兩種肺炎衣原體抗體檢測(cè)方法的比較及臨床應(yīng)用分析

李 航 李政國(guó) 馬春燕

(河南開(kāi)封市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 開(kāi)封 475000）

肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae)是急性呼吸系統(tǒng)感染性疾病 的常見(jiàn)病原體之一，易引起肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等。起病緩慢，臨床癥狀與肺炎支原體相似，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)熱等，一般癥狀較輕。CP不但可以導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)疾病，還可引起神經(jīng)系統(tǒng)，循環(huán)系統(tǒng)等肺外其它系統(tǒng)的嚴(yán)重并發(fā)癥。因肺炎衣原體病原菌缺乏細(xì)胞壁，對(duì)臨床上常規(guī)治療肺炎的藥物不敏感，僅對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類，四環(huán)素，氯霉素，強(qiáng)力霉素等抗菌素治療有效，為指導(dǎo)臨床正確合理應(yīng)用抗菌素，對(duì)是否為肺炎衣原體感染的血清進(jìn)行早期快速診斷顯得尤其重要。我們對(duì)2011年10月至2012年3月收治入院的226例疑似CP感染的呼吸道感染患者，同時(shí)進(jìn)行間接熒光法和間ELISA法的檢測(cè)，并分析對(duì)肺炎衣原體感染早期診斷的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 儀器與材料

1.1 一般資料

2011年10月至2012年3月收治入我院呼吸科的疑似CP感染的226例(男132，女94)呼吸道感染患者，男：女=1.4?1；年齡23～94歲。

1.2 儀器安圖生物全自動(dòng)酶標(biāo)儀2010型；安圖生物全自動(dòng)洗板機(jī)，德國(guó)萊卡熒光顯微鏡。

1.3 試劑歐蒙肺炎衣原體抗體診斷試劑盒(間接熒光法)(德國(guó)歐蒙生產(chǎn))；肺炎衣原體(CP)診斷試劑盒(ELISA間接法)深圳博卡生物技術(shù)研究所生產(chǎn))。

1.4 樣本采集患者入院第二天采靜脈血3mL，分離血清于-20℃冰凍保存，用于CP IgM抗體檢測(cè)。

2 方法和結(jié)果

2.1 間接免疫熒光試驗(yàn)(indirect immunofluorescent assay，IIF)采用德國(guó)歐蒙間接熒光試劑盒測(cè)定CP IgM抗體滴度，結(jié)果判定：IgM≥1∶10為陽(yáng)性。

2.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)按試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定，S/CO值≥2.1為陽(yáng)性。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 兩種不同方法檢測(cè)血清中CPIgM抗體的比較

χ2=1.841(P＞0.05)經(jīng)過(guò) χ2檢驗(yàn)，兩種方法差異無(wú)顯著性(P＞0.05)

2.3 根據(jù)臨床病情嚴(yán)重程度將CP感染分為3級(jí)：①輕度：僅存在呼吸道癥狀、體征，肺部X線改變輕微；②中度：以呼吸道癥狀、體征為主，肺部X線改變明顯；③重度：除②臨床表現(xiàn)以外，同時(shí)合并有神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)等嚴(yán)重肺外并發(fā)癥。收集70例確診CP感染患者血清進(jìn)行間接免疫熒光試驗(yàn)，用Spearman等級(jí)相關(guān)統(tǒng)計(jì)方法，分析血清CPIgM抗體滴度與患者病情嚴(yán)重程度之間相關(guān)性，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 70例患者病情嚴(yán)重程度與CPIgM抗體滴度的統(tǒng)計(jì)

70例CP感染患者中，輕度CP感染38例(54.3%)，中度感染17例(24.3%)，重度感染15例(21.4%)；CP抗體滴度1∶10有24例(34.3%)，滴度1∶32有15例(21.4%)，滴度1∶100有3例(4.3%)，滴度1∶320有9例(12.9%)。滴度1∶1000有19例(27.1%)，經(jīng)SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析，血清CP抗體滴度與CP感染患者的病情分級(jí)呈正相關(guān)r=0.894，P＜0.05)。

3 討 論

肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae Cp)是一類嚴(yán)格真核細(xì)胞內(nèi)寄生，具有獨(dú)特發(fā)育周期，并能通過(guò)細(xì)菌濾器的原核細(xì)胞型微生物，具高度傳染性。肺炎衣原體屬嚴(yán)格的人類病原體，無(wú)動(dòng)物儲(chǔ)存宿主。主要傳播途徑是通過(guò)人與人之間的呼吸道飛沫進(jìn)行傳播，感染后潛伏期平均為30d左右，期間該病原體可以刺激體內(nèi)能產(chǎn)生特異性的體液免疫和細(xì)胞免疫，但這種免疫保護(hù)性很弱，容易造成呼吸道反復(fù)和持續(xù)感染。有研究表明肺炎衣原體在機(jī)體內(nèi)持續(xù)感染可長(zhǎng)達(dá)9年，甚至在應(yīng)用抗生素治療期間仍存在持續(xù)感染[1]。CP感染在普通人群中很常見(jiàn)，是成人和兒童呼吸道感染及非典型性肺炎的重要病原體之一，可以引起的疾病包括肺炎、咽炎、喉炎、支氣管炎，以及百日咳樣疾病與反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎[2，3]等。研究表明，隨著患者年齡增長(zhǎng)CP的感染率也會(huì)隨之升高，成年人感染率大于50%，老年人可達(dá)到75%[4]。CP感染分布呈雙峰型，臨床上小兒患者感染后癥狀，體征較輕，而合并有心腦腎等基礎(chǔ)疾病患者或者老年人感染后病情較重。有研究表明.肺炎衣原體感染還與肺氣腫[5]，慢性阻塞性肺疾病(COPD)[6]以及動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)[7，8]。

近年來(lái)，肺炎衣原體感染的發(fā)病率逐漸增高，其感染初期癥狀不典型，臨床上常規(guī)用藥治療效果欠佳，因此，早期快速診斷對(duì)于臨床選擇恰當(dāng)?shù)闹委煼桨甘种匾?。目前?duì)肺炎衣原體的檢測(cè)方法主要有兩種，一種是病原學(xué)檢查：直接涂片，鏡下觀察包涵體，或以熒光或酶標(biāo)記的種特異性單克隆抗體直接檢測(cè)標(biāo)本中肺炎衣原體抗原；另外就是血清學(xué)方法，主要包括ELISA法和微量免疫熒光試驗(yàn)（microimmunofluorescence test，MIF），其中被MIF公認(rèn)為“金標(biāo)準(zhǔn)”。通過(guò)我們的試驗(yàn)研究和分析表明，間接ELISA法適用于檢測(cè)CP感染患者血清中特異性抗體的變化，其敏感度好，特異性強(qiáng)，方法成熟，操作簡(jiǎn)便，價(jià)格低廉與間接熒光免疫法檢測(cè)結(jié)果比較，陽(yáng)性率無(wú)顯著差異(P＞0.05)，適合臨床大批量篩查，以及流行病學(xué)調(diào)查。間接熒光法能準(zhǔn)確測(cè)定出CP感染患者血清中抗體滴度的高低，有助于指導(dǎo)臨床醫(yī)師判斷患者的病情發(fā)展程度，為臨床制定有效的診療方案提供科學(xué)依據(jù)。

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