老姜茶顆粒治療空調(diào)病藥效學(xué)研究

張玲玲 廖慧麗 劉明平 黃海洋 張煒華 陳斯泰 單麗囡 李 耿

1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州 510006；2.廣東省潮州市鳳凰山保健品有限公司，廣東潮州 521000

老姜茶顆粒治療空調(diào)病藥效學(xué)研究

張玲玲1廖慧麗1劉明平1黃海洋1張煒華1陳斯泰2單麗囡1李 耿1

1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東廣州 510006；2.廣東省潮州市鳳凰山保健品有限公司，廣東潮州 521000

目的研究老姜茶顆粒的發(fā)汗、鎮(zhèn)痛、腸推進(jìn)作用，探討其防治空調(diào)病的藥效機(jī)制 。 方法 通過汗液著色實(shí)驗(yàn)觀察藥物對(duì)正常小鼠足跖汗液分泌的影響；通過醋酸扭體實(shí)驗(yàn)觀察給藥后小鼠的扭體潛伏期和15min內(nèi)的扭體次數(shù)；通過小腸炭末推進(jìn)實(shí)驗(yàn)觀察其對(duì)正常小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響。 結(jié)果老姜茶顆粒高劑量可顯著增加小鼠足跖部汗點(diǎn)密度（P<0.05），顯著抑制醋酸所致小鼠扭體次數(shù)（P<0.05），高、中、低各劑量對(duì)小鼠的腸推進(jìn)均有顯著的促進(jìn)作用（P<0.05或P<0.01）。 結(jié)論 老姜茶顆粒具有促進(jìn)汗液分泌和腸運(yùn)動(dòng)、鎮(zhèn)痛的作用，與其防治空調(diào)病的中醫(yī)治則相符。

老姜茶顆粒；發(fā)汗；鎮(zhèn)痛；腸推進(jìn)；空調(diào)病

隨著人們生活水平的提高，空調(diào)病逐漸成為一種現(xiàn)代疾病，常表現(xiàn)出鼻塞、頭昏、打噴嚏、食欲減退等感冒癥狀。中醫(yī)認(rèn)為，夏天暑濕之氣彌漫，在空調(diào)房內(nèi)因冷而汗孔緊閉，體內(nèi)的濕熱不能通過出汗散發(fā)，郁積體內(nèi)，形成“寒冷外束肌表，濕熱內(nèi)蘊(yùn)脾胃之征”。

老姜茶顆粒是廣東潮汕地區(qū)傳統(tǒng)的飲品，它采用鳳凰山地區(qū)特色產(chǎn)品百日姜和老春茶等，尊古法炮制而成。功效散寒發(fā)汗、和胃止嘔，為治療空調(diào)病鼻塞頭昏、嘔吐泄瀉之佳品。本研究試圖從空調(diào)病的中醫(yī)病機(jī)入手，探討其防治空調(diào)病的藥效機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 藥品及試劑

1.1.1 藥品 老姜茶顆粒（規(guī)格每包12 g，由潮州市鳳凰山保健品有限公司提供，生產(chǎn)許可證：QS445106010878，批號(hào)：20120228）；阿司匹林腸溶片（規(guī)格50 mg/片，湖南新匯制藥有限公司，批號(hào)：110805）；西沙比利（規(guī)格5mg/片，浙江京新藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：1108132）；麻黃飲片（購于廣州中醫(yī)藥大學(xué)采芝林藥店，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大教授賴小平鑒定為麻黃科植物草麻黃Ephedrasinica Stapf的干燥草質(zhì)莖）。

1.1.2 試劑 固體碘（天津市大茂化學(xué)試劑廠，批號(hào)：110907）；無水乙醇（天津市百世化學(xué)試劑廠，批號(hào)：110808）；可溶性淀粉（天津市大茂化學(xué)試劑廠，批號(hào)：110914）；水合氯醛（天津市大茂化學(xué)試劑廠，批號(hào)：090228）；冰醋酸（天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號(hào)）；氯化鈉 （天津市福晨化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20090410）。

1.1.3 麻黃水提液制備 取麻黃粗粉12.75 g，置于250mL圓底燒瓶中，精密加入用醋酸調(diào)PH至3.5后的酸水150mL，電熱套加熱回流2次，每次1 h，過濾，合并2次濾液，減壓濃縮至適當(dāng)濃度[1-2]，即得供試品溶液。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)昆明小鼠，體質(zhì)量18～22 g，均雌性。由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK（粵）2008-0020。動(dòng)物飼養(yǎng)于廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察室 （國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥科研實(shí)驗(yàn)室三級(jí)認(rèn)證），喂以標(biāo)準(zhǔn)的顆粒鼠料。

1.3 儀器

OlympusSZX7體視鏡 （廣州明美光電公司）；YLS-6A智能熱板儀（山東醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站）；XJ-613D1秒表（信佳電子有限公司）；SX-7001D電子天平 （順德拓普域電子有限公司）；BSIIOS萬分之一分析天平（香港佳立國際有限公司）；卷尺（3m，光輝，量制豫字 03000036號(hào)）。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 對(duì)小鼠足跖汗液分泌的影響（著色法）取昆明小鼠60只，體重18～22 g，雌性，隨機(jī)分為五組，即空白組、麻黃水提液組、老姜茶顆粒高、中、低劑量組，每組12只。連續(xù)灌胃給藥6 d，每日1次。給藥體積均為10 mL/kg，空白組給予等體積生理鹽水，其它組給藥劑量見表1。末次給藥后將小鼠用水合氯醛麻醉，用橡皮筋仰位固定，暴露雙后肢。到給藥后30min時(shí)用棉簽蘸取無水乙醇輕輕地將足跖部污物及原有汗液拭去，再用干棉簽擦干。然后在足跖部皮膚涂上和田-高垣氏試劑A液，待充分干燥后，再薄薄涂上B液，隨后每隔10 min用體視鏡觀察1次小鼠左側(cè)足跖部深紫色著色點(diǎn) （即汗點(diǎn)）的密集程度并進(jìn)行評(píng)分，共觀察3次，分別為10、20、30 min內(nèi)汗點(diǎn)密集程度（以開始觀察計(jì)時(shí)）。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：無汗點(diǎn)出現(xiàn)0分；出現(xiàn)零星稀疏汗點(diǎn)1分；汗點(diǎn)出現(xiàn)較多且分布較為密集5分；汗點(diǎn)極多而且連成片10分[1-3]。

1.4.2 對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響 取昆明小鼠60只，體質(zhì)量18～22 g，雌性，隨機(jī)分為五組，即空白組、阿司匹林腸溶片組、老姜茶顆粒高、中、低劑量組，每組12只。連續(xù)灌胃給藥6 d，每日1次。給藥體積均為10mL/kg，空白組給予等體積生理鹽水，其他組給藥劑量見表2。末次給藥前禁食12 h，給藥3min后，每只小鼠腹腔注射新鮮配制的0.8%醋酸溶液（按0.1mL/10 g計(jì)算）[4]，記錄小鼠注射醋酸溶液后開始出現(xiàn)扭體的時(shí)間（潛伏期）和15 min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)的次數(shù)（以小鼠出現(xiàn)腹部內(nèi)凹成“S”形、軀干與后肢伸張蠕行等，臀部高起為扭體反應(yīng)）[5-7]。

1.4.3 對(duì)正常小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響[8-11]取昆明小鼠60只，體質(zhì)量18～22 g，雌性，隨機(jī)分為五組，即空白組、西沙必利組、老姜茶顆粒高、中、低劑量組，每組12只。連續(xù)灌胃給藥5 d，每日1次。給藥體積均為20mL/kg，空白組給予等體積生理鹽水，其他組給藥劑量見表4。末次給藥前禁食、禁水12 h，給藥30min后，各鼠灌胃碳末懸濁液0.1mL/10 g，20min后脫頸椎處死，剖開腹腔，迅速取出整個(gè)胃腸道于紙上，輕輕剝離，鋪直后測量幽門至回盲部全長以及幽門至碳末前沿距離，以幽門至碳末前沿的距離占幽門至回盲部全長的百分率為碳末推進(jìn)百分率。根據(jù)下面公式計(jì)算小鼠的推進(jìn)百分率：

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0 for windows統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用單因素方差分析（ANOVA），兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)小鼠足跖汗液分泌的影響

表1結(jié)果顯示，與空白組比較，陽性藥麻黃液水提液在涂完和田-高垣氏試劑后10、20、30 min各時(shí)間點(diǎn)均可顯著增加小鼠足趾部汗點(diǎn)密度（P＜0.01）。提示造模成功，實(shí)驗(yàn)方法可行。與空白組比較，老姜茶顆粒高劑量組在涂完和田-高垣氏試劑后10、20、30 min各時(shí)間點(diǎn)均可顯著增加小鼠足趾部汗點(diǎn)密度（P ＜ 0.05），且在 10、20、30 min內(nèi)汗點(diǎn)密度有遞增趨勢。與空白組比較，中劑量具有增加汗液分泌量的趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 老姜茶顆粒對(duì)小鼠足跖汗液分泌作用的評(píng)分（，分，n=12）

表1 老姜茶顆粒對(duì)小鼠足跖汗液分泌作用的評(píng)分（，分，n=12）

注：與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 給藥劑量（g/kg）10 min內(nèi)汗點(diǎn)密度20min內(nèi)汗點(diǎn)密度30min內(nèi)汗點(diǎn)密度空白組麻黃水提液組老姜茶高組老姜茶中組老姜茶低組-17 48 24 12 0.42±0.51 1.92±1.88**1.67±1.56*1.42±1.73 0.25±0.45 1.17±1.27 4.50±3.18**3.75±2.80**2.33±1.97 0.75±0.45 1.58±1.62 7.17±3.16**5.25±3.33**3.00±2.09 1.50±1.68

2.2 對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響

表2結(jié)果顯示，與空白組比較，陽性藥阿司匹林腸溶片可顯著延長醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的潛伏期 （P＜0.01），并顯著減少小鼠15min內(nèi)的扭體次數(shù)（P＜0.01），提示造模成功，實(shí)驗(yàn)方法可行。在潛伏期影響方面，與空白組比較，老姜茶顆粒各劑量組差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在15min內(nèi)扭體次數(shù)方面，老姜茶顆粒高劑量可顯著抑制小鼠15min內(nèi)的扭體次數(shù)（P＜0.05），中、低劑量組小鼠扭體次數(shù)有一定程度地減少，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 老姜茶顆粒對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響（，n=12）

表2 老姜茶顆粒對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響（，n=12）

注：與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 給藥劑量（g/kg） 潛伏期（s） 15min內(nèi)扭體次數(shù)（次）空白組阿司匹林腸溶片組老姜茶顆粒高劑量組老姜茶顆粒中劑量組老姜茶顆粒低劑量組-0.3 48.0 24.0 12.0 272.1±59.6 399.9±85.3**272.1±60.2 269.9±40.8 252.2±26.5 32.8±12.8 20.2±9.4**24.9±9.3*27.3±8.8 30.6±5.1

2.3 對(duì)正常小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響

表3結(jié)果顯示，與空白組比較，西沙必利可顯著提高小鼠小腸推進(jìn)率（P＜0.05），提示造模成功，實(shí)驗(yàn)方法可行。與空白組比較，老姜茶高、中、低各劑量均可顯著增加小鼠小腸推進(jìn)率（P＜0.05或P＜0.01）。

表3 老姜茶顆粒對(duì)正常小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響（，n=12）

表3 老姜茶顆粒對(duì)正常小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響（，n=12）

注：與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 給藥劑量（g/kg） 小腸推進(jìn)率（%）空白組西沙必利組老姜茶顆粒高劑量組老姜茶顆粒中劑量組老姜茶顆粒低劑量組-0.05 48.00 24.00 12.00 49.61±9.13 59.68±7.84*63.42±12.32*66.50±6.94**65.16±8.65**

3 討論

空調(diào)病以中醫(yī)病機(jī)學(xué)的角度來看是外邪入侵肺衛(wèi)的表證，如果治療不及時(shí)、不徹底，外邪可循經(jīng)絡(luò)內(nèi)傳入里，犯入臟腑，則病情加重。一般治療原則是辛散解表，使邪氣從表而散。還可根據(jù)患者的癥狀，選擇適合的方劑配伍。中醫(yī)認(rèn)為空調(diào)病是“寒冷外束肌表，濕熱內(nèi)蘊(yùn)脾胃之征”。老姜茶顆粒以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，采用“疏散外寒，清化內(nèi)濕”之法，以辛溫解表的生姜為君，輔以清熱解毒之金銀花、菊花，以及化痰止咳的羅漢果，具有散寒發(fā)汗、和胃止嘔的功效，為治療空調(diào)病鼻塞頭昏、嘔吐泄瀉之佳品。

本實(shí)驗(yàn)以發(fā)汗、鎮(zhèn)痛、腸推進(jìn)為指標(biāo)，評(píng)價(jià)老姜茶顆粒防治空調(diào)病藥效。結(jié)果顯示，老姜茶顆粒高劑量可顯著增加小鼠足跖部汗腺汗液分泌量和抑制醋酸所致小鼠15 min內(nèi)扭體次數(shù)，高、中、低各劑量均可促進(jìn)小鼠小腸的運(yùn)動(dòng)。本實(shí)驗(yàn)為空調(diào)病的藥效評(píng)價(jià)提供了參考，同時(shí)為老姜茶顆粒防治空調(diào)病提供了藥效學(xué)依據(jù)。

[1]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].2版北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：366.

[2]羅佳波，劉國清，莫志賢，等.麻黃湯對(duì)小鼠的發(fā)汗作用[J].中醫(yī)藥學(xué)刊，2005，23（11）：1945-1946.

[3]王艷宏，王秋紅，夏永剛，等.麻黃化學(xué)拆分組分的性味藥理學(xué)評(píng)價(jià)——麻黃化學(xué)拆分組分“辛溫”發(fā)汗、利水作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中醫(yī)藥科技，2011，18（6）：489-491.

[4]劉和莉，李月玲，薛永志.不同溫度和醋酸濃度對(duì)小鼠扭體疼痛模型的影響[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，22（2）：137-138.

[5]焦曉蘭，朱文龍，殷志琦，等.豬牙皂總皂苷的鎮(zhèn)痛抗炎作用和免疫抑制活性[J].中藥藥理與臨床，2011，27（3）：59-61.

[6]曾婉君，余應(yīng)嘉，王葉茗，等.三白草抗炎鎮(zhèn)痛作用研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2012，9（11）：33-34.

[7]梁生林，李慶耀，鐘衛(wèi)華，等.地錦草提取物對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中成藥，2011，33（5）：880-881.

[8]陳彥清，曾雪斌，葉敏馥.潤腸通便合劑對(duì)小鼠腸推進(jìn)影響的研究[J].中國藥房，2007，18（36）：2820-2821.

[9]涂可斌，常明向，劉浩.瘟必清口服液對(duì)小鼠腸推進(jìn)功能的影響[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥房，2012，8（5）：31-32.

[10]瞿燕，付超美，胡慧玲，等.川木香及其煨制品對(duì)小鼠胃排空及腸推進(jìn)的影響[J].華西藥學(xué)雜志，2010，25（3）：269-271.

[11]佳菁，孫遠(yuǎn)嶺，周緯，等.運(yùn)脾方對(duì)小鼠腸推進(jìn)作用的研究[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2012，21（24）：2648-2649.

Pharmacodynam ic study on sudation and analgesia effects of Laojiangcha Granules in treatment of air-sickness

ZHANG Lingling1 LIAO Huili1 LIU Mingping1 HUANG Haiyang1 ZHANGWeihua1 CHEN Sitai2 SHAN Li′nan1 LIGeng1
1.Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangdong Province,Guangzhou 510006,China;2.Chaozhou Phoenix Mountain Health Care Product CO.,LTD,Guangdong Province,Chaozhou 521000,China

Objective To study the the effectof promoting sudation,analgesia and intestine propulsion for Laojiangcha Granules,and to discuss the pharmacologicalmechanisms of air-sickness prevention.MethodsThe colouration was used to observe the secretion of sweaton normalmice and verify the sudation;themethod ofwrithing by acetic acid wasmade to study the analgesic effect,through observingwrithing latency and the times ofwrithing response in 15minutes;charcoal driving in small intestinewasused to observe the role on the small intestinalmotion promoting action in normalmice.ResultsThe high dose of Laojiangcha Granules significantly increased sweat point density on the heel and sole ofmice (P<0.05);and decreased the times of twisting body caused by acetic acid inmice(P<0.05);the high,medium and low dose groups all could markedly promote intestinalmotion (P<0.05,P<0.01).ConclusionLaojiangcha Granules have a role of diaphoresis,promoting intestinalmotion and analgesic,according to the therapeutic principlesof TCM in air-sickness prevention.

Laojiangcha Granules;Promoting sudation;Analgesic action;Intestine propulsion;Air-sickness

R161

A

1673-7210（2012）12（a）-0022-03

廣東省產(chǎn)學(xué)研項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：20110908）；廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：2009B020419004）。

張玲玲（1985-），女，廣州中醫(yī)藥大學(xué)2010級(jí)在讀碩士研究生；研究方向：中藥藥理。

李耿（1983-），男，博士研究生，講師；研究方向：中藥新藥開發(fā)。

2012-09-26 本文編輯：衛(wèi) 軻）