DLBCL化療耐藥與細胞因子IL-6、IL-10水平的相關性

王文霞 王 彬 劉新紅

1.山東省臨朐縣人民醫(yī)院血液腫瘤科，山東臨朐 262600；2.山東省臨朐縣人民醫(yī)院放療科，山東臨朐 262600

DLBCL化療耐藥與細胞因子IL-6、IL-10水平的相關性

王文霞1王 彬1劉新紅2

1.山東省臨朐縣人民醫(yī)院血液腫瘤科，山東臨朐 262600；2.山東省臨朐縣人民醫(yī)院放療科，山東臨朐 262600

目的 通過檢測彌漫大B細胞淋巴瘤（DLBCL）患者治療前、后血清細胞因子白介素（IL）-6、IL-10的水平變化，探討IL-6、IL-10的表達水平與DLBCL化療耐藥的相關性。 方法 將40例確診的DLBCL患者按對化療的敏感性分為兩組（化療耐藥組及化療敏感組）各20例，選擇同期20例健康人作為對照組，用ELISA法測定DLBCL患者各階段及對照組血清IL-6、IL-10的水平。 結果 化療耐藥組治療前的血清中IL-6、IL-10表達水平均明顯高于化療敏感組和對照組（均P＜0.05），治療緩解后明顯低于治療前（P＜0.05）；DLBCL復發(fā)耐藥時，患者血清中的IL-6、IL-10表達水平又高于緩解時水平 （均P＜0.05）。 結論 血清中細胞因子IL-6、IL-10的表達可預測DLBCL的療效，可能是DLBCL耐藥的相關指標。

彌漫大B細胞淋巴瘤；細胞因子；白細胞介素-6；白細胞介素-10；細胞耐藥

彌漫大B細胞淋巴瘤（DLBCL）是一種具有異質性的惡性腫瘤，是非霍奇金淋巴瘤（NHL）病理類型中為最常見的一種，其異質性表現(xiàn)在臨床表現(xiàn)、組織學形態(tài)、分子生物學和預后等方面。盡管隨著對DLBCL研究的進展及治療方法的完善，但仍有半數(shù)以上的DLBCL病例不能治愈。研究表明多藥耐藥基因過度表達是其難治的主要原因，但不能完全解釋清楚[1-2]。難治性標準參照參考文獻[3]。目前對于細胞因子與DLBCL化療耐藥相關性的研究較少，本研究探討DLBCL患者化療耐藥與血清細胞因子IL-6、IL-10水平的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取自2010年12月～2011年12月臨朐縣人民醫(yī)院血液腫瘤科收治的40例初治的接受正規(guī)化療、依從性好且堅持隨訪的DLBCL患者為研究對象，均經病理活檢、免疫組織化學證實。分為化療耐藥組（化療耐藥患者，n=20）和化療敏感組（化療敏感患者，n=20），其中男22例，女18例，年齡20～76歲，中位年齡36歲。入選標準：確診的DLBCL患者，無明顯化療禁忌癥，接受正規(guī)化療并堅持隨訪。排除標準：心臟疾病、慢性呼吸系統(tǒng)及肝腎疾病，其他疾病繼發(fā)的惡性腫瘤，影響血清細胞因子IL-6、IL-10指標的其他各種疾病。另選擇同期20例健康人作為對照組。兩組在年齡、性別等一般資料上比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測方法

采用ELISA法檢測所有血清中的IL-6、IL-10水平，三組患者在治療前空腹抽取靜脈血5 mL，化療敏感組及耐藥組分別給予標準方案及強化方法治療4周期，治療結束均空腹抽靜脈血5 mL。離心機離心，于-80℃低溫冰箱保存血清標本，分別檢測血清中的IL-6、IL-10水平。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用統(tǒng)計軟件SPSS 15.0對實驗數(shù)據(jù)進行分析，計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（±s）表示，采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 所有研究對象治療前血清IL-6、IL-10表達水平比較

所有研究對象治療前血清IL-6、IL-10的表達水平示，化療耐藥組明顯高于化療敏感組和對照組（均P＜0.05），化療敏感組與對照組之間無顯著性差異。見表1。

表1 治療前DLBCL患者和正常對照組IL-6、IL-10水平（±s，pg/mL）

表1 治療前DLBCL患者和正常對照組IL-6、IL-10水平（±s，pg/mL）

指標F值 P值組別化療耐藥組 化療敏感組 對照組IL-6 IL-10 13.01±2.36 51.28±5.79 5.49±0.31 27.56±5.78 5.41±1.98 29.98±5.86 13.468 14.683＜0.05＜0.05

2.2 化療敏感組治療各階段及對照組血清IL-6、IL-10表達比較

化療敏感組治療前后及對照組血清中IL-6、IL-10水平示：治療前、緩解后與對照組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 化療敏感組治療各階段及對照組血清IL-6、IL-10 水平比較（±s，pg/mL）

表2 化療敏感組治療各階段及對照組血清IL-6、IL-10 水平比較（±s，pg/mL）

指標F值 P值組別對照組 化療敏感組治療前 緩解后IL-6 IL-10 5.41±1.98 29.98±5.86 5.49±0.31 27.56±5.78 5.36±0.83 27.48±2.32 3.162 2.167＞0.05＞0.05

2.3 化療耐藥組治療各階段血清中IL-6、IL-10表達比較

化療耐藥組DLBCL治療各階段血清中的IL-6、IL-10水平，治療后緩解者明顯低于治療前（P＜0.05）?；熌退幗M發(fā)生復發(fā)耐藥時，患者血清中的IL-6、IL-10水平高于緩解時水平（P＜0.05），且發(fā)生復發(fā)耐藥時IL-6、IL-10水平與治療前無差異（P ＜ 0.05），見表 3。

表3 化療耐藥組DLBCL治療各階段血清IL-6、IL-10水平（±s，pg/mL）

表3 化療耐藥組DLBCL治療各階段血清IL-6、IL-10水平（±s，pg/mL）

注：與緩解時比較，*P＜0.05

指標 階段治療前 緩解時 復發(fā)耐藥時IL-6 IL-10 13.01±2.36*51.28±5.79*5.18±2.19 28.23±2.85 12.98±2.16*66.53±0.45*

3 討論

研究表明，DLBCL的多重耐藥現(xiàn)象僅從耐藥基因角度無法完全解釋。且有研究證實：在DLBCL導致細胞耐藥的原因之一是耐藥的信號轉導通路中被激活[4-5]。近年來研究發(fā)現(xiàn)細胞因子IL-6、IL-10在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中有重要作用，這些因子可能參與腫瘤細胞的轉移及腫瘤微環(huán)境的重建（途徑是通過免疫逃逸）參而影響其發(fā)展和轉移[6]。且有研究表明，預后差的DLBCL患者血清IL-6明顯升高，提示血清IL-6是DLBCL患者預后不良因素之一。血清中IL-6水平與腫瘤大小或分期呈正相關[7]。同自身抗體一樣，IL-6與腫瘤負荷密切相關。IL-6水平顯著增高可用于DLBCL患者的早期診斷，預后判斷和治療療效檢測[8]。本研究結果證實：治療前化療耐藥組血清IL-6水平均高于化療敏感組及正常對照組水平，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。而對照組與化療敏感組水平無差異，且治療后化療耐藥組緩解者血清IL-6水平會有一定程度的下降，治療無效者及復發(fā)耐藥者血清IL-6水平與治療前無明顯變化。進一步提示血清IL-6水平的升高與DLBCL細胞耐藥相關，血清IL-6水平的升高與復發(fā)耐藥相關。上述結果表明血清中IL-6水平與化療耐藥性相關。

研究證實，IL-10作為人類重要的免疫調節(jié)細胞因子既可促進癌癥（通過抑制免疫刺激細胞增殖）又可抑制癌癥（主要通過抗血管生成），它由B細胞分泌（正常與異常B細胞）。IL-10能抑制TFN-γ細胞因子或直接拮抗TNF細胞因子的作用而抑制機體的抗病毒免疫。且研究表明，IL-10的基因多態(tài)性與DLBCL侵襲性相關[9]。其基因的多態(tài)性也代表了DLBCL的異質性。在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，在一定程度其血清水平代表腫瘤負荷大小，代表腫瘤的惡性程度。本研究結果證實，治療前化療耐藥組血清IL-10水平均高于化療敏感組及正常對照組水平，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），而對照組與化療敏感組水平無差異，且治療后化療耐藥組緩解者血清IL-10水平會有一定程度的下降，治療無效者及復發(fā)耐藥者血清IL-10水平與治療前無明顯變化。進一步提示血清IL-10水平的升高與DLBCL細胞耐藥相關，血清IL-10水平的升高與復發(fā)耐藥相關。上述結果表明血清中IL-10水平與化療耐藥性相關。本研究證實，DLBCL患者中血清IL-10高表達者容易發(fā)生復發(fā)耐藥，預后差，提示DLBCL細胞耐藥與血清IL-10水平有關。血清中細胞因子IL-6、IL-10的表達可預測DLBCL的療效，可能參與彌漫大B細胞淋巴瘤細胞的化療耐藥，是DLBCL耐藥的相關指標。

[1]Ohsawa M，IkuraY，F(xiàn)ukushima H，et al.Immunohistochemical expression of multidrug resistance proteins as a predictor of poor response to chemotherapy and prognosis in patients with nodal diffuse large B-cell lymphoma[J].Oncology，2005，68（4-6）：422-431.

[2]錢素英，毛聯(lián)鋼，吳寧寧，等.BCRP及MDR1在非霍奇金淋巴瘤的表達及預后分析[J].實用腫瘤雜志，2009，24(3)：266-268.

[3]白血病·淋巴瘤編輯委員會.難治性非霍奇金淋巴瘤的診斷標準[J].白血病·淋巴瘤，2007，16（4）：349.

[4]袁曉露.彌漫大B細胞淋巴瘤信號通路與耐藥研究進展[J].白血病·淋巴瘤，2008，18：76-78.

[5]青曉艷，姚文秀，徐義全.彌漫大B細胞淋巴瘤的研究現(xiàn)狀及展望[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2012，6（4）：136-138

[6]Lin WW，Karin M.A cytokine-mediated link between innate immunity，inflammation，and Cancer[J].J Clin Invest，2007，l17（5）：1175-1183.

[7]何貴金，杜懷林，夏振龍，等.血清IL-6水平與膽管癌及腫瘤負荷的相關性研究[J].中華普通外科雜志，2000，15（10）：585-586.

[8]李樂，蘇麗萍，馬莉，等.非霍奇金淋巴瘤多藥耐藥的實驗研究[J].中華腫瘤雜志，2009，31（3）：199-202.

[9]Kube D，Hua TD，Von BF，et al.Effect of interleukin-10 gene polymorphisms on clinical outcome of patients with aggressive non-Hodgkin′s lymphoma：an exploratory study[J].Clin Cancer Res，2009，14：3777-3784.

Correlation between the chemotherapy resistance of diffuse large B-cell lymphoma and cytokines IL-6 and IL-10

WANG Wenxia1WANG Bin1LIU Xinhong2
1.Department of Hematology and Oncology,the People′s Hospital of Linqu County,Shandong Province,Linqu 262600,China;2.Department of Radiation Oncology,the People′s Hospital of Linqu County,Shandong Province,Linqu 262600,China

ObjectiveTo explore the relationship between the expression of serum cytokines IL-6,IL-10 and chemotherapy resistance in patients with diffuse large B-cell lymphoma(DLBCL)by monitoring the level of serum cytokines IL-6,IL-10.Methods40 cases which diagnosed as DLBCL were enrolled,according to the sensitivity to the chemotherapy,they were divided into two groups(chemotherapy resistant group and chemotherapy sensitive group),and 20 cases in each group,another 20 cases of healthy individuals were enrolled as the control group.The levels of serum cytokines IL-6，IL-10 at different stage in DLBCL patients and normal control group were detected by ELISA.ResultsThe levels of serum cytokines IL-6,IL-10 in chemotherapy resistant group before therapy was all higer than chemotherapy sensitive group and control group(all P＜0.05),after the treatment,it was lower than before(P＜0.05);the levels of serum cytokines IL-6,IL-10 after the DLBCL recurrence and drug resistance were higher than the remission.ConclusionThe levels of serum IL-6,IL-10 not only can predict the chemotherapy efficacy of DLBCL but also are the drug resistance factors of DLBCL.

Diffuse large B-cell lymphoma;Cytokines;IL-6;IL-10;Drug resistance

R733

C

1673-7210（2012）08（c）-0154-02

2012-04-06 本文編輯：衛(wèi) 軻）