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    燈盞花素對(duì)小鼠化學(xué)性記憶障礙的改善作用

    2012-11-17 08:31:32翟澤玲商亞珍
    中國生化藥物雜志 2012年1期
    關(guān)鍵詞:巴比妥鈉亞硝酸鈉花素

    翟澤玲,顏 勇,商亞珍

    (河北省中藥研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,承德醫(yī)學(xué)院 中藥研究所,河北 承德 067000)

    老年性癡呆是一種進(jìn)行性神經(jīng)退行性疾病,以功能性神經(jīng)元退化并在腦病理區(qū)出現(xiàn)老年斑、神經(jīng)纖維纏結(jié)和神經(jīng)元丟失為特征,而學(xué)習(xí)、記憶障礙是老年性癡呆普遍而嚴(yán)重的表現(xiàn)[1]。目前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用腦缺氧,某些化學(xué)試劑等方法引起動(dòng)物不同時(shí)程記憶缺陷模擬老年癡呆?。?-3],來研究藥物治療老年性癡呆病的作用。

    燈盞花素為血管保護(hù)藥,能夠?qū)鼓X垂體后葉素所致的神經(jīng)缺血、缺氧。本實(shí)驗(yàn)采用戊巴比妥鈉和亞硝酸鈉引起小鼠記憶獲得和記憶保持障礙模型研究了燈盞花素對(duì)小鼠學(xué)習(xí)、記憶的作用。

    1 材料

    燈盞花素,吉林省輝南輝發(fā)制藥股份有限公司;戊巴比妥鈉,丹麥-中國醫(yī)藥公司北京公司生產(chǎn)分裝;亞硝酸鈉,天津市北辰驊躍化學(xué)試劑廠。

    小鼠水迷宮由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所提供。

    雄性昆明種小鼠,18~22 g,清潔級(jí),河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物飼養(yǎng)中心提供,合格證編號(hào):703119。

    2 方法

    2.1 燈盞花素對(duì)戊巴比妥鈉引起小鼠記憶獲得障礙的作用

    小鼠40只,隨機(jī)等分為5組:空白對(duì)照組、戊巴比妥鈉模型組、燈盞花素高、中、低劑量組。燈盞花素高、中、低劑量組分別皮下注射5,10和20mg/kg燈盞花素,1次/d,給藥7d;空白對(duì)照組和戊巴比妥鈉模型組給等體積水。在第7天給藥40 min后,令小鼠熟悉水環(huán)境3 min。第8天,在皮下注射藥物40 min和腹腔注射戊巴比妥鈉15mg/kg后30 min,各組小鼠進(jìn)行水迷宮測試,記錄小鼠到達(dá)終點(diǎn)平臺(tái)的時(shí)間(潛伏期)和進(jìn)入盲端的次數(shù),每天上下午各測試1次,小鼠學(xué)習(xí)成績?nèi)纱纹骄?,連續(xù)測試5 d。

    2.2 燈盞花素對(duì)亞硝酸鈉引起小鼠記憶保持障礙的作用

    小鼠40只,隨機(jī)等分5組:空白對(duì)照組、亞硝酸鈉組、燈盞花素高、中、低劑量組。燈盞花素高、中、低劑量組分別皮下注射5,10和20mg/kg燈盞花素,1次/d,連續(xù)給藥7d;空白對(duì)照組和亞硝酸鈉組給等體積水。第8天開始,每天給藥30 min后,進(jìn)行水迷宮訓(xùn)練,上下午各訓(xùn)練一次,學(xué)習(xí)成績?nèi)纱纹骄?。?dāng)所有小鼠到達(dá)終點(diǎn)平臺(tái)的潛伏期的時(shí)間少于20 s,進(jìn)入盲端的次數(shù)小于2次時(shí),小鼠訓(xùn)練即達(dá)標(biāo),可進(jìn)行記憶保持障礙實(shí)驗(yàn)。達(dá)標(biāo)后的小鼠立即腹腔注射亞硝酸鈉120mg/kg(空白對(duì)照組腹腔注射等體積水),24 h后進(jìn)行水迷宮測試,記錄各小鼠到達(dá)終點(diǎn)平臺(tái)的潛伏期以及進(jìn)入盲端的次數(shù)。

    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    數(shù)據(jù)用one-way ANVOA Duncan's multiple rang test進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。

    3 結(jié)果

    3.1 燈盞花素對(duì)戊巴比妥鈉引起小鼠記憶獲得障礙的改善作用

    結(jié)果見表1~2。在連續(xù)5 d的小鼠水迷宮記憶獲得測試中,與空白對(duì)照組相比,戊巴比妥鈉明顯引起小鼠記憶獲得障礙,戊巴比妥鈉組小鼠到達(dá)終點(diǎn)平臺(tái)潛伏期和進(jìn)入盲端次數(shù)顯著增加(P<0.01);燈盞花素高、中、低劑量組顯著抑制戊巴比妥鈉引起的小鼠記憶獲得障礙,均能降低戊巴比妥鈉引起的小鼠到達(dá)終點(diǎn)平臺(tái)的潛伏期和進(jìn)入盲端的次數(shù)(P<0.01或0.05)。

    3.2 燈盞花素對(duì)亞硝酸鈉引起小鼠記憶保持障礙的改善作用

    結(jié)果見表3。在小鼠水迷宮測試中,與空白對(duì)照組相比,亞硝酸鈉明顯增加訓(xùn)練達(dá)標(biāo)小鼠到達(dá)終點(diǎn)平臺(tái)的時(shí)間(1.97倍)和進(jìn)入盲端的次數(shù)(1.71倍),燈盞花素高、中、低劑量組均顯著翻轉(zhuǎn)亞硝酸鈉引起小鼠記憶保持障礙,到達(dá)終點(diǎn)平臺(tái)的時(shí)間分別降低了24.5%,105.2% 和237.0%;進(jìn)入盲端的次數(shù)分別降低了7.1%,231.9%和150.0%。

    表1 燈盞花素對(duì)戊巴比妥鈉引起小鼠記憶獲得障礙的作用(n=8,±s)

    表1 燈盞花素對(duì)戊巴比妥鈉引起小鼠記憶獲得障礙的作用(n=8,±s)

    與空白對(duì)照組比較:1 P<0.01;與模型組比較:2 P<0.05,3 P<0.01

    組 別 劑量/(mg/kg)潛伏期/s第1天第2天第3天第4天第5天空白對(duì)照組 - 50.9±3.6 43.8±5.5 28.5±5.3 22.6±5.9 12.4±1.7模型組 - 57.5±1.71 48.6±4.21 44.8±3.61 34.1±5.01 29.4±6.91燈盞花素組 5 54.4±3.92 47.0±4.12 28.7±4.42 19.6±4.32 18.5±3.42 10 51.5±5.63 42.2±4.63 36.9±5.73 14.2±1.73 20.6±4.53 20 44.5±5.53 28.0±5.73 26.1±7.03 13.2±1.53 15.1±3.33

    表2 燈盞花素對(duì)戊巴比妥鈉引起小鼠記憶獲得障礙的作用(n=8,±s)

    表2 燈盞花素對(duì)戊巴比妥鈉引起小鼠記憶獲得障礙的作用(n=8,±s)

    與空白對(duì)照組比較:1 P<0.01;與模型組比較:2 P<0.01

    組 別 劑量/(mg/kg)進(jìn)入盲端次數(shù)/次第1天第2天第3天第4天第5天空白對(duì)照組 - 4.19±0.79 3.25±0.77 1.69±0.47 1.25±0.37 0.62±0.23模型組 - 6.63±0.611 5.94±0.501 4.00±0.741 3.19±0.711 1.88±0.741燈盞花素組 5 3.50±0.602 2.94±0.442 1.44±0.272 0.87±0.352 0.50±0.192 10 4.06±0.492 3.31±0.392 2.31±0.522 0.81±0.212 0.75±0.212 20 3.31±0.412 1.75±0.402 1.44±0.632 0.94±0.562 0.62±0.302

    表3 燈盞花素對(duì)亞硝酸鈉引起小鼠記憶保持障礙的作用(n=8,±s)

    表3 燈盞花素對(duì)亞硝酸鈉引起小鼠記憶保持障礙的作用(n=8,±s)

    與空白對(duì)照組比較:1 P<0.01;與模型組比較:2 P<0.05,3P<0.01

    組 別 劑量/(mg/kg) 潛伏期/s 進(jìn)入盲端次數(shù)/次空白對(duì)照組 - 19.4±4.9 2.28±0.49模型組 - 38.7±8.21 3.75±0.531燈盞花素組 5 31.1±4.32 3.50±0.652 10 18.9±5.03 1.13±0.353 20 11.5±1.33 1.50±0.573

    4 討論

    老年性癡呆是一種多病因參與的神經(jīng)減退性疾病,臨床以大腦皮質(zhì)獲得性高級(jí)功能受損即癡呆為主要特征[4]。腦內(nèi)老年斑的形成、神經(jīng)纖維纏結(jié)、神經(jīng)元丟失以及腦內(nèi)自由基系統(tǒng)、神經(jīng)遞質(zhì)失衡等都與老年性癡呆的發(fā)生密切相關(guān)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性也直接影響學(xué)習(xí)、記憶,中樞興奮劑有利于促進(jìn)學(xué)習(xí)、記憶;中樞抑制劑阻抑學(xué)習(xí)、記憶的獲得。戊巴比妥鈉是神經(jīng)系統(tǒng)抑制劑,能夠引起動(dòng)物記憶獲得障礙[5]。神經(jīng)缺氧也是引起學(xué)習(xí)、記憶障礙的重要因素,亞硝酸鈉是一種致缺氧劑,進(jìn)入機(jī)體后引起高鐵血紅蛋白血癥,高鐵血紅蛋白與羥基牢固結(jié)合,不能與氧結(jié)合,造成腦和全身性缺氧,抑制ATP的生成,而神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)ATP有極強(qiáng)依賴性,因而亞硝酸鈉也能夠引起學(xué)習(xí)、記憶障礙。

    本實(shí)驗(yàn)采用小鼠連續(xù)5 d腹腔注射15mg/kg戊巴比妥鈉和單劑量腹腔注射120mg/kg亞硝酸鈉分別制備小鼠記憶獲得和記憶保持障礙模型來研究燈盞花素抗癡呆改善記憶障礙的活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),燈盞花素對(duì)戊巴比妥鈉和亞硝酸鈉引起的小鼠記憶獲得和記憶保持障礙都有明顯的改善作用。燈盞花素是黃酮類化合物燈盞花乙素和燈盞花甲素的混合物,對(duì)心腦血管損傷具有較強(qiáng)的保護(hù)作用,特別是對(duì)自由基系統(tǒng)調(diào)節(jié)和炎癥的對(duì)抗作用[6-7],都有利于對(duì)學(xué)習(xí)、記憶功能障礙的改善。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)合我室以前的研究[8]表明燈盞花素極有可能對(duì)老年性癡呆的治療作出貢獻(xiàn)。

    [1]沈麗霞,王繼峰.益智方對(duì)急性衰老模型小鼠記憶障礙的作用[J].中國老年學(xué)雜志,2007,27(3):206-207.

    [2]寧 煉,戴向東,毛 平.心智合劑對(duì)癡呆及記憶障礙模型動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究[J].中成藥,1996,18(1):32-33.

    [3]繆 紅,程建軍,石艷華,等.老年性癡呆病的疾病信號(hào)及常用動(dòng)物模型[J].承德醫(yī)學(xué)院,1996,24(1):79-82.

    [4]李 瀟,孫永福,王鳳山.低分子多糖在阿爾茨海默病防治中的研究進(jìn)展[J].中國生化藥物雜志,2009,30(5):344-347.

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    [8]石艷華,繆 紅,蘇丙凡,等.燈盞花素對(duì)D-半乳糖引起小鼠記憶障礙的改善作用[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2008,19(6):1445-1446.

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