動物“瘦肉精”快速檢測方法

姜 波 周 萌 王 濤

（1.山東省濟南市畜產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測中心，濟南 250002；2.山東省濟南市畜產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測中心，濟南 250002；3.山東省濟南市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，濟南 250002）

畜產(chǎn)品質(zhì)量安全已成為我國乃至世界共同關(guān)注的話題。如何控制藥物殘留，確保畜產(chǎn)品質(zhì)量安全，保證人們吃到“放心肉”，監(jiān)督和檢測環(huán)節(jié)至關(guān)重要。畜產(chǎn)品質(zhì)量安全包括“肉、蛋、奶”等多方面，其中“瘦肉精”的添加使用備受關(guān)注。國家對“瘦肉精”的控制使用、監(jiān)督檢查和檢測方面都投入了大量人力、物力。監(jiān)督檢測部門需要更科學(xué)、高效、準(zhǔn)確的檢測方法來監(jiān)督監(jiān)測藥物殘留。下面介紹3種最常見的“瘦肉精”及其快速檢測方法。

1 “瘦肉精”常見種類

“瘦肉精”包括很多種，一般最常見、最常添加的“瘦肉精”主要包括鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇3種，它們是一種人工合成的β-腎上腺素能興奮劑，具有擴張支氣管的作用。當(dāng)其應(yīng)用劑量達到治療量的5～10倍時，又具有能量重分配作用，可使肌肉合成增加，脂肪沉淀減少。因此，將其俗稱為“瘦肉精”。在畜牧業(yè)生產(chǎn)過程中，一些非法使用者將其作為一種生長促進劑添加到動物飼料中，用以改善酮體的品質(zhì)，同時也造成食物中“瘦肉精”的殘留。當(dāng)人們食用含有這些殘留的產(chǎn)品后，會出現(xiàn)心動過速，低血鉀，低磷酸鹽血癥，肌肉震顫，頭暈，口干，失眠等癥狀，嚴重的會出現(xiàn)癱瘓。

2 “瘦肉精”快速檢測方法

2.1 原理

快速檢測試紙分別是用鹽酸克倫特羅單克隆抗體、萊克多巴胺單克隆抗體和沙丁胺醇單克隆抗體為基礎(chǔ)，根據(jù)現(xiàn)代免疫學(xué)技術(shù)設(shè)計組裝。待測尿樣在層析過程中，樣品中的“瘦肉精”與NC膜上的檢測線（T線）上“瘦肉精”——蛋白偶聯(lián)復(fù)合物共同競爭金標(biāo)特異性抗體。以試紙上T線的顏色變化與質(zhì)控線（C線）比較判定樣品中的“瘦肉精”含量。

2.2 目的、用途

試紙條是一種快速篩選檢測的方法，能快速檢測出動物尿液中鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇，對監(jiān)督檢查“瘦肉精”工作提供了便利條件。為防止“瘦肉精”的非法使用，保證食品安全提供了一種高效的檢測手段。

2.3 操作步驟

2.3.1 檢測步驟

（1）取出所需試紙置于平面，并與樣品對應(yīng)編號；

（2）在試紙加樣孔中加入100μL或3滴待檢樣品，開始記時；（3）5 min內(nèi)觀察記錄結(jié)果，10 min以內(nèi)判斷結(jié)果。

2.3.2 結(jié)果判定

（1）T線和C線都出現(xiàn)棕紅色條帶，結(jié)果為陰性，樣品中“瘦肉精”的含量小于其對應(yīng)的檢測靈敏度。

（2）T線不出現(xiàn)棕紅色條帶，C線出現(xiàn)一條棕紅色條帶，結(jié)果為陽性，樣品中“瘦肉精”的含量大于或等于其對應(yīng)的檢測靈敏度，其陽性結(jié)果可用酶聯(lián)免疫法進行進一步測定。

（3）若T線和C線都沒有出現(xiàn)棕紅色條帶，說明操作不當(dāng)或者是檢測試紙失效。

注：鹽酸克倫特羅的檢測靈敏度：3 ng/ml（ppb）；萊克多巴胺的檢測靈敏度：8 ng/ml（ppb）；沙丁胺醇的檢測靈敏度：10 ng/ml（ppb）。

結(jié)果如圖所示：

2.4 影響因素

（1）由于動物尿樣樣品的個體差異，受年齡、品種、性別和養(yǎng)殖環(huán)境的影響，抽取動物尿液樣品有差異，在檢測過程中，可能會影響檢測線顏色偏淡，一般并不影響結(jié)果的判斷，只要檢測線出現(xiàn)條帶，不論深淺，就可以判定為陰性。

（2）澄清的動物尿樣樣品不需要特殊的處理，可以直接用于檢測；如果尿樣中污染有雜物或呈渾濁狀時必須經(jīng)離心或者過濾后再用于檢測，嚴重污染或渾濁者不可用于檢測。

（3）檢測時，檢測溫度、濕度和檢測時間都會對實驗結(jié)果有所影響。試驗過程中，環(huán)境的溫度盡量控制在20℃左右進行；試紙條從拆封到檢測，時間盡量控制在每個樣品10 min之內(nèi)，以保證試紙條不受潮，減少對檢測結(jié)果的影響因素?？焖贆z測試紙條一般存放溫度控制在4～30℃之內(nèi)，密封、干燥、避光存放，嚴防受潮。

（4）如果動物尿液樣品為冷凍狀態(tài)，應(yīng)使其化凍回溫再進行檢測，以免影響檢測結(jié)果，必須保證尿液樣品在常溫之內(nèi)。

（5）尿液樣品吸管不可混用，以免交叉感染；如果尿樣中污染有雜物或呈渾濁狀時要經(jīng)離心或者過濾后再用于檢測，嚴重污染或渾濁者不可用于檢測。

（6）由于各種原因，動物尿樣樣品檢測時有可能會出現(xiàn)假陽性，對可疑樣品或陽性樣品，可重復(fù)實驗（每支試紙只能使用1次），也可用酶聯(lián)免疫法做進一步確定。實驗后的廢棄物要妥善處理。

2.5 優(yōu)勢和不足

動物尿液中“瘦肉精”快速檢測的優(yōu)勢是動物尿樣不需要特殊處理，可直接用于檢測，監(jiān)督檢查人員和檢測人員可進行現(xiàn)場檢測，快速高效判斷結(jié)果，節(jié)省大量人力、物力，提高了工作效率。但由于是快速檢測，其結(jié)果受溫度、濕度等環(huán)境和其他影響較多，若出現(xiàn)陽性或假陽性結(jié)果，還需做進一步實驗確定。