紫蘇水提取物對小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用的實(shí)驗(yàn)研究

金建明，王正山

（1. 泰州職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，江蘇泰州225300；

2. 揚(yáng)州大學(xué)醫(yī)學(xué)院，江蘇揚(yáng)州225001）

紫蘇屬于唇形科紫蘇屬[Perilla（Linn） ]植物紫蘇[P.frutescens(L.)Britt.var.arguta(Benth.)Hand.-Mazz.]，本品具有解表散寒、行氣和胃、理氣寬中、降氣消痰、平喘等功效，可治風(fēng)寒感冒，咳嗽，頭痛等癥。臨床使用的藿香正氣口服液、通宣理肺丸、兒童清肺丸等十余種中藥方劑中均含有紫蘇成分[1]。目前已見的文獻(xiàn)報(bào)道主要集中在紫蘇有效成分抗氧化、抗高血脂等方面[2,3]，有關(guān)紫蘇鎮(zhèn)靜催眠方面的實(shí)驗(yàn)研究，國內(nèi)文獻(xiàn)鮮有報(bào)道，本文采用相關(guān)藥理學(xué)模型，對紫蘇水提取物鎮(zhèn)靜催眠的作用進(jìn)行了初步探討。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物 昆明種小鼠，體重18±3g，雌雄各半，清潔級，購自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司（合格證號(hào)：SCXK（滬） 2010-0001），室溫飼養(yǎng)。

1.2 試藥 紫蘇藥材（購自益豐大藥房，批號(hào)：120221），經(jīng)揚(yáng)州大學(xué)醫(yī)學(xué)院生藥學(xué)教研室鑒定為正品。紫蘇水提取物的制備方法：500g紫蘇加水煎煮2次，每次5000ml，過濾后濃縮，制成相當(dāng)于原生藥量0.2g/ml的藥液，備用；地西泮（安定，安徽豐原藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：120311）；戊巴比妥鈉（上海化學(xué)試劑供應(yīng)站進(jìn)口分裝，批號(hào)：090124）；戊四氮，（Bioszume公司，批號(hào)：20110921）。

1.3 儀器 ZZ-6小鼠自主活動(dòng)測定儀（成都泰盟科技有限公司）；FA2004型上皿電子天平（上海天平儀器廠）。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)分組 按照實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，將?shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為空白對照組（給予等體積生理鹽水）、紫蘇低劑量組3g·kg-1、中劑量組6g·kg-1、高劑量組12g·kg-1（劑量參照文獻(xiàn)[2]），安定組0.004g·kg-1（陽性對照組），灌胃給藥。各組小鼠給藥前10h禁食不禁水。

2.2 紫蘇水提取物對小鼠自主活動(dòng)的影響 取小鼠60只，雌雄各半，按表1隨機(jī)分組，灌胃給藥，實(shí)驗(yàn)組給紫蘇水提取物40min后，用ZZ-6小鼠自主活動(dòng)測定儀記錄5min內(nèi)運(yùn)動(dòng)次數(shù)，用SPSS軟件對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)，見表1。

表1 紫蘇水提取物對小鼠自主活動(dòng)的影響（±S，n＝12）

表1 紫蘇水提取物對小鼠自主活動(dòng)的影響（±S，n＝12）

注：與對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 劑量/g·kg-1 給藥前自發(fā)活動(dòng)次數(shù)/次 給藥后自發(fā)活動(dòng)次數(shù)/次對照組 - 89.5±16.4 90.1±16.1安定組 0.004 90.7±18.0 18.8±10.5**紫蘇低劑量組 3 91.0±16.4 75.1±13.6紫蘇中劑量組 6 88.5±14.7 48.9±10.2*紫蘇高劑量組 12 88.8±17.2 26.0±12.3**

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比紫蘇水提取物中、高劑量組均可減少小鼠的自由活動(dòng)次數(shù)，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)各組與安定組相比均沒有顯著性差異。

2.2 紫蘇水提取物對閾下催眠劑量戊巴比妥鈉小鼠的影響 取小鼠70只，雌雄各半，禁食不禁水10h，按表2隨機(jī)分，各組按劑量灌胃給藥。對照組給予等體積的蒸餾水，實(shí)驗(yàn)組給紫蘇水提取物40min后，各組小鼠按20mg·kg-1戊巴比妥鈉加水調(diào)制灌胃，記錄給予戊巴比妥鈉后40min內(nèi)各組小鼠入睡個(gè)數(shù)，并計(jì)算入睡率（翻正反射消失1min以上者），對統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)分析，結(jié)果見表2。

表2 紫蘇水提取物對閾下催眠劑量戊巴比妥鈉小鼠的影響（n＝14）

實(shí)驗(yàn)表明，與對照組相比紫蘇水提取物各組均可增加閾下劑量戊巴比妥鈉所致的睡眠小鼠的數(shù)量，其中紫蘇水提取物高劑量組具有特別顯著性差異（P＜0.01），結(jié)果提示，紫蘇水提取物對戊巴比妥催眠有一定協(xié)同作用。

2.3 紫蘇水提取物對催眠閾劑量戊巴比妥鈉小鼠睡眠時(shí)間的影響 取小鼠60只，雌雄各半，按表3隨機(jī)分組，對照組給予等體積的蒸餾水，實(shí)驗(yàn)組給紫蘇水提取物40min后，各組小鼠按40mg·kg-1戊巴比妥鈉加水調(diào)制灌胃。記錄注射后1.5h內(nèi)翻正反射消失的小鼠入睡潛伏期（從給藥開始到翻正反射消失）長短和睡眠持續(xù)時(shí)間（從翻正反射消失到其恢復(fù)正?；顒?dòng)的時(shí)間）。

表3 紫蘇水提取物對催眠閾劑量戊巴比妥鈉小鼠睡眠時(shí)間的影響±S，n＝12）

表3 紫蘇水提取物對催眠閾劑量戊巴比妥鈉小鼠睡眠時(shí)間的影響±S，n＝12）

注：與對照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01

組別 劑量/g·kg-1 睡眠潛伏期/秒 睡眠持續(xù)時(shí)間/秒對照組 - 228±61 1077±156安定組 0.004 75±26 3638±491**紫蘇低劑量組 3 169±51 1733±183紫蘇中劑量組 6 121±48* 2427±462*紫蘇高劑量組 12 88±36** 3483±393**

實(shí)驗(yàn)表明，紫蘇水提取物能不同程度縮短戊巴比妥鈉催眠閾劑量引起的小鼠入睡潛伏期，其中紫蘇水提取物高劑量組具有顯著性差異（P＜0.01）。同時(shí)紫蘇水提取物還能不同程度延長小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間。上述結(jié)果提示，紫蘇水提取物有協(xié)同戊巴比妥鈉促進(jìn)動(dòng)物睡眠的作用。

2.4 紫蘇水提取物對戊四氮致驚厥小鼠的影響[4]取小鼠60只，雌雄各半，按照表4隨機(jī)分組，給紫蘇水提取物40min后，各組腹腔注射戊四氮75mg·kg-1，以小鼠跌倒呈現(xiàn)陣攣性驚厥為統(tǒng)計(jì)指標(biāo)，統(tǒng)計(jì)各組小鼠驚厥發(fā)作的只數(shù)和驚厥發(fā)生小鼠潛伏期時(shí)間（指給藥后至出現(xiàn)跌倒?fàn)顟B(tài)的時(shí)間）。

表4 紫蘇水提取物對戊四氮致驚厥小鼠的影響（n＝12）

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，安定組和紫蘇水提取物高劑量組能減少因戊四氮致驚厥的小鼠只數(shù)，且陽性藥物組和紫蘇水提取物高劑量組對戊四氮致驚厥小鼠的潛伏期有延長作用，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），但紫蘇水提取物各劑量組與對照組比較無差異。

3 討論

失眠是現(xiàn)代人常見病癥之一，且其發(fā)生率有逐年上升的趨勢，中藥因其毒副作用小以及在催眠鎮(zhèn)靜上顯現(xiàn)出的良好效果，越來越受到醫(yī)藥學(xué)界廣泛重視。本實(shí)驗(yàn)在參考文獻(xiàn)[5]的基礎(chǔ)上，采用經(jīng)典的鎮(zhèn)靜催眠模型，初步考察不同劑量的紫蘇水提取物對小鼠鎮(zhèn)靜催眠的作用，結(jié)果表明紫蘇水提取物可以降低正常小鼠的自發(fā)活動(dòng)、對戊巴比妥鈉促進(jìn)動(dòng)物睡眠有一定的協(xié)同促進(jìn)作用、紫蘇水提取物高劑量組（12g·kg-）1對戊四氮致小鼠驚厥潛伏期有一定的延長作用。

本研究按照臨床用藥習(xí)慣考察了紫蘇水提取物對小鼠鎮(zhèn)靜催眠的影響，結(jié)果顯示紫蘇具有較好的鎮(zhèn)靜催眠效果，但紫蘇的鎮(zhèn)靜催眠作用是否與報(bào)道[6]中的體內(nèi)各種遞質(zhì)（如γ-氨基丁酸A、5-羥色胺等）有關(guān)，紫蘇其他溶劑提取物、不同提取部位是否會(huì)對鎮(zhèn)靜催眠產(chǎn)生影響，需要今后進(jìn)一步研究和證實(shí)。

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[2]譚健民,陳眷華,徐在品,等.紫蘇葉提取物對高脂血癥家兔血脂及脂質(zhì)過氧化的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(18):7701-7702.

[3]何佳奇,李效賢,熊耀康.紫蘇總黃酮提取物對四氧嘧啶致糖尿病小鼠糖脂代謝及抗氧化水平的影響[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2011,29(7):1667-1669.

[4]王怡薇,朱傳靜,王彥禮,等.不同色澤紫石英鎮(zhèn)靜催眠抗驚厥作用的研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2011,17(15):199-201.

[5]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993．

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