葛仙米藻膽蛋白的體外消化特性

程 超，李 偉，汪興平,*，潘思軼

(1.湖北民族學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，湖北 恩施 445000；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖北 武漢 430070)

葛仙米藻膽蛋白的體外消化特性

程 超1,2，李 偉1，汪興平1,*，潘思軼2

(1.湖北民族學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，湖北 恩施 445000；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖北 武漢 430070)

研究葛仙米藻膽蛋白在體外模擬胃液和腸液的消化產(chǎn)物性質(zhì)，重點(diǎn)測(cè)定不同消化時(shí)間產(chǎn)物的可溶性蛋白質(zhì)、游離氨基含量變化及其抗氧化作用，并利用HPLC法測(cè)定消化產(chǎn)物分子質(zhì)量變化情況。結(jié)果表明：在胃液和腸液消化作用下蛋白質(zhì)含量均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，而游離氨基含量呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，消化產(chǎn)物較初始產(chǎn)物對(duì)ABTS+·和脂質(zhì)過氧化具有更強(qiáng)的抑制作用，但對(duì)·OH的清除能力卻有所下降；偏相關(guān)分析結(jié)果表明，與葛仙米藻膽蛋白消化產(chǎn)物的抗氧化作用緊密相關(guān)的是消化產(chǎn)物中的分子質(zhì)量為6ku和0.2ku的肽類。

葛仙米；藻膽蛋白；模擬胃腸液；抗氧化；高效液相色譜

藻膽蛋白酶解可提高其生理功能，如在最適胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解條件下，螺旋藻藻膽蛋白酶解產(chǎn)物對(duì)ACE的抑制率分別為82.16%和93.54%[1]；用堿性蛋白酶和木瓜蛋白酶處理也可得到高活性的ACE抑制肽，且體內(nèi)活性強(qiáng)于體外[2]。螺旋藻粉粗提液經(jīng)兩種不同酶解方法酶解，都能有效提高螺旋藻干藻粉抗氧化、降血壓活性[3]。藻藍(lán)蛋白經(jīng)胰蛋白酶酶解時(shí)，隨酶解時(shí)間延長酶解液清除自由基能力逐漸增強(qiáng)[4]。利用堿性蛋白酶酶解螺旋藻蛋白，發(fā)現(xiàn)307～1450D范圍的螺旋藻小分子肽為水解物中抗氧化能力最強(qiáng)的成分[5]。胰蛋白酶酶解藻藍(lán)蛋白得到的肽抗氧化活性是藻藍(lán)蛋白的5倍，且能有效保護(hù)質(zhì)粒DNA免受2,2-偶氮二(甲基丙基咪)二鹽酸鹽(AAPH)攻擊[6]。藻藍(lán)蛋白和其胰蛋白酶酶解產(chǎn)物對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞株的體外生長抑制作用有明顯的劑量效應(yīng)，酶解時(shí)間為l、2h的酶解產(chǎn)物的抗腫瘤活性明顯高于藻藍(lán)蛋白[7]。藻藍(lán)蛋白酶解物的抗腫瘤活性明顯高于相同濃度下的藻藍(lán)蛋白，不同酶解條件下的酶解產(chǎn)物對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的抑制作用不同，且差異顯著，這說明酶解產(chǎn)物分子質(zhì)量及其結(jié)構(gòu)對(duì)其抗癌功能的發(fā)揮具有重要作用[8]。王雪青等[9]選擇不同的酶解條件制備得到了不同抗癌活性的活性肽。

以上資料表明藻膽蛋白酶解后抗氧化、抗癌活性會(huì)增強(qiáng)，同時(shí)也會(huì)派生出其他的生理功能，但以上研究主要集中在螺旋藻這類藻膽蛋白，對(duì)葛仙米藻膽蛋白消化未見報(bào)道；同時(shí)以上研究主要采用蛋白酶對(duì)其進(jìn)行酶解，而日常生活對(duì)此類原料的攝取主要是通過口腔攝入，藻膽蛋白經(jīng)體內(nèi)的腸胃消化后的產(chǎn)物作用如何值得探討。因此本實(shí)驗(yàn)建立體外胃、腸液模擬體系，研究葛仙米藻膽蛋白消化產(chǎn)物的成分含量和抗氧化特性，以期初步明確藻膽蛋白在體內(nèi)發(fā)揮作用的成分。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

葛仙米藻膽蛋白：準(zhǔn)確稱取30g脫脂干葛仙米粉用適量蒸餾水復(fù)溶，于－20℃反復(fù)凍融3次，用pH7.3磷酸氫二鉀-氫氧化鈉緩沖液在4℃條件下浸提，10000r/min離心15min，20%硫酸銨沉淀去除雜蛋白，繼續(xù)用60%硫酸銨沉淀，沉淀透析后冷凍干燥得產(chǎn)品。

胃蛋白酶(3000U/mg)、胰蛋白酶(250U/mg)、D-脫氧核糖 美國Amresco公司；抗壞血酸 科瑞生化試劑公司；考馬斯亮藍(lán)試劑盒 南京建成生物工程研究所；賴氨酸 上海政翔化學(xué)試劑研究所；2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS) 上?；瘜W(xué)工業(yè)發(fā)展有限公司；鄰苯二甲醛(OPA)、三氯乙酸、硫酸亞鐵、雙氧水、三氯化鐵、乙二胺四乙酸二鈉、三羥基氨基甲烷、硫酸銨、鹽酸(均為分析純) 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；硫代巴比妥酸 天津市凱通化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Avanti J-301高速冷凍離心機(jī) 美國Beckman-Coulter公司；ALPHA1-4真空冷凍干燥機(jī) 德國Chris公司；UV1900PC紫外雙光束-可見分光光度計(jì) 上海亞研電子科技有限公司；高效液相色譜儀(Waters 2998 Photodiode Array Detector；Waters e2995 Separations medule) 美國Waters公司。

1.3 方法

1.3.1 體外胃液和腸液的模擬[10]

2×人工胃液：1000mL溶液中含有NaCl 4.0g、胃蛋白酶6.4g、14mL濃鹽酸。pH 值約為1.2，胃蛋白酶的活力為3000～3500U/mg。

2×人工腸液：將13.6g KH2PO4溶于250mL 雙蒸水，振蕩，完全溶解后加190mL 0.2mol/L NaOH 和400mL的雙蒸水。加胰蛋白酶20.0g, 混勻，用0.2mol/L NaOH調(diào)pH值到7.5±0.1，雙蒸水定容于1000mL。胰蛋白酶的活力為4U/mg。

1.3.2 蛋白質(zhì)在人工胃液中的消化程度

取11個(gè)50mL三角瓶，每瓶加10mL 2×人工胃液，37℃保溫10min。然后在各瓶中分別加入10mL 20mg/mL葛仙米藻膽蛋白溶液，37℃消化，按時(shí)間梯度0、1、5、10、15、30、60、90、120、150、180min準(zhǔn)確計(jì)時(shí)，用0.168mol/L Na2CO3調(diào)整pH值為7～8終止反應(yīng)。冷凍干燥得不同模擬胃液消化的樣品。

1.3.3 蛋白質(zhì)在人工腸液中消化程度

取11個(gè)50mL三角瓶，每管加入10mL的2×人工腸液，37℃保溫10min。在各瓶中分別加入10mL 葛仙米藻膽蛋白溶液( 37℃預(yù)熱)，37℃消化，按0、1、5、10、15、30、60、90、120、150、180min準(zhǔn)確計(jì)時(shí)，90℃加熱5min終止反應(yīng)，冷凍干燥得不同模擬腸液消化的樣品。

1.3.4 可溶性蛋白質(zhì)含量測(cè)定

采用Bradford法[11]。

1.3.5 游離氨基含量測(cè)定

采用鄰苯二甲醛法[12]。以賴氨酸為標(biāo)準(zhǔn)品，以賴氨酸含量(0～160μg)為橫坐標(biāo)(x)，以A340nm為縱坐標(biāo)(y)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，擬合得其回歸方程為y＝0.0090.0039，r＝0.9994。

樣品中游離氨基含量測(cè)定：準(zhǔn)確稱取不同胃液和腸液消化時(shí)間的冷凍干燥樣品70mg，分別溶于3mL蒸餾水中，將此樣品溶液稀釋4倍后，取100μL 稀釋樣液，加100μL蒸餾水，4mL OPA試劑，混勻后35℃反應(yīng)2min，以O(shè)PA試劑加200μL蒸餾水為空白，于340nm波長處測(cè)定吸光度。

式中：m為消化產(chǎn)物的質(zhì)量/g；K為消化產(chǎn)物溶液的稀釋倍數(shù)。

1.3.6 消化產(chǎn)物的抗氧化作用

參照參考文獻(xiàn)[13]的方法測(cè)定消化產(chǎn)物對(duì)ABTS+·的清除作用、消化產(chǎn)物對(duì)H2O2誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化的抑制作用，利用D-脫氧核糖體系測(cè)定消化產(chǎn)物對(duì)·OH的清除作用[14]。

1.3.7 胃液和腸液消化產(chǎn)物的HPLC分析

采用β-葡萄糖苷酶(129.0ku，保留時(shí)間9.897min)、牛血清白蛋白(65.91ku，保留時(shí)間10.64min)、胰蛋白酶(23.12ku，保留時(shí)間12.14min)、VB12(1.339ku，保留時(shí)間14.18min)為標(biāo)準(zhǔn)品，以標(biāo)樣分子質(zhì)量為橫坐標(biāo)，保留時(shí)間為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程y＝－ 0.9264lnx＋14.60，r＝0.9871。

HPLC柱型號(hào)：SEC-300(4.8mm×300mm)Sepax Technologies；洗脫液：0.1mol/L pH7.0 磷酸鹽緩沖液；上樣量：20μL，柱溫：25℃；流速：0.3mL/min；檢測(cè)波長：280nm[15]。

2 結(jié)果與分析

2.1 葛仙米藻膽蛋白不同消化時(shí)間蛋白質(zhì)和游離氨基含量變化

表1 胃、腸液不同消化時(shí)間蛋白質(zhì)和游離氨基含量的變化Table 1 Changes in protein and free amino acid contents during digestion of Nostoc sphaeroides k.ting phycobiliprotein in simulated gastric or intestinal fluids

表1 胃、腸液不同消化時(shí)間蛋白質(zhì)和游離氨基含量的變化Table 1 Changes in protein and free amino acid contents during digestion of Nostoc sphaeroides k.ting phycobiliprotein in simulated gastric or intestinal fluids

注：同列肩標(biāo)字母不同表示差異顯著(P＜0.05)。

由表1可知，在胃液和腸液中隨消化時(shí)間延長可溶性蛋白含量下降，對(duì)其進(jìn)行顯著分析發(fā)現(xiàn)，胃液0、1min消化產(chǎn)物可溶性蛋白含量無差異，但5min開始顯著下降，這說明在模擬胃液消化中蛋白質(zhì)在5min時(shí)開始大量被消化，且在胃液處理90min內(nèi)蛋白質(zhì)消化幅度變化不大，120min時(shí)又開始明顯消化。腸液消化產(chǎn)物在1min與0min可溶性蛋白質(zhì)含量顯著下降，這說明腸液初始處理就對(duì)蛋白質(zhì)具有消化作用，同胃液一樣在腸液處理的90min內(nèi)蛋白質(zhì)具有小幅下降。游離氨基的含量變化與可溶性蛋白含量相反，呈現(xiàn)增加趨勢(shì)。

2.2 葛仙米藻膽蛋白消化產(chǎn)物的抗氧化特性

2.2.1 消化產(chǎn)物對(duì)ABTS+·的清除作用

取不同消化時(shí)間的樣品70mg，加蒸餾水3mL溶解，測(cè)定消化產(chǎn)物對(duì)ABTS+·的清除率，結(jié)果見圖1。葛仙米藻膽蛋白的胃液和腸液消化產(chǎn)物對(duì)ABTS+·的清除能力隨著消化時(shí)間的延長而增強(qiáng)，但是120min腸液消化產(chǎn)物的ABTS+·清除能力有所下降，而150min胃液消化產(chǎn)物對(duì)ABTS+·的清除作用略有下降?？傮w上胃液消化產(chǎn)物對(duì)ABTS+·的清除作用強(qiáng)于腸液消化產(chǎn)物。

圖1 消化產(chǎn)物對(duì)ABTS+·的清除作用Fig.1 Changes in ABTS+· radical scavenging effect during digestion of Nostoc sphaeroides k.ting phycobiliprotein in simulated gastric or intestinal fluids

2.2.2 消化產(chǎn)物對(duì)·OH的清除作用

圖2 消化產(chǎn)物對(duì)·OH的抑制作用Fig.2 Changes in hydroxyl radical scavenging effect during digestion of Nostoc sphaeroides k.ting phycobiliprotein in simulated gastric or intestinal fluids

由圖2可知，胃液消化產(chǎn)物對(duì)·OH清除作用均強(qiáng)于腸液的消化產(chǎn)物，但腸液和胃液初期消化產(chǎn)物對(duì)·OH清除作用均有所下降，二者在消化處理10min后對(duì)·OH抗氧化作用回升，之后一直保持上升趨勢(shì)，但消化處理180min均未超過初始消化產(chǎn)物對(duì)·OH的清除作用。

2.2.3 消化產(chǎn)物對(duì)H2O2誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化的抑制作用

圖3 消化產(chǎn)物對(duì)H2O2誘導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化的抑制作用Fig.3 Changes in inhibitory effect on H2O2-induced lipid peroxidation during digestion of Nostoc sphaeroides k.tingphycobiliprotein in simulated gastric or intestinal fluids

由圖3可知，腸液消化產(chǎn)物對(duì)脂質(zhì)過氧化抑制作用強(qiáng)于胃液，且腸液消化產(chǎn)物對(duì)脂質(zhì)過氧化的抑制作用隨時(shí)間延長而增強(qiáng)，至消化處理90min達(dá)最高值，之后略有小幅下降；胃液消化產(chǎn)物隨消化時(shí)間延長對(duì)脂質(zhì)過氧化抑制作用顯著增加，到消化處理60min時(shí)達(dá)最高值，隨后略有小幅下降，但均顯著高于初始樣品對(duì)脂質(zhì)過氧化的抑制作用。

由表2可知，模擬胃、腸液中，所測(cè)定消化產(chǎn)物抗氧化指標(biāo)與不同消化時(shí)間的蛋白質(zhì)含量均呈負(fù)相關(guān)，即可溶性蛋白質(zhì)含量越低抗氧化效果越好；但與游離氨基含量呈正相關(guān)，模擬胃液中對(duì)·OH抑制率與游離氨基含量的相關(guān)性達(dá)到了極顯著水平(P＜0.01)。模擬腸液中各個(gè)抗氧化指標(biāo)與游離氨基含量達(dá)到了顯著或極顯著水平(P＜0.05，P＜0.01)。

表2 模擬胃腸液消化產(chǎn)物中蛋白質(zhì)和游離氨基含量與其抗氧化特性的相關(guān)性Table 2 Partial correlation analysis between antioxidant properties and protein or free amino content for digestion products in simulated gastric fluid

2.3 葛仙米藻膽蛋白的消化產(chǎn)物HPLC分析

表3 模擬胃、腸液不同消化時(shí)間產(chǎn)物保留時(shí)間及分子質(zhì)量Table 3 Retention time and molecular weight of digestion products harvested during digestion of Nostoc sphaeroides k.ting phycobiliprotein in simulated gastric or intestinal fluids

表3 模擬胃、腸液不同消化時(shí)間產(chǎn)物保留時(shí)間及分子質(zhì)量Table 3 Retention time and molecular weight of digestion products harvested during digestion of Nostoc sphaeroides k.ting phycobiliprotein in simulated gastric or intestinal fluids

胃液消化 保留時(shí) 相對(duì)峰 分子質(zhì)時(shí)間/min間/min面積/% 量/ku 1 6.970 9.984 3791 12.91 90.02 6.225 7.137 9.324 3166 5 12.90 90.68 6.293 6.901 7.302 4084 10 12.99 91.35 5.710 16.42 0.2353 0.1408 21.44 1.112 7.135 13.96 3172 12.99 74.99 5.710 15 14.38 2.213 1.274 16.44 2.501 0.1378 17.72 1.586 22.55 0.2441 6.9178 6.418 4011 7.519 2.889 2096 30 12.83 63.01 6.787 14.47 16.10 1.156 16.47 6.215 0.1334 17.73 1.348 6.956 7.746 3849 7.300 4.535 2655 60 12.87 80.51 6.500 16.52 1.726 0.1264 21.52 0.4308 6.889 13.85 4137 90 12.92 72.20 6.158 16.29 5.801 0.1620 21.32 0.9446 6.858 13.77 4278 120 12.93 73.91 6.092 16.27 4.090 0.1656 21.27 1.933 6.773 3.433 4689 150 12.99 83.97 5.710 16.49 7.113 0.1306 21.61 0.7405 6.818 11.29 4467 13.01 72.90 5.588 180 15.87 1.764 0.2550 16.24 4.531 0.1710 21.25 2.214腸液消化 保留時(shí) 相對(duì)峰 分子質(zhì)時(shí)間/min間/min面積/% 量/ku 6.367 2.107 7269 6.704 5.331 5052 1 9.624 0.1920 216.1 13.23 71.49 4.407 14.34 16.27 1.330 16.41 4.616 0.1423 6.324 2.409 7614 6.766 5.247 4725 5 9.597 0.1563 222 13.18 72.20 4.651 14.28 15.38 1.419 16.36 4.611 0.1502 6.428 5.931 6806 6.871 1023 4219 10 9.685 0.3380 202.3 13.09 79.97 5.126 16.51 3.527 0.1278 6.346 4.150 7435 6.685 8.420 5157 15 9.654 0.2534 209.2 13.03 84.40 5.469 16.46 2.773 0.1349 6.348 2.513 7419 6.720 5.143 4966 30 9.676 0.08592 204.3 13.07 88.54 5.238 16.42 3.719 0.1408 6.360 2.221 7324 60 6.776 6.706 4674 12.94 87.75 6.027 16.36 3.326 0.1502 6.844 9.376 4343 90 12.98 88.68 5.772 16.45 1.944 0.1363 6.395 2.008 7052 120 6.721 7.621 4960 12.99 88.43 5.710 16.48 1.941 0.1320 6.395 2.331 7052 6.790 5.845 4604 150 12.45 34.58 10.23 12.91 50.99 6.225 15.74 3.124 0.2934 6.815 13.37 4481 180 12.86 84.85 6.570 16.38 1.774 0.1470

由表3可知，腸液消化產(chǎn)物的分子質(zhì)量主要集中在4.407～6.570ku，這部分消化產(chǎn)物大約占75%～90%；胃液消化產(chǎn)物的分子質(zhì)量主要集中在5.588～6.787ku，這部分消化產(chǎn)物大約占72%～92%。此外在胃液和腸液消化產(chǎn)物中還存在分子質(zhì)量為100～200u的肽類，大約占總體消化產(chǎn)物的0.5%～7%。

2.4 胃液和腸液消化產(chǎn)物與其抗氧化作用的相關(guān)性

表4 胃液、腸液消化產(chǎn)物HPLC不同保留時(shí)間與抗氧化指標(biāo)的相關(guān)性Table 4 Correlation analysis between antioxidant properties and retention time for digestion products harvested during digestion of Nostoc sphaeroides k.ting phycobiliprotein in simulated gastric or intestinal fluids

表4 胃液、腸液消化產(chǎn)物HPLC不同保留時(shí)間與抗氧化指標(biāo)的相關(guān)性Table 4 Correlation analysis between antioxidant properties and retention time for digestion products harvested during digestion of Nostoc sphaeroides k.ting phycobiliprotein in simulated gastric or intestinal fluids

保留時(shí)間/min 皮爾遜相關(guān)系數(shù)脂質(zhì)過氧化抑制 ·O H ABTS+·7 0.034 －0.167 －0.072胃液 12.9 0.530 0.753* 0.567 16 0.583 0.772** 0.261 22 －0.591 －0.545 －0.651*6.6 －0.228 0.013 －0.250腸液 9 －0.228 －0.228 －0.056 16 －0.939** －0.686* －0.807**13 0.835** 0.671* 0.924**

由于在胃液和腸液消化產(chǎn)物中具有不同分子質(zhì)量的肽類，將胃液和腸液消化產(chǎn)物不同保留時(shí)間的相對(duì)峰面積與上述抗氧化指標(biāo)進(jìn)行偏相關(guān)分析，以確定這些肽對(duì)抗氧化的貢獻(xiàn)率。由表4可知，胃液消化產(chǎn)物中保留時(shí)間為12.9min的消化產(chǎn)物(分子質(zhì)量6ku左右)對(duì)·OH清除作用具有顯著相關(guān)，對(duì)ABTS+·的清除作用也具有相關(guān)性；保留時(shí)間為16min的消化產(chǎn)物(分子質(zhì)量0.2ku左右)對(duì)·OH清除作用的相關(guān)性達(dá)到了極顯著水平，對(duì)脂質(zhì)過氧化抑制也具有相關(guān)性；保留時(shí)間為7、22min的消化產(chǎn)物對(duì)抗氧化指標(biāo)幾乎全部具有負(fù)相關(guān)(7min消化產(chǎn)物對(duì)脂質(zhì)過氧化抑制為正相關(guān))，這說明胃液消化產(chǎn)物的分子質(zhì)量對(duì)其抗氧化作用具有重要影響，過大與多小均會(huì)使其抗氧化作用下降。腸液消化產(chǎn)物中保留時(shí)間為13min(分子質(zhì)量6ku左右)的消化產(chǎn)物與其抗氧化指標(biāo)達(dá)到了顯著正相關(guān)，保留時(shí)間為6.6、9、16min的消化產(chǎn)物對(duì)抗氧化指標(biāo)具有負(fù)相關(guān)。

3 討 論

目前人們?cè)絹碓接信d趣開發(fā)利用食物來源的生物活性肽作為保健食品，肽鍵斷裂會(huì)導(dǎo)致游離氨基和羧基基團(tuán)含量增加，從而增加其溶解性，水解破壞蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)，降低蛋白質(zhì)分子質(zhì)量，進(jìn)而改變蛋白質(zhì)功能性質(zhì)，但過度水解會(huì)對(duì)其功能性質(zhì)產(chǎn)生負(fù)面作用。目前已報(bào)道[16]來源于不同蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物具有抗氧化活性，但蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物的分子質(zhì)量對(duì)其抗氧化活性影響非常大，且與原料蛋白質(zhì)有關(guān)。

在葛仙米藻膽蛋白胃液和腸液消化產(chǎn)物中，其可溶性蛋白質(zhì)含量下降，游離氨基含量上升，所測(cè)定的幾種抗氧化指標(biāo)與可溶性蛋白含量呈負(fù)相關(guān)，而與游離氨基含量呈正相關(guān)。模擬腸液消化產(chǎn)物中分子質(zhì)量約為6ku的消化產(chǎn)物對(duì)其抗氧化左右貢獻(xiàn)最大，模擬胃液中除了6ku的消化產(chǎn)物外，分子質(zhì)量約為0.2ku的消化產(chǎn)物對(duì)其抗氧化也具有一定的作用；不同分子質(zhì)量消化產(chǎn)物對(duì)其抗氧化作用的貢獻(xiàn)尚需進(jìn)行分離純化制備不同產(chǎn)品加以驗(yàn)證。本實(shí)驗(yàn)是在單獨(dú)的模擬胃液和腸液中進(jìn)行的，而動(dòng)物體實(shí)際消化情況是先胃液后腸液，胃腸液共同作用于葛仙米藻膽蛋白，這部分實(shí)驗(yàn)?zāi)壳罢谏钊胙芯俊?/p>

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Digestion Characteristicsin vitroof Phycobiliprotein fromNostoc sphaeroidesKu..ting

CHENG Chao1,2，LI Wei1，WANG Xing-ping1,*，PAN Si-yi2
(1. Biological Scientific and Technical College, Hubei University for Nationalities, Enshi 445000, China；2. College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China)

In this study, some properties of products produced during digestion ofNostoc sphaeroidesk. ting phycobiliprotein in simulated gastric and intestinal fluids were investigated especially such as soluble protein and free amino acid contents and antioxidant properties. Meanwhile, the change in molecular weight during digestion ofNostoc sphaeroidesk.ting phycobiliprotein was determined by HPLC. The results showed that protein content revealed a downward trend during digestion in each stimulated fluids, and consequently free amino acid content exhibited an upward trend. Digestion products had stronger ABTS radical scavenging and anti-lipid peroxidation activities but weaker hydroxyl radical scavenging activity inD-deoxyribose system thanNostoc sphaeroideskting phycobiliprotein. The results of partial correlation analysis demonstrated that 6 ku and 0.2 ku peptides were closely related to the antioxidant effect of digestion products ofNostoc sphaeroidesk. ting phycobiliprotein.

Nostoc sphaeroidesKting；phycobiliprotein；simulated gastric and intestinal fluids；antioxidant activity；HPLC

TS201.1

A

1002-6630(2012)15-0006-05

2012-04-12

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31260365)；湖北民族學(xué)院團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(MY2008T004；MYT2007004)

程超(1976—)，女，副教授，博士研究生，研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)。E-mail：chengchaolw@126.com

*通信作者：汪興平(1963—)，男，教授，博士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物化學(xué)。E-mail：hbmywxp@163.com