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    那他霉素穩(wěn)定性研究

    2012-11-09 06:58:24許艷芬
    關(guān)鍵詞:水份本品霉素

    許艷芬

    (通山縣人民醫(yī)院,湖北 通山437600)

    那他霉素是一種從natalensis鏈霉菌中提取的多烯類抗生素,其作用機(jī)制與兩性霉素B相同,屬廣譜抗真菌抗生素。在體外那他霉素具有抗多種酵母菌和絲狀真菌,包括念珠菌、曲霉菌、頭孢子菌、鐮刀菌和青霉菌的作用。早期作為食品添加劑,是我國批準(zhǔn)使用的食品添加劑之一。由于臨床上普遍缺乏廣譜、高效、安全的眼用抗真菌藥物,國外將該產(chǎn)品制成5%混懸液型滴眼劑,商品名為那他真,用于治療眼部真菌感染。該產(chǎn)品眼部能耐受且無毒性,是治療淺層真菌性角膜炎的首選用藥。作為治療真菌性眼病的一線藥物,本品也是唯一被美國藥典收載的抗真菌性眼科用藥。本文對該品種的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究,現(xiàn)報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 儀器及試劑

    LC-10AT液相色譜儀,SPD-10A紫外檢測器為(日本島津公司生產(chǎn));TL9900色譜工作站(北京泰立化電子技術(shù)有限公司);乙腈(色譜純,F(xiàn)isher公司,批號:081295)、四氫呋喃(色譜純,天津市津科精細(xì)化工研究所,批號:20080122)、甲醇(色譜純,F(xiàn)isher公司,批號:080112)、氯化銨(分析純,天津市化學(xué)試劑三廠,批號:20080629)、乙酸銨(分析純,北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司,批號:20080407)。

    供試品為黃石世星藥業(yè)有限責(zé)任公司提供(批號:100101,100102,100103),那他霉素對照品為USP對照品(批號:JOD180,含量:0.917mg/mg)。

    1.2 方法

    1.2.1 檢測方法

    ①性狀:肉眼直接觀察;②pH值:pH計直接測定;③水份:卡氏法;④有關(guān)物質(zhì):HPLC自身對照法0;⑤含量測定:HPLC外標(biāo)法10。

    1.2.2 色譜條件

    流動相:緩沖液(取乙酸銨3.0g和氯化銨1.0g溶于760ml水中)-乙腈-四氫呋喃(760∶240∶5);色譜柱:5μ 15cm ×4.6mm C18DIKMA Diamonsil;檢測波長:303nm;流速:1.5ml/min;進(jìn)樣體積:20μl;柱溫:室溫。

    1.2.3 溶液的配制

    ①供試品:精密稱取本品約100mg,置100ml棕色量瓶中,加四氫呋喃5ml,充分振搖后再加甲醇60ml,再振搖使溶解并加水稀釋至刻度,搖勻,即得。②對照溶液的配制:精密量取上述供試品溶液1ml置100ml棕色量瓶中,加甲醇60ml,再加水稀釋至刻度,搖勻,即得。

    1.2.4 測定方法

    在上述液相色譜條件下,取對照溶液20μl注入液相色譜儀,調(diào)節(jié)檢測靈敏度,使那他霉素色譜峰的峰高為滿量程的20% ~25%;再取供試品溶液20μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖至那他霉素保留時間的約3倍。供試品中如含雜質(zhì)峰(扣除溶劑峰),用雜質(zhì)峰的面積總和與對照溶液那他霉素主峰的面積做比較,計算雜質(zhì)的量。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 高溫試驗

    60℃試驗:將批號為100101的本品,暴露放置于60℃的干燥箱中,于放置前和第5、10d取樣,進(jìn)行性狀、pH值、水份、含量和有關(guān)物質(zhì)的考察。結(jié)果見表1。

    表1 那他霉素的高溫(60℃)試驗結(jié)果

    結(jié)果表明,本品在60℃條件下放置10d,性狀發(fā)生明顯變化,pH值、水份、含量和有關(guān)物質(zhì)基本不變,表明本品高溫60℃不穩(wěn)定。40℃試驗:將批號為100101的本品,暴露放置于40℃的干燥箱中,于放置前和第5、10d取樣,進(jìn)行性狀、pH值、水份、含量和有關(guān)物質(zhì)的考查。結(jié)果見表2。

    表2 那他霉素的高溫(40℃)試驗結(jié)果

    結(jié)果表明,本品在40℃條件下放置10d,性狀、pH值、水份、含量和有關(guān)物質(zhì)基本不變,表明本品在40℃下比較穩(wěn)定。

    2.2 濕度試驗

    將批號為100101的本品,暴露放于盛有KNO3飽和溶液(相對濕度92.5%)的干燥器中,于室溫下放置,于放置第5、10d取樣,進(jìn)行性狀、pH值、水份、含量和有關(guān)物質(zhì)考查,同時考查吸濕增重情況。結(jié)果見表3。

    表3 那他霉素的高濕試驗結(jié)果(RH92.5%)

    結(jié)果表明,本品在 RH92.5%條件下放置10d,性狀、pH值、水份、含量和有關(guān)物質(zhì)均未發(fā)生明顯變化,10d后增重只有0.02%,說明本品對高濕較穩(wěn)定。

    2.3 強(qiáng)光照射試驗

    將批號為100101的本品,于照度4500lx下放置,于放置前和第5、10d取樣,進(jìn)行性狀、pH值、水份、含量和有關(guān)物質(zhì)考查。結(jié)果見表4。

    表4 那他霉素的強(qiáng)光照射試驗結(jié)果

    結(jié)果表明,本品在強(qiáng)光下照射10d,表層顏色變黃,水份變小,pH值、含量和有關(guān)物質(zhì)未發(fā)生明顯變化,說明本品對光不穩(wěn)定。

    2.4 加速試驗及其結(jié)果

    將本品三批100101,100102,100103用藥用塑料袋分裝,外面用圓紙桶密閉后,放于盛有NaCl飽和溶液(RH 75%)的干燥器中,將此干燥器放于40℃恒溫培養(yǎng)箱中,于放置前和1、2、3、6月末取樣,進(jìn)行性狀、pH值、水份、含量和有關(guān)物質(zhì)考查。試驗結(jié)果見表5、表6和表7。

    表5 100101批那他霉素加速試驗結(jié)果

    表6 100102批那他霉素加速試驗結(jié)果

    表7 100103批那他霉素加速試驗結(jié)果

    試驗結(jié)果表明,本品經(jīng)加速試驗6個月,三批供試品各項指標(biāo)均無明顯變化,比較穩(wěn)定。

    2.5 長期留樣觀察試驗結(jié)果

    將三 批 本 品(批 號 為 100101,100102,100103)用藥用塑料袋分裝,外面用圓紙桶密閉后,放于盛有NaNO3飽和溶液(RH 62%)的干燥器中,將此干燥器放于25℃恒溫培養(yǎng)箱中,于放置前和第3、6、9、12、18 月取樣,進(jìn)行性狀、pH 值、水份、含量和有關(guān)物質(zhì)檢查。結(jié)果見表8、9和表10。

    表8 100101批那他霉素長期試驗結(jié)果

    表9 100102批那他霉素長期試驗結(jié)果

    表10 100103批那他霉素長期試驗結(jié)果

    結(jié)果表明,本品長期留樣放置18個月,各項指標(biāo)基本不變。

    2.6 破壞性試驗

    溶劑的處理:分別量取溶劑(四氫呋喃∶甲醇∶水 =5∶60∶35)5ml,分別置于 3 個試管中,在 3個試管中依次加入3滴6mol/L的鹽酸溶液、3滴飽和氫氧化鈉溶液、3滴30%的雙氧水,搖勻,放置過夜后,進(jìn)樣分析。

    供試品溶液的處理:分別取本品100101批供試品溶液5ml置于3個試管中,與溶劑破壞性試驗同法處理,進(jìn)樣分析。另將本品 100101批在105℃高溫放置4h后和照度4500Lx下放置10d后,各取適量照供試品溶液配制方法配制,進(jìn)樣分析。結(jié)果見表11。

    表11 破壞性試驗結(jié)果

    試驗結(jié)果表明,本品經(jīng)酸、堿過夜破壞后,主峰全部降解,表明本品對酸堿均不穩(wěn)定。后取供試品溶液5ml 2份分別加入3滴6mol/L的鹽酸溶液,3滴飽和氫氧化鈉溶液,放置1h后進(jìn)樣。酸破壞后,相鄰色譜峰與主峰的分離度為2.3和4.0,堿破壞后,相鄰色譜峰與主峰的分離度為2.7和13.0,雜質(zhì)峰不干擾本品有關(guān)物質(zhì)測定;經(jīng)氧破壞后,未產(chǎn)生新的雜質(zhì)峰,表明本品對氧較穩(wěn)定,相鄰色譜峰與主峰的分離度為1.5和3.6,均與主峰良好分離;經(jīng)高溫破壞后,顏色變?yōu)樯铧S色,但未產(chǎn)生新的雜質(zhì)峰,相鄰色譜峰與主峰的分離度為1.7和3.8,均與主峰良好分離;經(jīng)光照10d破壞后,表層顏色變黃,但未產(chǎn)生新的雜質(zhì)峰,相鄰色譜峰與主峰的分離度為1.7和4.0,均與主峰良好分離。

    3 小結(jié)

    ①影響因素試驗表明,本品在高溫60℃放置10d顏色已變深黃色,pH值、水份、有關(guān)物質(zhì)和含量基本不變,本品對高溫60℃不穩(wěn)定;40℃和RH92.5%放置10d,性狀、pH值、水份、有關(guān)物質(zhì)和含量基本不變;光照下10d后表層顏色變深,水份減小,pH值、有關(guān)物質(zhì)和含量基本不變,本品對光不穩(wěn)定。本品的貯藏條件為密閉、遮光保存。②本品3批加速試驗表明,本品在40℃、RH 75%的條件下加速6個月,各項考察指標(biāo)基本不變,比較穩(wěn)定。③本品3批長期留樣18個月的試驗表明,各項考察指標(biāo)基本不變,比較穩(wěn)定。

    綜上所述,本品對高溫、光照、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿不穩(wěn)定,宜密閉、遮光保存。

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