原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)患者絨毛共刺激分子B7-1和B7-2的表達(dá)水平變化

榮博會 劉影 張國華 方芳 張文真

近年來，國內(nèi)外對原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)病因的研究取得了很大進(jìn)展，其病因十分復(fù)雜，涉及遺傳、內(nèi)分泌、免疫學(xué)機(jī)制、解剖和感染等諸多因素，已有研究證明80%的原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)與免疫學(xué)機(jī)制有關(guān)［1，2］，其中淋巴細(xì)胞亞群及其相關(guān)細(xì)胞因子與原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)關(guān)系更是目前研究的新熱點。研究發(fā)現(xiàn)輔助性T淋巴細(xì)胞1/輔助性T淋巴細(xì)胞2(Th1/Th2)比值失衡與原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)有密切關(guān)系［3］。但導(dǎo)致其失衡的原因和機(jī)制尚不清楚，B7-1，B7-2是B7家族中重要的共刺激分子，有研究表明，B7家族介導(dǎo)的免疫應(yīng)答反應(yīng)參與T淋巴細(xì)胞的活化［4］。有關(guān)B7-1，B7-2在原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)患者絨毛中表達(dá)的研究尚未見報道。本文運(yùn)用流式細(xì)胞技術(shù)，首次檢測原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)患者絨毛B7-1、B7-2表達(dá)水平變化。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選取2011年1至12月我院就診的原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)患者20例(流產(chǎn)組)，年齡22～45歲，平均年齡31．4歲。正常早孕孕婦15例(正常妊娠組)，年齡21～36歲，平均年齡29．1歲。

1．2 儀器與試劑 Epics-XLII型流式細(xì)胞儀，鼠抗人FITC-B7-1、PE-B7-2及陰性對照均購自美國Becton Dickinson公司。

1．3 檢測方法 將2組流產(chǎn)術(shù)后絨毛組織機(jī)械碾碎，用貼壁法制備單個巨噬細(xì)胞懸液。取單細(xì)胞懸液1×106個/ml，加入鼠抗人FITC-B7-1、PE-B7-2單克隆抗體及FITC-IgG及PE-IgG各0．1 ml，洗滌、離心，設(shè)本底對照和陰性對照。采用流式細(xì)胞儀計數(shù)10 000個巨噬細(xì)胞中B7-1和B7-2陽性細(xì)胞百分比。

1．4統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SPSS 17．0統(tǒng)計軟件，計量資料以±s表示，采用t檢驗，P＜0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

流產(chǎn)組絨毛組織中B7-1的表達(dá)高于正常妊娠組(P＜0．05);流產(chǎn)組絨毛組織中B7-2的表達(dá)百分比低于正常妊娠組(P ＜0．05)。見表1。

3 討論

胚胎是一半同種移植物，妊娠成功有賴于胎兒-母體間免疫平衡，表現(xiàn)為妊娠免疫耐受。正常妊娠是一種“Th2現(xiàn)象”［5，6］，即趨向于 Th2 型細(xì)胞因子參與的免疫耐受，而偏離Th1型細(xì)胞因子參與的免疫損傷。原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)的發(fā)生是Th1型細(xì)胞因子參與的免疫損傷，但導(dǎo)致其Th1現(xiàn)象的原因和機(jī)制尚不清楚。

表12組絨毛B7-1、B7-2表達(dá)水平比較%，±s

表12組絨毛B7-1、B7-2表達(dá)水平比較%，±s

注:與正常妊娠組比較，*P ＜0．05

B7-1 B7-2流產(chǎn)組(n=20) 11．8 ±1．4* 36．2 ±1．9組別*正常妊娠組(n=15) 10．2 ±1．1 38．9 ±4．4 P值0．001 0．017

B7-1，B7-2是B7家族是重要的共刺激分子，它們參與Th細(xì)胞的調(diào)節(jié)。本研究發(fā)現(xiàn)，原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)患者絨毛組織中APC表面B7-2的表達(dá)低于正常妊娠女性，B7-1的表達(dá)高于正常妊娠女性，上述變化可能導(dǎo)致了Th細(xì)胞表達(dá)白細(xì)胞介素(IL)-2及IL-2受體，表現(xiàn)為免疫排斥，損害妊娠，使機(jī)體發(fā)生了原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)。

綜上所述，我們認(rèn)為原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)孕婦存在B7-1，B7-2異常，推測B7-1，B7-2異?？赡艽龠M(jìn)了原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)發(fā)生。我們期望B7-1，B7-2異常的現(xiàn)象，能為原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)治療提供新的思路。

1 Beydoun H，Saftlas AF．Association of human leucocyte antigensharing with recurrent spontaneous abortions．Tissue Antigens，2005，65:123-135．

2 Ksouri H，Zitouni M，Achour W，et al．Recurrent pregnancy loss related to immune disorders．Ann Med Interne(Paris)，2003，154:233-247．

3 邱麗華，林其德，洪燕，等．原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)患者主動免疫前后T輔助細(xì)胞1、2型細(xì)胞因子變化的研究．中華婦產(chǎn)科雜志，2001，36:408-410．

4 Alegre ML，F(xiàn)allarino F．Mechanisms of CTLA-4-Ig in tolerance induction．Curr Pharm Des，2006，12:149-160．

5 閻華，王愛華，王華芝，等．腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-10在反復(fù)自然流產(chǎn)患者母胎界面及絨毛組織中淋巴細(xì)胞的表達(dá)．生殖醫(yī)學(xué)雜志，2003，12:232．

6 Makhseed M，Raghupathy R，Azizieh F，et al．Th1 and Th2 cytokine profiles in recurrent aborters with successful pregnancy and with subsequent abortions．Hum Reprod，2001，16:2219．