不同配比花粉與黃豆粉飼料對意蜂6日齡工蜂幼蟲血淋巴中游離氨基酸含量的影響

方文富 郭海坤 林法俊 紀旭光 彭秋玫 賀 茜 段曉峰 張會杰

（福建農(nóng)林大學蜂學學院，福州 350002）

花粉是蜜蜂生長發(fā)育所需營養(yǎng)蛋白質的重要來源。蜜蜂從花粉中攝取蛋白質，并通過消化將大分子的蛋白質分解成小分子的氨基酸，吸收后在體內組成適合本身生命活動所需要的各種蛋白質。在科學養(yǎng)蜂中，當外界缺乏花粉時常常通過補充飼喂人工花粉代用品來彌補粉源的不足，促進蜂群繁殖和提高蜂王漿產(chǎn)量。目前，人工花粉代用品已成為科學飼養(yǎng)蜜蜂重要的蛋白質補充飼料[1-3]，有關人工花粉代用品及其添加劑對蜜蜂的作用前人也作了一些有益的探討[4-7]，但長期以來人工花粉代用品的大多是憑經(jīng)驗配制，究竟不同人工花粉代用品對蜜蜂的影響如何，尚缺乏深入的科學的研究。本文試圖通過采用不同配比油菜花粉與黃豆粉的人工花粉代用品飼喂蜜蜂，就其對意大利蜜蜂6日齡工蜂幼蟲血淋巴中游離氨基酸的影響進行探討，以為豐富蜜蜂營養(yǎng)相關生理學理論和為養(yǎng)蜂生產(chǎn)采用適合的人工花粉代用品提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

試驗于2008年3～6月，在福建省福州市西郊福建農(nóng)林大學蜂學學院教學蜂場進行。

1.1 試驗蜂群

試驗蜂群為福州本地意大利蜜蜂，25群，蜂群遺傳性狀一致，群勢 1 足框，采用1/2脾蜂箱飼養(yǎng)。試驗蜂群分5組，每組5群。試驗期時，試驗群巢門均安裝蜂花粉采集器（脫粉板圓孔直徑4.9 mm），防止蜜蜂把天然花粉帶進蜂巢，并當日開始分別飼喂不同蛋白質飼料，飼喂時將人工蛋白質飼料制成花粉餅，置于蜂群內巢框上梁供蜜蜂自由采食，飼喂的量以略有剩余為度，每3天飼喂1次，持續(xù)到試驗結束為止。

1.2 不同配比油菜花粉與黃豆粉飼料的配備

試驗用油菜（Brassica napus L.）花粉產(chǎn)自甘肅省民樂縣；黃豆（Glycine max Merrill）粉來自杭州市蕭山區(qū)靖江鎮(zhèn)；豆粉直徑0.3 mm。

試驗時，采用油菜花粉與黃豆粉按不同比例混合而成。1 號飼料（100%花粉），2 號飼料（75%花粉、25%黃豆粉），3 號飼料（50%花粉、50%黃豆粉），4 號飼料（25%花粉、75%黃豆粉），5號飼料（100%黃豆粉）。

1～5號飼料的蛋白質含量： 1 號飼料 24.5%，2 號飼料28.9%，3 號飼料34.4%，4 號飼料36.8%，5 號飼料38.8%。

1.3 試驗用工蜂幼蟲的提供

在飼喂人工蛋白質飼料10 d后，通過縮脾密集群勢逼蜂造脾和逼蜂王產(chǎn)卵的方法限王產(chǎn)卵。方法是，每個試驗蜂群中抽出1個脾，寄放在其他蜂群，原位插入1個礎框，脾造好后蜂王立即在新脾上產(chǎn)卵，然后再用4根鐵線標記蜂王在4～6 h 內的產(chǎn)卵區(qū)域，并做好記錄，以便屆時提取工蜂幼蟲的樣本。

1.4 工蜂幼蟲血淋巴樣本的提取

在標記產(chǎn)卵區(qū)的幼蟲發(fā)育到6日齡時，分別從試驗蜂群標記區(qū)提取供取血淋巴的工蜂幼蟲，然后立即提取幼蟲的血淋巴。每個試驗群提取幼蟲血淋巴約 1 ml。每種飼料飼喂的蜂群提取 5 群的工蜂血淋巴樣本，5 種飼料飼喂的蜂群共提取25個試驗群25個血淋巴樣本。提取的血淋巴加入抗氧化劑（苯基硫脲）后至于冰箱的冷凍室冷凍保存供用。

1.5 血淋巴中游離氨基酸種類和含量的測定

采用磺基水揚酸法測定游離氨基酸。方法是將工蜂幼蟲血淋巴用5%磺基水揚酸稀釋10倍，充分混勻，然后在10000 r/min轉速下離心10 min。析出沉淀物，取上清液直接上機測試。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析方法

先采用F檢驗統(tǒng)計分析試驗結果數(shù)據(jù)的差異顯著性，當差異顯著時再采用Q檢驗進行多重比較分析。

2 結果與分析

飼喂5 種不同比例油菜花粉與黃豆粉蛋白質飼料對意蜂6日齡工蜂幼蟲血淋巴中氨基酸含量影響的試驗和統(tǒng)計結果如表1所示。

表1 不同配比油菜花粉與黃豆粉混合飼料對6日齡工蜂幼蟲血淋巴游離氨基酸含量影響（單位：g/L）

由表1可見，采用不同配比油菜花粉與黃豆粉混合飼料飼喂的6 日齡工蜂幼蟲不但其血淋巴中同種游離氨基酸含量之間均無顯著性差異（P＞0.05），而且其血淋巴中游離氨基酸總量之間也無顯著性差異（P＞0.05）。

3 討論

蜜蜂幼蟲血淋巴中的游離氨基酸是蜜蜂在消化、分解來自蛋白質飼料中蛋白質的重要產(chǎn)物之一，也是蜜蜂幼蟲在體內組成適合本身生命活動所需要的各種蛋白質的物質基礎之一。

對采用5種不同配比油菜花粉與黃豆粉混合蛋白質飼料培育的6日齡工蜂幼蟲血淋巴中蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、纈草氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸和脯氨酸等16種游離氨基酸含量的試驗結果顯示，飼喂不同蛋白質飼料培育的6日齡工蜂幼蟲血淋巴中16種游離氨基酸的含量之間和16種游離氨基酸總含量之間的差異均不顯著（P＞0.05）。說明不同配比油菜粉和黃豆粉混合蛋白質飼料對6日齡工蜂幼蟲血淋巴中的游離氨基酸，無論是同種氨基酸還是16種游離氨基酸總含量都沒有影響。這可能是由于蜜蜂幼蟲體內的蛋白質轉化酶類能夠把不同配比的油菜花粉與黃豆粉混合蛋白質飼料中的蛋白質消化、分解成發(fā)育所需種類和數(shù)量的游離氨基酸所致。

[1]周冰峰.蜜蜂飼養(yǎng)管理學[M].廈門:廈門大學出版社,2002,91-236.

[2]張復興.現(xiàn)代養(yǎng)蜂生產(chǎn)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學出版社,1998:70-77.

[3]陳盛祿.中國蜜蜂學[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001,209-214.

[4]呂麗萍,石巍,張秀琳,等.蜜蜂的營養(yǎng)要求和蜜蜂飼料的配制[J].中國蜂業(yè),2006,(4):19-20.

[5]肖良松,薛承坤.蜜蜂飼料添加劑喂蜂效果的試驗[J].中國養(yǎng)蜂,2001,(3):11.

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[7]泰伯,S[法].關于蜜蜂飼料的幾點看法[J].中國養(yǎng)蜂,1995,(6):39.