復(fù)方昆明山海棠顆粒對花生四烯酸致大鼠炎癥模型的初步研究＊

馬珊珊，何 黎，趙 遠，王 媛，萬 屏△

（1.昆明醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院皮膚性病科，云南 昆明650031；2.云南省中醫(yī)中藥研究院，云南 昆明650223）

2.2 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件，方差分析，組間比較用q檢驗。P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.3 實驗結(jié)果 結(jié)果顯示，復(fù)方昆明山海棠顆?？娠@著抑制花生四烯酸誘導(dǎo)的局部炎癥反應(yīng)，與模型組比較具有顯著性差異（P＜0.01 or P＜0.05）。見表1。

表1 各組藥物對花生四烯酸所致大鼠足跖腫脹的影響（－x±s，n＝10）

前期筆者已觀察了復(fù)方昆明山海棠顆粒對巴豆油及角叉菜膠誘導(dǎo)的動物炎癥模型的作用，本實驗重點研究復(fù)方昆明山海棠顆粒對花生四烯酸致大鼠足趾炎癥的作用。進一步探討該顆粒劑的抗炎作用及機制，為臨床應(yīng)用提供一定的實驗依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 動物 雄性SD大鼠，150～220g，購自昆明醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。

1.2 試劑及儀器 復(fù)方昆明山海棠顆粒（CT HHG），云南省滇紅藥業(yè)提供；氫化可的松注射液，浙江仙據(jù)制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號050350；地塞米松片（DEX），浙江仙據(jù)制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號050346?；ㄉ南┧豳徸詓ig ma公司。足跖容積測量儀，型號YLS－7 A，山東醫(yī)學(xué)科學(xué)院生產(chǎn)。

2 實驗方法和結(jié)果

2.1 大鼠足跖炎癥動物模型的建立［1］雄性SD大鼠50只，隨機分為5組，每組10只。分別為生理鹽水（NS）陰性對照組，地塞米松陽性對照組及復(fù)方昆明山海棠顆粒高、中、低（8、4、2 g／kg）劑量組（復(fù)方昆明山海棠顆粒的劑量根據(jù)體表面積比率折算，分別相當于成人臨床用藥劑量的4、2、1倍。）。各組動物灌胃給藥，每天1次，連續(xù)7 d。末次給藥后1 h予各組大鼠左后足跖皮下注射花生四烯酸0.1 mL［以0.2 mol／L碳酸鹽緩沖液（p H＝11.2）配制成0.3%（V／V）］，右后足跖皮下注射0.1 mL碳酸鹽緩沖液作為對照，在致炎后4 h用足跖容積測量儀測量左右足體積，腫脹度為左、右足體積的差值，以腫脹度為炎癥反應(yīng)嚴重程度指標。大鼠足跖皮下注射花生四烯酸后可迅速誘導(dǎo)強烈、持續(xù)的足跖水腫，炎癥反應(yīng)在注射后

3 討論

花生四烯酸在專一酶催化下的產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物能使血管舒張，血管通透性增加，血漿滲出，組織水腫等；并能增加粘附分子活性促使炎細胞由管壁游出，可加強單核細胞、中性粒細胞的趨化反應(yīng)；刺激PMN及淋巴細胞增殖及釋放細胞因子，增加超氧化陰離子的產(chǎn)生，總之，花生四烯酸在炎癥反應(yīng)中起著重要的作用［2～3］。

花生四烯酸另一個重要的代謝途徑是在脂加氧酶作用下形成炎癥介質(zhì)白三烯等代謝產(chǎn)物，而白三烯作為一種重要的炎癥介質(zhì)參與了如銀屑病、蕁麻疹及特應(yīng)性皮炎等多種皮膚病的發(fā)生發(fā)展［3］。故研究和開發(fā)能干預(yù)花生四烯酸代謝通路的抗炎藥物對臨床治療方面具有重要意義。雷公藤內(nèi)酯醇又稱雷公藤甲素，是從雷公藤（Tripter ygiu m wilfordii Hook.T WH）和昆明山海棠植物中分離出的一種二萜內(nèi)酯類重要的單體化合物。有實驗證明，雷公藤內(nèi)酯醇能抑制LTB4和羥花生四烯酸的生成，提示其抗炎作用還可能與作用于花生四烯酸途徑，抑制5－脂氧合酶活性有關(guān)［4］。

大鼠足跖皮下注射花生四烯酸導(dǎo)致的鼠爪腫脹的炎癥模型對脂加氧酶抑制劑具有相對的選擇性，而針對環(huán)氧合酶的抑制劑對其無抑制作用，國外已經(jīng)廣泛應(yīng)用該模型篩選評估該藥是否具有脂加氧酶的抑制作用［1］。本研究表明，復(fù)方昆明山海棠顆粒高、中、低3個劑量組均能抑制花生四烯酸誘導(dǎo)的鼠爪炎性腫脹。結(jié)合前期的復(fù)方昆明山海棠顆粒對巴豆油及角叉菜膠抗炎實驗結(jié)果，初步表明復(fù)方山海棠顆粒是通過對COX和LOX雙重抑制作用來實現(xiàn)其抗炎作用，其作用機制值有待進一步研究。

［1］Pichat P，Angel S.Anti－infla mmat ory properties of mizolastine after oral ad ministration on arachidonic acid－induced cutaneous reaction in t he rat［J］.Arznei mittelf orschung，1998，48（2）：173～178.

［2］Zaitsu M，Haasaki Y，Matsuo M，et al.New induction of leukotriene A4 hydrolase by interleukin－4 and interleukin－13 in hu man poly mor phonuclear leukocytes［J］.Blood，2000，96 （2） ：6012～6019.

［3］肖沙，陳德宇，楊西群 .白三烯及抗白三烯藥物與皮膚病相關(guān)性的研究進展［J］.皮膚病與性病，2010，32（2）：19～22.

［4］孫聯(lián)文，鄭家潤，陳沄，等 .環(huán)孢素A、雷公藤內(nèi)酯醇及紅霉素與5－脂氧合酶產(chǎn)物的關(guān)系［J］.中華皮膚科雜志 .2001，34（2）：110～112.