溶液的制備

2.3.1 對照品溶液的制備 精密稱取對乙酰氨基酚10.54 mg，置100 mL容量瓶中，加流動(dòng)相適量溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。取對照品貯備液5 mL，置于10 mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.3.2 供試品溶液的制備 取本品10片內(nèi)容物，精密稱定，研細(xì)，混勻，精密稱取本品15.27 mg（約相當(dāng)于對乙酰氨基酚5 mg），置于100 mL量瓶中，加流動(dòng)相 40 mL，超聲 1 min使溶解，放冷，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm微孔濾膜過濾，作為供試品溶液。

2.4 線性關(guān)系考察

分別精密吸取對照品貯備液 2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μL；照上述高效液相色譜法測定對乙酰氨基酚峰面積，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=3 790.056 4X+5.624 3，r=0.999 99。結(jié)果表明對乙酰氨基酚在0.210 8～1.054 0 μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。見圖1。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“2.3.2”項(xiàng)下的供試品溶液，分別于 0、1、2、4、8、12 h進(jìn)行測定，經(jīng)計(jì)算在12 h內(nèi)對乙酰氨基酚峰面積的RSD為0.7%，表明對乙酰氨基酚在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 精密度試驗(yàn)

取“2.3.1”項(xiàng)下的對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，計(jì)算對乙酰氨基酚峰面積的RSD為0.1%。表明精密度良好。

2.7 回收率試驗(yàn)

精密稱取己測定的樣品適量（約相當(dāng)于對乙酰氨基酚5 mg）共9份，分別精密加入對照品適量，置于100 mL量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過。照“2.2”項(xiàng)色譜條件測定，計(jì)算回收率。見表1。

表1 回收率結(jié)果

2.8 溶出度測定

2.8.1 溶出方法確定 以經(jīng)脫氣的0.1 mol/L鹽酸溶液900 mL作為溶出介質(zhì)；轉(zhuǎn)速：120 r/min；溶出溫度：（37±0.5）℃，取6片樣品按照溶出度測定方法測定，在30 min時(shí)取10 mL溶出液，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL置10 mL量瓶中，加0.1 mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，作為供試品溶液；另取對乙酰氨基酚對照品，精密稱定，用0.1 mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含50 μg的溶液，作為對照品溶液；照“2.2”項(xiàng)色譜條件下測定。見圖2。

2.8.2 陰性對照試驗(yàn)

取腰息痛膠囊處方中不含對乙酰氨基酚的其他原料，按制備工藝同法制成不含對乙酰氨基酚的陰性對照膠囊，照“2.1”項(xiàng)下溶出條件同法測定；測定結(jié)果顯示空白輔料對試驗(yàn)無影響。見圖2。

2.8.3 測定溶出度

取三批樣品各6片，按照溶出度測定方法操作，在15 min時(shí)分別取樣5 mL；另取此三批樣品同法操作，取樣時(shí)間分別為30、45、60 min；依法測定各樣品的平均溶出百分率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，腰息痛膠囊在0.1 mol/L鹽酸溶液中，其對乙酰氨基酚在45 min內(nèi)能全部溶出。見表2。

表2 溶出度試驗(yàn)（%）

3 討論

3.1 溶出介質(zhì)的選擇

常用溶出介質(zhì)有蒸餾水、0.1 mol/L鹽酸溶液及不同pH值的磷酸鹽緩沖液?？紤]到對乙酰氨基酚略溶于水，因此，水不適宜作為溶出介質(zhì)，溶出介質(zhì)的pH值在1.2～7.5之間對乙酰氨基酚的溶出度幾乎沒有影響[4，10]，而0.1 mol/L鹽酸溶液較接近于人體胃液環(huán)境，且對乙酰氨基酚在0.1 mol/L鹽酸溶液中較穩(wěn)定、易溶，故采用0.1 mol/L鹽酸溶液為溶出介質(zhì)。

3.2 取樣時(shí)間的選擇

由于膠囊劑崩解時(shí)限規(guī)定時(shí)間為30 min，而且三批樣品在30 min時(shí)溶出度均己超過標(biāo)示量的90%，因此規(guī)定溶出度取樣時(shí)間為30 min。

3.3 轉(zhuǎn)速的選擇

轉(zhuǎn)藍(lán)法轉(zhuǎn)速一般為50～100 r/min，通過對比50 r/min與100 r/min發(fā)現(xiàn)，當(dāng)轉(zhuǎn)速為50 r/min時(shí)，膠囊劑崩解不完全，影響藥物溶出，故采用100 r/min。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本文提出的方法簡便、快捷、準(zhǔn)確、線性關(guān)系良好、說明本方法可行。

[1]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)（第十一冊）[S].北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：201.

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[3]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典[S].一部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：820.

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[7]孫勤.不同廠家復(fù)方氨酚烷胺膠囊的溶出度考察[J].西北藥學(xué)雜志，2012，27（2）：70-71.

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Dissolution on dissolution rate of paracetamol in Yaoxitong Capsule by HPLC

CHEN Xiaoyong1GE Yusong2
1.The First People's Hospital of Yancheng City in Jiangsu Province,Yancheng 224001,China;2.Yancheng Institute for Drug Control in Jiangsu Province,Yancheng 224002,China

Objective To establish a method for determining the dissolution rate of paracetamol in Yaoxitong Capsule.Methods Rotating basket was used,the dissolution medium was 0.1 mol/L HCL solution;the rotation rate was 100 r/min with the sampling time of 30 min.CAPCELL PAK C18(4.6×150 mm，5 μm)clumn was used with mobile phase consisted of methanol-0.5%acetic acid solution (20:80).The detection wavelength was set at 249 nm and the flow rate was 1.0 mL/min.The colunm temperature was set at 30℃ and injection was 10 μL.Results The linear range of paracetamol was 0.210 8-1.054 0 μg(r=0.999 99)with an average recovery was 99.4%.Conclusion The method is simple and accurate,and can be used for the dissolution rate determination of paracetamol in Yaoxitong Capsule.

Yaoxitong capsule；Dissolution rate；Paracetamol;Rotating basket

R284.1

A

1674-4721（2012）11（c）-0058-03

2012-07-26 本文編輯：袁 成）