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    山藥不同炮制品對(duì)小腸收縮及對(duì)消化酶活性的影響

    2012-11-20 03:18:50孔翠萍崔小兵
    中國(guó)民族民間醫(yī)藥 2012年15期
    關(guān)鍵詞:麩炒離體唾液

    孔翠萍 柴 川 崔小兵

    1.南京瑞爾醫(yī)藥有限公司,江蘇 南京 210000;2.南京中醫(yī)藥大學(xué),江蘇 南京 210029

    山藥不同炮制品對(duì)小腸收縮及對(duì)消化酶活性的影響

    孔翠萍1柴 川2崔小兵2

    1.南京瑞爾醫(yī)藥有限公司,江蘇 南京 210000;2.南京中醫(yī)藥大學(xué),江蘇 南京 210029

    目的:觀察山藥的不同炮制品對(duì)家兔小腸收縮及其對(duì)唾液淀粉酶活性的影響。方法:通過(guò)離體回腸法觀察山藥不同炮制品對(duì)小腸收縮作用的影響。以紫外分光光度法觀察山藥的不同炮制品其對(duì)消化酶活性的影響。結(jié)果:麩炒山藥對(duì)小腸收縮抑制作用最強(qiáng),具有明顯的抑制小腸收縮作用。山藥不同炮制品對(duì)體外唾液淀粉酶活力的作用無(wú)顯著變化。說(shuō)明麩炒山藥的健脾作用與唾液淀粉酶的活性無(wú)關(guān)。結(jié)論:麩炒山藥對(duì)小腸的收縮有明顯的抑制作用。

    麩炒山藥,小腸收縮抑制,消化酶活性

    山藥為薯蕷科多年生宿根蔓草植物山藥 (Dioscorea opposita Thunb.)的塊根,又名白苕、土薯、大薯、薯藥,具有補(bǔ)脾、益肺、固腎、益精的作用,原名薯蕷,首見(jiàn)于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為上品。《本草綱目》云:“山藥性溫味甘平無(wú)毒、健脾胃、益肺腎、止瀉痢,化痰涎,潤(rùn)皮毛”。山藥的炮制方法有麩炒、清炒等,不同的炮制方法對(duì)山藥的活性有顯著影響。本文通過(guò)離體回腸及體外唾液淀粉酶的活性的測(cè)定,比較山藥生品、山藥麩炒品、山藥清炒品的作用機(jī)制,為山藥炮制提供了一個(gè)客觀的評(píng)價(jià)方法,同時(shí)為山藥焦香健脾理論提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 藥品與試劑

    1.1 山藥的炮制[1]

    依據(jù)中藥炮制的相關(guān)理論,本實(shí)驗(yàn)將山藥 (Rhizoma Dioscoreae)加工為凈制山藥、炒山藥、麩炒山藥三個(gè)品種。

    炒山藥 稱取適量?jī)糁粕剿幤?,置燒熱的平底鍋中,用文火加熱,炒至深黃色,有香氣,取出放涼。

    麩炒山藥 稱取適量麥麩,置燒熱的平底鍋中,炒至冒煙,放入凈制山藥片,不斷翻炒,炒至深黃色,篩去麩皮,山藥和麩皮各冷涼備用。每100kg藥物,用麥麩10kg。

    1.2 試劑

    NaCl、 KCl、 NaH2PO4、 NaHCO3、 MgCl2、 CaCl2、NaOH、可溶性淀粉、Na2HPO、苯酸鉀、KI、KIO3、HCl都是AR級(jí)。

    1.3 藥物水提液的制備

    山藥水提液 凈制山藥,炒黃山藥,麩炒山藥各3g于燒杯中,加水 30ml,煮沸 0.5h,冷卻,過(guò)濾,留取上清液。

    1.4 動(dòng)物

    大耳白家兔,清潔級(jí),體重2.0-2.5 kg,2月齡,南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(滬)2007-0005。

    1.5 儀器

    多功能生理藥理記錄儀Power Lab,Power Lab/8s,澳大利亞AD儀器公司。水浴恒溫振蕩器,上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠。754型紫外分光光度計(jì),上海光譜儀器有限公司。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 對(duì)小腸收縮作用的影響[2-3]

    取禁食24h的家兔,以擊斃法處死,立即常規(guī)剖腹。取出回腸,去除附著的系膜或脂肪等組織。迅速浸入在4℃充氧 的 臺(tái) 氏 液[4](NaCl 8.00g,KCl 0.20g,NaH2PO40.05g,NaHCO31.00g,MgCl20.10g,CaCl20.20g,葡萄糖1.00g,定容至1L)溶液中。取回腸一段,懸掛于盛有臺(tái)氏液的麥?zhǔn)显〔壑?,一端系在L型通氣管上,加以固定,供給含有5%CO2的氧氣,另一端固定在壓力換能器上,基礎(chǔ)張力1g,浴槽溫度37.0℃,穩(wěn)定1h。用Power lab進(jìn)行描記。待自發(fā)性節(jié)律恢復(fù)后,描記基線,然后開(kāi)始用藥,記錄張力均值,計(jì)算收縮百分率。

    2.2 對(duì)唾液淀粉酶活性的影響[5]

    取50ml刻度試管數(shù)只,a、b、c、d。一只作對(duì)照管,其余作測(cè)定管。各管內(nèi)加0.04%可溶性淀粉溶液 (可溶性淀粉 0.2g,加蒸餾水 5ml,搖成混懸液,稱取無(wú)水Na2HPO413.3g,加蒸餾水250ml,煮沸后加入淀粉溶液,繼續(xù)煮沸1min,冷卻后加蒸餾水稀釋至500ml)5ml。將測(cè)定管置于37℃水浴內(nèi)預(yù)溫5min。b及唾液淀粉酶溶液 (1∶1000)0.5ml混勻,c管加入待測(cè)樣品液0.1ml混勻,再置于37℃水浴15min后取出;于各管中加入0.01mol/L碘應(yīng)用液(碘酸鉀3.56g及碘化鉀45g,置于1L容量瓶中,加蒸餾水約800ml,緩緩加入濃鹽酸9ml,搖勻,再加蒸餾水定容,使用時(shí)按1:10稀釋,盛于棕色瓶中保存)5ml,并用蒸餾水稀釋至50ml刻度;立即混勻,在570nm處進(jìn)行比色測(cè)定,以PBS緩沖液 (NaH2PO4約8.0g,加生理鹽水至1L,用10%NaOH調(diào)PH值至8.0)校正光密度到零點(diǎn),讀取各管光密度值。通過(guò)a管光密度值-b管光密度值計(jì)算酶的作用,通過(guò)-c管光密度值-d管光密度值比計(jì)算樣品溶液干預(yù)下酶的作用,比較兩次酶的作用效果,觀察樣品溶液對(duì)酶活性的響。

    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)均以Excel統(tǒng)計(jì),以±SD表示,進(jìn)行t檢驗(yàn)。

    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    3.1 山藥的不同炮制品對(duì)小腸收縮作用的影響

    參照2.1方法對(duì)山藥不同炮制品進(jìn)行實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1,柱狀分析圖見(jiàn)1。

    表1 山藥不同炮制品水提液對(duì)離體小腸收縮作用的影響 (±SD,n=5)

    表1 山藥不同炮制品水提液對(duì)離體小腸收縮作用的影響 (±SD,n=5)

    注:*P<0.05。

    組別 抑制收縮百分率 (%)1.1±0.9凈制山藥 1.47±0.29*炒黃山藥 1.54±0.24*麩炒山藥 1.8±1.1空白*

    圖1 山藥不同炮制品水提液對(duì)離體小腸收縮作用的影響

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:凈制山藥水提液、炒黃山藥水提液、麩炒山藥水提液對(duì)離體小腸有顯著抑制收縮作用 (*P<0.05)。麩炒后麥麩中健脾作用的物質(zhì)可能轉(zhuǎn)移進(jìn)入了山藥。

    3.2 對(duì)消化酶活性的影響

    參照2.2方法對(duì)山藥不同炮制品進(jìn)行實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

    表2 不同山藥炮制品提取液對(duì)唾液淀粉酶活性的影響 ±SD,n=5)

    表2 不同山藥炮制品提取液對(duì)唾液淀粉酶活性的影響 ±SD,n=5)

    組別 酶活力抑制百分率 (%)15±10麩炒山藥 25±19炒黃山藥 31±21凈制山藥空白48±38

    本實(shí)驗(yàn)方案下,山藥不同炮制品對(duì)體外唾液淀粉酶活力的促進(jìn)作用無(wú)顯著意義。說(shuō)明麩炒山藥的健脾作用與體外唾液淀粉酶的活性無(wú)關(guān)??赡苁軐?shí)驗(yàn)方法限制,是否有該方面功效仍待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

    4 結(jié)論

    通過(guò)紫外分光測(cè)光度法觀察山藥麩炒前后對(duì)消化酶的活性的影響,用離體回腸法觀察其對(duì)小腸收縮作用的影響。結(jié)果提示山藥經(jīng)麩炒后可增強(qiáng)其健脾作用,其健脾作用增強(qiáng)可能與調(diào)節(jié)小腸收縮作用有關(guān);山藥不同炮制品對(duì)體外唾液淀粉酶活力的促進(jìn)作用無(wú)顯著影響,說(shuō)明麩炒山藥的健脾作用與體外唾液淀粉酶的活性無(wú)關(guān)。

    [1]龔千鋒.中藥炮制學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2003:62.

    [2]岳嶺,華永慶,崔小兵,李偉.炒焦麥麩健脾有效部位初探[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(2):388-389.

    [3]李偉,文紅梅,崔小兵,等.白術(shù)健脾有效成分研究[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2006,22(6):366.

    [4]徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:1834,1311.

    [5]岳嶺,華永慶,崔小兵,李偉.不同炮制方法對(duì)麥麩健脾功效的影響[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐,2010,24(3):41-44.

    R965.2

    A

    1007-8517(2012)15-0062-02

    南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)一級(jí)學(xué)科開(kāi)放課題資助,項(xiàng)目編號(hào):2011ZYX2-004;南京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)研究與重點(diǎn)培育專項(xiàng)基金資助,項(xiàng)目編號(hào):10XJC07。

    孔翠萍,女,主要從事藥物制劑研究。E-mail:kcp116@126.com。

    崔小兵 (1975-),男,江蘇如皋人,博士,高級(jí)實(shí)驗(yàn)師,主要從事新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。E-mail:xiaobingcui@163.com。

    2012.05.17)

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