正交設(shè)計(jì)法研究法半夏的炮制工藝

鄧治國(guó)

（攀枝花鋼鐵有限責(zé)任公司職工總醫(yī)院，四川 攀枝花 617023）

半夏為天南星科植物半夏的干燥塊莖，生品具有強(qiáng)烈刺激性，一般配方中用半夏時(shí)，除特別注明用生者外，都必須給予炮制品。半夏的炮制是中藥最早記載的炮制品種之一，有工藝記載的始于漢末。根據(jù)炮制的輔料不同，有清半夏、姜半夏、法半夏等多種炮制品。其中法半夏長(zhǎng)于驅(qū)寒痰，為中醫(yī)臨床常用中藥。法半夏炮制的目的是降低毒性，但其炮制工藝復(fù)雜，炮制方法各地差異較大。2010版藥典中的炮制方法沒(méi)有明確炮制用生石灰加水量、甘草煎液體積、浸泡時(shí)間和炮制溫度，僅憑口嘗控制炮制程度，缺乏客觀、量化的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

本文選擇生石灰加水量、甘草水煎液濃縮體積、浸泡時(shí)間、炮制溫度等4個(gè)主要影響因素，用正交設(shè)計(jì)法，通過(guò)綜合評(píng)分，從不同的指標(biāo)對(duì)法半夏的炮制工藝進(jìn)行研究，取得了較滿意的結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 試驗(yàn)材料

1.1 供試藥材及輔料

半夏：安徽省亳州市藥材總公司提供，經(jīng)鑒定為天南星科植物三葉半夏Pinellia ternate（Thunb.）Breit的干燥塊莖；甘草：四川金利醫(yī)藥貿(mào)易有限公司提供，經(jīng)鑒定為雙子葉植物豆科Leguminosae甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的根及根莖；白礬：由本院中藥房提供。三者質(zhì)量均符合《中國(guó)藥典》2010年版規(guī)定。

1.2 儀器與試劑

CS-930薄層層析掃描儀（日本島津）；751G可見紫外分光光度計(jì)（上海分析儀器廠）；KQ5200型超聲清洗器（KH，200W，昆明市超聲有限公司）；電子分析天平（日本島津）；PHS-2A型數(shù)字式酸度計(jì)（江蘇揚(yáng)中無(wú)線電儀器二廠）。所有試劑均為分析純。

2 方法及結(jié)果

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇石灰加水量、甘草濃縮體積、浸泡時(shí)間、炮制溫度等4個(gè)影響因素，采用L9（3）4因素水平表（見表1），以紫外分光光度法和高效液相色譜法測(cè)定各炮制品中的總生物堿和甘草酸單銨鹽的含量為指標(biāo)，并采用外觀顏色、麻舌感程度、脆硬度等綜合評(píng)分的方法（綜合評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表2），對(duì)法半夏最佳工藝進(jìn)行優(yōu)選研究，取得了較滿意的結(jié)果。

取凈選大小均勻的半夏分成9份，100g／份，分別用水（水量均為高出液面5cm）浸泡至內(nèi)無(wú)干心，取出，揮去表面水分。選用L9（3）4因素水平表進(jìn)行試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表3。

表1 正交設(shè)計(jì)法半夏工藝的因素水平

表2 綜合評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

表3 方案設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

結(jié)果表明，按方案A1B3C3D3的工藝條件綜合得分最高，表明該工藝條件穩(wěn)定可行。

3 討論

歷代認(rèn)為半夏有毒，內(nèi)服時(shí)對(duì)黏膜有刺激性，古時(shí)有“戟人咽”、“令人嘔”的記載，故一般須經(jīng)炮制后入藥。法半夏、清半夏、姜半夏為藥典收錄的三種炮制品?！吨袊?guó)藥典》2010年版規(guī)定法半夏的炮制方法為：取半夏，大小分開，用水浸泡至內(nèi)無(wú)干心，取出；另取甘草適量，加水煎煮二次，合并煎液，倒入用適量水制成的石灰液中，攪勻，加入上述已浸透的半夏，浸泡，每日攪拌1～2次，并保持浸液pH值12以上，至剖面黃色均勻，口嘗微有麻舌感時(shí)，取出，洗凈，陰干或烘干，即得。鄒菊英等［1］采用HPLC圖譜比較研究，得出半夏經(jīng)炮制后化學(xué)成分存在質(zhì)和量的變化。楊錫等［2］在采用外觀、斷面、麻舌感等傳統(tǒng)指標(biāo)評(píng)價(jià)法半夏炮制工藝的同時(shí)，還選用了甘草酸含量進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)對(duì)甘草酸含量的影響程度為：浸泡時(shí)間＞煎煮液濃縮體積＞甘草煎煮次數(shù)，認(rèn)為法半夏的炮制以每100g半夏用1%甘草（用水煎煮2次，合并煎液濃縮到150mL），石灰10g，浸泡6天為宜。胡昌江［3］則選擇浸泡溫度、浸泡時(shí)間、加水量、壓力4個(gè)因素進(jìn)行試驗(yàn)比較，確定較佳工藝為溫度50℃，浸泡時(shí)間48h，加水量4倍，壓力1.6×105Pa。本文結(jié)果為，每100g半夏生石灰加水量為30mL，甘草濃縮體積為200mL，浸泡時(shí)間為6天，溫度在25℃時(shí)炮制的綜合得分為最高。

半夏的化學(xué)成分復(fù)雜，有多種藥理活性。目前對(duì)半夏的炮制研究較多，炮制工藝也逐步向規(guī)范化方向發(fā)展，但在炮制機(jī)理、半夏毒性成分和有效成分研究尚不清楚的情況下，炮制品質(zhì)量控制以傳統(tǒng)的麻舌感程度［4-5］和以生物堿、氨基酸等某一成分為指標(biāo)，可以在一定程度上證明炮制工藝的可靠性。為達(dá)到降低毒性、增強(qiáng)藥效的目的，我們對(duì)半夏的炮制原理、炮制工藝有必要進(jìn)行更系統(tǒng)的研究和探討，以尋找和制定半夏炮制品的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

［1］鄒菊英，陳勝璜，雷昌，等.半夏炮制前后HPLC圖譜的比較［J］.湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，30（9）：127-129.

［2］楊錫，羅興平.正交設(shè)計(jì)法研究半夏的炮制工藝［J］.中成藥，1993，15（8）：18-19.

［3］胡昌江，李國(guó)民，馬烈，等.法半夏炮制工藝改革的研究［J］.中成藥，1999，21（1）：18-21.

［4］王潮奎，慕文靜.半夏炮制的實(shí)驗(yàn)探討［J］.河南中醫(yī)藥學(xué)刊，2001，16（4）：12.

［5］鄧然興，黃儒龍，范宋玲.不同方法炮制姜半夏對(duì)β-谷甾醇含量的影響［J］.基層中藥雜志，2001，15（2）：25-26.