• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    響應(yīng)面法優(yōu)化玉米須黃酮提取工藝

    2012-10-27 03:25:40李海濤周鴻立
    食品科學(xué) 2012年18期
    關(guān)鍵詞:玉米須粗提物黃酮

    張 艷,李海濤,周鴻立,*

    (1.吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院,吉林 吉林 132022;2.長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥劑科,吉林 長春 130021)

    響應(yīng)面法優(yōu)化玉米須黃酮提取工藝

    張 艷1,李海濤2,周鴻立1,*

    (1.吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院,吉林 吉林 132022;2.長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥劑科,吉林 長春 130021)

    采用響應(yīng)面法優(yōu)化玉米須黃酮的提取工藝條件。以乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取溫度、提取時(shí)間和料液比為考察因素,黃酮提取率為響應(yīng)值,進(jìn)行四因素三水平Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì),獲得多元二次回歸方程;考察玉米須黃酮體內(nèi)抗氧化作用。結(jié)果表明:最佳提取工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)58%、提取溫度78℃、提取時(shí)間1.7h、料液比1:26(g/mL),此工藝條件黃酮得率為0.41%。玉米須黃酮能夠降低血清和肝臟中的丙二醛含量,增加超氧化物歧化酶活力,具有一定的抗氧化能力。

    玉米須黃酮;響應(yīng)面;抗氧化

    玉米(Zea maysL.)為禾本科玉蜀屬植物,是我國廣泛種植的傳統(tǒng)農(nóng)作物。玉米須為玉米的花柱和柱頭,是我國傳統(tǒng)藥食同源的中草藥,為《中華人民共和國衛(wèi)生部藥材標(biāo)準(zhǔn)》收錄的常用藥材品種之一。玉米須具有利水消腫、降壓降糖等功效,用于治療水腫、黃疸、高血壓、糖尿病等病癥;含有多種活性成分[1-3],如黃酮類、多糖類、揮發(fā)油、皂苷等。

    響應(yīng)面分析法[4-8]是利用合理的試驗(yàn)設(shè)計(jì),通過試驗(yàn)得到的相關(guān)數(shù)據(jù),采用多元二次回歸方程來擬合因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系,通過對(duì)回歸方程的分析來尋求最優(yōu)工藝參數(shù),解決多變量問題的一種統(tǒng)計(jì)方法。隨著計(jì)算機(jī)的發(fā)展,它已廣泛地應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、生物、食品、化學(xué)、制造等領(lǐng)域。目前關(guān)于玉米須黃酮提取工藝的報(bào)道[9-13],多采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法,而采用響應(yīng)面法優(yōu)化玉米須黃酮提取工藝尚未見報(bào)道。本研究以玉米須為試驗(yàn)材料,利用Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,采用四因素三水平的響應(yīng)面分析法,優(yōu)化玉米須黃酮提取的最佳工藝條件,并研究其體內(nèi)抗氧化作用,為進(jìn)一步開發(fā)和利用玉米須資源提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    玉米須2010年10月采收于吉林省吉林市郊區(qū),經(jīng)吉林大學(xué)王廣樹教授鑒定為玉蜀黍玉米(Zea maysL.)的干燥花柱和柱頭,實(shí)驗(yàn)前洗凈、曬干、剪碎、干燥通風(fēng)處保存。

    無水乙醇、三氯化鋁、甲醇均為國產(chǎn)分析純;丙二醛、超氧化物化酶、考馬斯亮藍(lán)試劑盒 南京建成試劑有限公司;蘆丁對(duì)照品 中國(長春)藥品生物制品檢定所。

    1.2 儀器與設(shè)備

    RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠;HH-S恒溫水浴鍋 江蘇省金壇市正基儀器有限公司;725型紫外光柵分光光度計(jì) 山東高密彩虹分析儀器有限公司;LDZ-5-2低速自動(dòng)平衡離心機(jī) 北京醫(yī)用離心機(jī)廠;FA-2004分析天平 上海精細(xì)科技儀器廠。

    1.3 試驗(yàn)動(dòng)物

    ICR小鼠,18~22g,合格證號(hào):醫(yī)動(dòng)字第scxk-(吉)-2010-0011,由長春高新醫(yī)學(xué)動(dòng)物研究中心提供。

    1.4 方法

    1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

    精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液(0.1mg/mL)0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于6只25mL容量瓶中,加體積分?jǐn)?shù)60%乙醇溶液至5mL,然后分別加入0.1mol/mL三氯化鋁-甲醇溶液10mL,用體積分?jǐn)?shù)60%乙醇溶液稀釋至刻度,搖勻,放置10min,在272nm波長處測(cè)定吸光度。以吸光度為橫坐標(biāo)、對(duì)照品質(zhì)量濃度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求得回歸方程為:Y=29.302x+0.0213,R2=0.9999,在0.1~0.5mg/mL之間有良好的線性關(guān)系。

    1.4.2 單因素試驗(yàn)

    考察乙醇體積分?jǐn)?shù)、溫度、提取時(shí)間、料液比4個(gè)因素對(duì)玉米須黃酮提取率的影響,用熱回流法進(jìn)行提取,按標(biāo)準(zhǔn)曲線方法計(jì)算黃酮含量,選擇最佳單因素提取條件。每次準(zhǔn)確稱取玉米須2.0g,分別以乙醇體積分?jǐn)?shù)(40%、50%、60%、70%、80%)、提取溫度(50、60、70、80、90℃)、提取時(shí)間(1.0、1.5、2.0、2.5、3.0h)和料液比(g/mL)(1:15、1:20、1:25、1:30、1:35)為影響因素進(jìn)行試驗(yàn)。單因素試驗(yàn)的固定工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、提取溫度80℃、提取2.0h、料液比1:30。

    1.4.3 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    根據(jù)Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,確定響應(yīng)面設(shè)計(jì)中每個(gè)因素的適宜范圍。以乙醇體積分?jǐn)?shù)(X1)、提取溫度(X2)、提取時(shí)間(X3)、料液比(X4)為考察對(duì)象,以黃酮提取率為參考值(Y),采用SAS 9.1軟件進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì),試驗(yàn)因素水平見表1。

    表1 玉米須黃酮提取工藝優(yōu)化Box-Behnken試驗(yàn)因素與水平Table 1 Factors and their coded levels tested in response surface analysis

    1.4.4 玉米須黃酮粗提物抗氧化實(shí)驗(yàn)

    按照最佳工藝條件提取所得到的玉米須黃酮粗提物,經(jīng)真空干燥后,以水為溶劑分別配成1 0、2 0、40mg/mL溶液。將ICR小鼠隨機(jī)分為空白組、陽性藥組以及玉米須黃酮粗提物低、中、高劑量組,每組10只。空白組給予水,陽性藥組按照400mg/kg給予VC,低、中、高劑量組分別按照200、400、800mg/kg給予玉米須黃酮粗提物,連續(xù)灌胃給藥30d。末次給藥前禁食不禁水12h,末次給藥1h后,摘眼球取血,分離血清,取肝臟,以試劑盒方法測(cè)定血清及肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)的含量,采用SPSS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素試驗(yàn)

    圖1 各單因素對(duì)提取率的影響Fig.1 One-factor-at-a-time analysis of the effects of ethanol concentration, extraction temperature, extraction time, material-to-liquid ratio on extraction rate of flavonoids

    由圖1可知,乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%時(shí),黃酮的提取率最大,此后隨乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大提取率減少,可能由于60%乙醇溶液的極性與黃酮類化合物極性相似,隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的升高,一些脂溶性物質(zhì)的溶出增加,影響了黃酮類物質(zhì)的浸出;提取溫度為80℃時(shí),提取率最大,超過80℃,提取率下降,可能由于溫度升高,提取溶劑揮發(fā),導(dǎo)致提取率下降;提取時(shí)間為2.0h時(shí),提取率最大,超過2.0h,提取率下降,可能是由于原因是時(shí)間過短,黃酮類物質(zhì)還未充分溶出,時(shí)間過長,一些熱敏性組分被破壞或溶劑揮發(fā)導(dǎo)致乙醇濃度降低而使黃酮類化合物提取率降低;料液比為1:30(g/mL)時(shí),提取率最大,此后提取率降低。

    2.2 響應(yīng)面法試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果及方差分析

    表2 玉米須黃酮提取工藝優(yōu)化響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

    Table 2 Experimental design and results for response surface analysis

    試驗(yàn)號(hào) X1 X2 X3 X4 Y提取率/%1 -1 -1 0 0 0.2698 2 -1 1 0 0 0.3591 3 1 -1 0 0 0.2365 4 1 1 0 0 0.3413 5 0 -1 -1 0.2550 6 0 0 -1 1 0.2586 0 7 1 -1 0.2846 8 0 0 1 1 0.3556 0 0 9 -1 0 0 -1 0.2846 10 -1 0 0 1 0.3301 11 1 0 0 -1 0.2537 12 1 0 0 1 0.3080 13 0 -1 -1 0 0.2383 14 0 -1 1 0 0.2396 15 0 1 -1 0 0.3138 16 0 1 1 0 0.3955 17 -1 0 -1 0 0.2791 18 -1 0 1 0 0.3507 19 1 0 -1 0 0.2329 20 1 0 1 0 0.2725 21 0 -1 0 -1 0.2262 22 0 -1 0 1 0.2419 23 0 1 0 -1 0.3686 24 0 1 0 1 0.3899 25 0 0 0 0 0.3528 26 0 0 0 0 0.3624 27 0 0 0 0 0.3525

    通過SAS 9.1軟件對(duì)表2試驗(yàn)結(jié)果分析獲得多元二次回歸方程:

    表3 玉米須黃酮提取工藝優(yōu)化數(shù)學(xué)模型方差分析Table 3 Analysis of variance for the fitted regression model

    圖2 各兩因素交互作用對(duì)玉米須黃酮提取率影響的響應(yīng)面及等高線圖Fig.2 Response surface and contour plots showing the effects of four process parameters on extraction rate of flavonoids

    由圖2c可知,黃酮提取率隨提取時(shí)間的延長和溫度提高呈先上升后下降的趨勢(shì),且二者有明顯的交互作用??赡苡捎谘娱L提取時(shí)間有助于黃酮的充分?jǐn)U散析出,同時(shí)溫度的升高使得分子擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)速度加快,黃酮的析出速率和提取率提高。由圖2f可知,提取時(shí)間較長、乙醇體積分?jǐn)?shù)較高條件下黃酮提取率較高,二者有明顯的交互作用??赡苡捎谝掖俭w積分?jǐn)?shù)較低時(shí)黃酮溶解度較差,提取時(shí)間的延長使大量水溶性雜質(zhì)如多糖溶出,提取液變得黏稠對(duì)黃酮產(chǎn)生吸附作用,不利于黃酮的快速擴(kuò)散溶出。

    2.3 反應(yīng)條件的優(yōu)化與模型驗(yàn)證

    由SAS 9.1軟件嶺脊分析得到Y(jié)值最大時(shí),X1、X2、X3、X4對(duì)應(yīng)的編碼值分別為X1=-0.17569、X2=0.84631、X3=0.42665,X4=0.26619。對(duì)應(yīng)的最佳工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)58.2431%、提取溫度78.4631℃、提取時(shí)間1.7133h、料液比1:26.3306(g/mL),黃酮提取率理論值為0.4104%。

    選取乙醇體積分?jǐn)?shù)58%、提取溫度78℃、提取時(shí)間1.7h、料液比1:26(g/mL)進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),3次平行試驗(yàn)得到實(shí)際平均提取率為0.41%,較理論值高0.005%。因此,采用響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化得到的玉米須黃酮提取條件參數(shù)準(zhǔn)確可靠,對(duì)實(shí)際應(yīng)用有一定的價(jià)值。

    2.4 抗氧化實(shí)驗(yàn)

    表4 玉米須黃酮粗提物對(duì)小鼠MDA含量和SOD活力的影響(n=10)Table 4 Effect of corn silk flavonoids on MDA content and SOD activity in mice (n=10)

    由表4可知,與空白組比較,低劑量組血清MDA含量明顯降低,P<0.05;中、高劑量組血清和肝臟組織中MDA含量明顯降低,P<0.05;高劑量組血清和肝臟組織SOD活力明顯升高。MDA作為脂質(zhì)過氧化的最終產(chǎn)物是衡量機(jī)體自由基代謝的敏感指標(biāo),其含量能客觀地反映機(jī)體產(chǎn)生自由基的水平[18-20]。從結(jié)果可知,玉米須黃酮有較好的清除自由的能力,并能增加清除自由基的酶SOD的活力。

    3 結(jié) 論

    利用軟件SAS 9.1軟件進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì),采用響應(yīng)曲面法建立玉米須黃酮提取工藝條件的二次多項(xiàng)式數(shù)學(xué)模型,分析了各因素對(duì)響應(yīng)值的影響。結(jié)果表明,模型擬合程度高,試驗(yàn)誤差小,最佳的提取工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)58%、提取溫度78℃、提取時(shí)間1.7h、料液比1:26(g/mL),此工藝條件的黃酮提取率為0.41%。研究表明,從玉米須分離及鑒定的化合物主要有黃酮及其苷類、甾醇、生物堿、糖類、有機(jī)酸、揮發(fā)油、皂苷、微量元素及多種維生素等。本實(shí)驗(yàn)采用乙醇為提取溶劑,主要提取對(duì)象為黃酮苷類。體內(nèi)抗氧化試驗(yàn)表明,玉米須黃酮粗提物有一定的抗氧化能力,能夠降低血清和肝臟中的MDA含量,增加SOD活力,因此,抗氧化實(shí)驗(yàn)可為開發(fā)玉米須黃酮作為潛在天然抗氧化劑應(yīng)用于食品和醫(yī)藥工業(yè)中提供理論依據(jù)。

    [1]徐燕, 梁敬鈺. 玉米須的化學(xué)成分研究[J]. 中草藥, 2006, 37(6): 831-833.

    [2]任順成, 丁霄霖. 玉米須黃酮類成分的提取分離與結(jié)構(gòu)鑒定(Ⅰ)[J]. 中草藥, 2004, 35(8): 857-858.

    [3]徐燕, 鄒中梅, 梁敬鈺. 玉米須的化學(xué)成分[J]. 中國天然藥物, 2008,6(3): 237-238.

    [4]沈其君. SAS統(tǒng)計(jì)分析[M]. 南京: 東南大學(xué)出版社, 2009: 9-56.

    [5]慕運(yùn)動(dòng). 響應(yīng)面方法及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用[J]. 鄭州工程學(xué)院學(xué)報(bào), 2001, 22(3): 91-94.

    [6]AHUJA S K, FERREIRA G M, MOREIRA A R. Application of Plaekett-Burman design and response surface methodology to achieve exponential growth for aggregated shipworm bacterium[J]. Biotechnology and Bioengineering, 2004, 85(6): 666-675.

    [7]SILVA E M, ROGEZ H, LARONDELLE Y. Optimization of extraction of phenolics fromInga edulisleaves using response surface methodology[J]. Separation and Purification Technology, 2007, 55(3): 381-387.

    [8]WANG Jing, SUN Baoguo, CAO Yanping, et al. Optimisation of ultrasound-assisted extraction of phenolic compounds from wheat bran[J].Food Chemistry, 2008, 106(2): 804-810.

    [9]胡改鑫, 楊堯, 楊思思, 等. 超聲波提取玉米須總黃酮的工藝研究[J].糧油加工, 2009, 12(3): 120-122.

    [10]ZHOU hongli, DONG Weiquan, XIAO Zhenjing, et al. Microwaveassisted extraction of total flavonoids from corn silk[J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research, 2011, 22(2): 483-485.

    [11]王寧, 徐艷, 韓笑非. 酶法提取玉米須總黃酮工藝研究試驗(yàn)[J]. 遼寧中醫(yī)雜志, 2009, 36(6): 994-996.

    [12]任順成, 丁霄霖. 玉米須中總黃酮的提取及樹脂精制[J]. 中草藥,2003, 34(12): 1092-1094.

    [13]JOSEPH N N. Inhibition ofAspergillus flavusgrowth by silk extracts of resistant and susceptible corn[J]. J Agr Food Chem, 1996, 44(8): 1982-1983.

    [14]紀(jì)麗蓮, 范怡梅. 玉米須提取物對(duì)食品腐敗菌及致病菌抑制作用的研究[J]. 食品科學(xué), 2000, 21(12): 131-134.

    [15]LIU Wei, YU Yanying, YANG Ruzhen, et al. Optimization of total flavonoid compound extraction from gynura medica leaf using response surface methodology and chemical composition analysis[J]. Int J Mol Sci, 2010, 11(11): 4750-4763.

    [16]XIAO Weihua, HAN Lujia, SHI Bo. Optimization of microwave-assisted extraction of flavonoid fromRadix Astragaliusing response surface methodology[J]. Sep Sci and Technol, 2008, 43(3): 671-681.

    [17]ASHAN S E, MIGANAD T, ARIFF A, et al. Optimization of enzymatic synthesis of palm-based kojic acid ester using response surface methodology[J]. J Oleo Sci, 2009, 58(10): 503-510.

    [18]方敏, 占才貴, 宮智勇. 玉米須總黃酮的提取與抗氧化活性研究[J].食品科學(xué), 2009, 30(18): 206-208.

    [19]MILLER S S, REID L M, BUTLER G, et al. Long chain alkanes in silk extracts of maize genotypes with varying resistance toFusarium graminearum[J]. J Agri Food Chem, 2003, 51(23): 6702-6708.

    [20]熊皓平, 楊偉麗, 張友勝, 等. 天然植物抗氧化劑的研究進(jìn)展[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2001, 15(5): 75-78.

    Optimization of Extraction Process for Flavonoids from Corn Silk by Response Surface Methodology

    ZHANG Yan1,LI Hai-tao2,ZHOU Hong-li1,*
    (1. School of Chemical and Pharmaceutical Engineering, Jilin Institute of Chemical Technology, Jilin 132022, China;2. Department of Pharmacy, Changchun University of Traditional Chinese Medicine Hospital, Changchun 130021, China)

    This work reports the use of response surface methodology optimize the extraction of flavonoids from corn silk.The extraction yield of flavonoids was investigated with respect to four variables including ethanol concentration, temperature,time and material-to-liquid ratio. A multivariable quadratic regression equation was built using a four-variable, three-level Box-Behnken experimental design. The optimal conditions for extracting flavonoids from corn silk were determined as 1.7 h extraction with 58% ethanol at a material-to-liquid ratio of 1:26 (g/mL) and 78 ℃. Under these conditions, the extraction efficiency of flavonoids was 0.41%. Oral ingestion of the flavonoids extracted from corn silk resulted in reduced MDA content in the serum and liver of mice and enhanced SOD activity, suggesting that these compounds have antioxidant effects in mice.

    flavonoids from corn silk;response surface methodology;antioxidation

    R285.5

    A

    1002-6630(2012)18-0133-05

    2011-08-15

    吉林省教育廳科技項(xiàng)目(2010第175號(hào))

    張艷(1981—),女,講師,博士,研究方向?yàn)橹兴幩幚韺W(xué)。E-mail:zyzxorange@126.com

    *通信作者:周鴻立(1967—),女,教授,博士,研究方向?yàn)橹兴幓瘜W(xué)。E-mail:zhl67@126.com

    猜你喜歡
    玉米須粗提物黃酮
    牛蒡根皮多酚、多糖粗提物對(duì)海蘭褐殼蛋雞產(chǎn)蛋性能及血液生化指標(biāo)的影響
    痛風(fēng)散粗提物鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)研究
    云南化工(2021年5期)2021-12-21 07:41:20
    植物粗提物可作為防治獼猴桃根結(jié)線蟲的綠色藥劑
    HPLC法同時(shí)測(cè)定固本補(bǔ)腎口服液中3種黃酮
    中成藥(2017年8期)2017-11-22 03:19:40
    MIPs-HPLC法同時(shí)測(cè)定覆盆子中4種黃酮
    中成藥(2017年10期)2017-11-16 00:50:13
    DAD-HPLC法同時(shí)測(cè)定龍須藤總黃酮中5種多甲氧基黃酮
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:50
    玉米須
    瓜馥木中一種黃酮的NMR表征
    玉米須總黃酮的抗氧化性研究
    油茶殼總黃酮對(duì)食用油脂抗氧化性研究
    如何舔出高潮| 在线天堂最新版资源| 国产一区二区三区av在线| 一级片'在线观看视频| 丰满少妇做爰视频| 高清在线视频一区二区三区| 波野结衣二区三区在线| 日韩制服骚丝袜av| 精品卡一卡二卡四卡免费| 另类精品久久| 久久久久国产网址| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产高清有码在线观看视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 在线精品无人区一区二区三| 精品久久久久久久久亚洲| 国产高清国产精品国产三级| 久久99热6这里只有精品| 考比视频在线观看| 国产黄色免费在线视频| 午夜免费鲁丝| 18禁动态无遮挡网站| kizo精华| 欧美日韩在线观看h| 久久久久人妻精品一区果冻| 超碰97精品在线观看| 久久这里有精品视频免费| 国产成人精品久久久久久| 一级毛片 在线播放| 丝袜美足系列| 国产一区有黄有色的免费视频| 五月开心婷婷网| 69精品国产乱码久久久| 午夜福利视频精品| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| videosex国产| 七月丁香在线播放| 一本久久精品| 久久狼人影院| 欧美精品一区二区大全| 伦理电影免费视频| 少妇熟女欧美另类| 欧美+日韩+精品| 只有这里有精品99| 久久青草综合色| 亚洲av综合色区一区| 久久亚洲国产成人精品v| 视频在线观看一区二区三区| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 少妇被粗大的猛进出69影院 | 欧美日韩在线观看h| 欧美性感艳星| 国产亚洲一区二区精品| 国产成人freesex在线| 最新的欧美精品一区二区| 日韩强制内射视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲精品av麻豆狂野| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 免费高清在线观看日韩| 97超视频在线观看视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产成人一区二区在线| 又大又黄又爽视频免费| 大香蕉97超碰在线| 人妻 亚洲 视频| 久久热精品热| 国产综合精华液| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲无线观看免费| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲情色 制服丝袜| 天堂俺去俺来也www色官网| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 日韩中字成人| 一级毛片我不卡| 亚洲,一卡二卡三卡| 亚洲精品456在线播放app| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲国产精品专区欧美| 国产片特级美女逼逼视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 精品国产露脸久久av麻豆| 我的女老师完整版在线观看| 高清欧美精品videossex| 少妇精品久久久久久久| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 日本av手机在线免费观看| 飞空精品影院首页| 久久久国产精品麻豆| 国产一区二区在线观看av| 一本久久精品| 国产精品人妻久久久久久| av在线观看视频网站免费| 综合色丁香网| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产有黄有色有爽视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产 精品1| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲美女黄色视频免费看| 91在线精品国自产拍蜜月| 自线自在国产av| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲精品国产色婷婷电影| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 人妻一区二区av| av福利片在线| 国内精品宾馆在线| 日韩在线高清观看一区二区三区| 日本wwww免费看| 一本久久精品| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产一区二区三区av在线| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 97在线人人人人妻| 久久久午夜欧美精品| 亚洲国产精品一区三区| 日日啪夜夜爽| 午夜日本视频在线| 亚洲,一卡二卡三卡| videos熟女内射| 在线看a的网站| 欧美另类一区| 亚洲图色成人| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲精品视频女| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲欧美色中文字幕在线| 22中文网久久字幕| 美女福利国产在线| 一级爰片在线观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 一区二区三区乱码不卡18| 日韩视频在线欧美| 日韩伦理黄色片| 午夜福利影视在线免费观看| 久久久精品免费免费高清| 制服诱惑二区| 国产精品熟女久久久久浪| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲国产av影院在线观看| av不卡在线播放| 午夜视频国产福利| 观看av在线不卡| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日韩电影二区| 最新中文字幕久久久久| 日韩 亚洲 欧美在线| 精品少妇黑人巨大在线播放| 777米奇影视久久| 一边摸一边做爽爽视频免费| 日本免费在线观看一区| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 日韩人妻高清精品专区| av国产久精品久网站免费入址| 免费人成在线观看视频色| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 欧美一级a爱片免费观看看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 卡戴珊不雅视频在线播放| 少妇精品久久久久久久| 亚洲熟女精品中文字幕| 一本一本综合久久| 欧美激情极品国产一区二区三区 | av不卡在线播放| a级片在线免费高清观看视频| 视频区图区小说| 老司机影院成人| 色5月婷婷丁香| 精品一区二区免费观看| 国产视频内射| .国产精品久久| 午夜激情久久久久久久| 亚洲图色成人| 日本av免费视频播放| 久久韩国三级中文字幕| 中国美白少妇内射xxxbb| 少妇人妻久久综合中文| 日韩欧美精品免费久久| 日日啪夜夜爽| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 国产亚洲精品久久久com| 久久久久久久国产电影| 国产毛片在线视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 91aial.com中文字幕在线观看| 午夜激情久久久久久久| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲精品自拍成人| 一级a做视频免费观看| 美女cb高潮喷水在线观看| 丝瓜视频免费看黄片| 91精品三级在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲四区av| 男人添女人高潮全过程视频| 99热国产这里只有精品6| 男人爽女人下面视频在线观看| 一个人看视频在线观看www免费| av又黄又爽大尺度在线免费看| 啦啦啦啦在线视频资源| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲高清免费不卡视频| 考比视频在线观看| www.色视频.com| 在线免费观看不下载黄p国产| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 色哟哟·www| 午夜精品国产一区二区电影| 婷婷色麻豆天堂久久| 丰满少妇做爰视频| 九草在线视频观看| 欧美日本中文国产一区发布| 一级毛片电影观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 搡女人真爽免费视频火全软件| 在线免费观看不下载黄p国产| av有码第一页| 日韩制服骚丝袜av| 毛片一级片免费看久久久久| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 一区二区三区四区激情视频| 高清毛片免费看| 亚洲欧美精品自产自拍| 制服人妻中文乱码| 内地一区二区视频在线| 高清午夜精品一区二区三区| 中国三级夫妇交换| 男男h啪啪无遮挡| 91精品国产九色| www.av在线官网国产| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲色图综合在线观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 看十八女毛片水多多多| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 在线观看免费高清a一片| 在线观看一区二区三区激情| 伊人亚洲综合成人网| 免费av中文字幕在线| 日韩 亚洲 欧美在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 黄色一级大片看看| 一区二区av电影网| 国精品久久久久久国模美| 亚洲精品国产av蜜桃| 免费少妇av软件| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | .国产精品久久| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 欧美精品亚洲一区二区| 国产成人精品福利久久| 免费观看a级毛片全部| 一级片'在线观看视频| 中文字幕av电影在线播放| 久久久国产欧美日韩av| 在线看a的网站| 高清不卡的av网站| 久久久国产欧美日韩av| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 丝袜美足系列| 久久毛片免费看一区二区三区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 最近2019中文字幕mv第一页| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 在线观看免费高清a一片| av线在线观看网站| 亚洲精品aⅴ在线观看| 九色成人免费人妻av| 久久99热6这里只有精品| 亚洲久久久国产精品| 哪个播放器可以免费观看大片| 99久国产av精品国产电影| 日本黄色日本黄色录像| 日本wwww免费看| 熟女人妻精品中文字幕| 岛国毛片在线播放| 91久久精品国产一区二区三区| 自线自在国产av| 亚洲精品视频女| 亚洲高清免费不卡视频| kizo精华| 一级毛片 在线播放| 99热全是精品| 国产免费现黄频在线看| 视频区图区小说| 日韩亚洲欧美综合| 国产午夜精品一二区理论片| 中文欧美无线码| 国产在视频线精品| 成人综合一区亚洲| 欧美三级亚洲精品| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲国产精品成人久久小说| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产黄色免费在线视频| 一级二级三级毛片免费看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 免费看光身美女| 国产伦精品一区二区三区视频9| 丝袜美足系列| 亚洲av成人精品一区久久| 精品熟女少妇av免费看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产精品久久久久久精品电影小说| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 国产白丝娇喘喷水9色精品| 久久ye,这里只有精品| 高清毛片免费看| 男女啪啪激烈高潮av片| 一区二区三区乱码不卡18| 另类亚洲欧美激情| 亚洲av二区三区四区| 国产成人一区二区在线| 搡女人真爽免费视频火全软件| av不卡在线播放| 在线播放无遮挡| 看非洲黑人一级黄片| 99久久精品国产国产毛片| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲国产av新网站| 毛片一级片免费看久久久久| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲av综合色区一区| 国产探花极品一区二区| 桃花免费在线播放| 日韩亚洲欧美综合| 色5月婷婷丁香| 成人国产麻豆网| 热99国产精品久久久久久7| 午夜免费男女啪啪视频观看| 大香蕉久久成人网| 毛片一级片免费看久久久久| 国产一区有黄有色的免费视频| 超色免费av| 观看美女的网站| av线在线观看网站| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 9色porny在线观看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 久久99一区二区三区| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲精品中文字幕在线视频| 三级国产精品欧美在线观看| 国产av国产精品国产| 久久久久久久久久成人| xxxhd国产人妻xxx| 国产精品.久久久| 久久97久久精品| 亚洲精品美女久久av网站| 国产黄片视频在线免费观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 一区二区三区免费毛片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲av国产av综合av卡| 青春草国产在线视频| 亚洲av国产av综合av卡| 性色av一级| 免费人妻精品一区二区三区视频| 免费看av在线观看网站| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲不卡免费看| 亚洲av成人精品一二三区| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 97精品久久久久久久久久精品| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 成年人午夜在线观看视频| 国产成人精品无人区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 91久久精品电影网| 麻豆乱淫一区二区| 免费观看a级毛片全部| 亚洲av不卡在线观看| 欧美日韩在线观看h| 天堂俺去俺来也www色官网| 成人手机av| 国产精品久久久久久精品古装| 国产一区二区三区av在线| 婷婷成人精品国产| 大香蕉久久成人网| 人妻少妇偷人精品九色| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲情色 制服丝袜| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 国产精品成人在线| 天堂俺去俺来也www色官网| freevideosex欧美| 99热全是精品| 观看av在线不卡| 自线自在国产av| 亚洲av男天堂| 免费人成在线观看视频色| 97在线视频观看| 人妻 亚洲 视频| 国产精品一区二区在线不卡| 午夜免费男女啪啪视频观看| 一级片'在线观看视频| 老熟女久久久| 国产在线视频一区二区| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 亚洲av福利一区| 三级国产精品片| 欧美日韩综合久久久久久| 91久久精品国产一区二区成人| 91精品三级在线观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 欧美变态另类bdsm刘玥| 精品久久蜜臀av无| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 国产视频内射| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲国产av新网站| 久久精品久久久久久久性| 成人毛片a级毛片在线播放| 成人无遮挡网站| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 亚洲欧美日韩卡通动漫| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产精品免费大片| av黄色大香蕉| 免费观看a级毛片全部| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲,一卡二卡三卡| 中国美白少妇内射xxxbb| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲少妇的诱惑av| 3wmmmm亚洲av在线观看| 麻豆乱淫一区二区| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 大话2 男鬼变身卡| 久久人人爽人人片av| 婷婷色综合大香蕉| av在线老鸭窝| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产一区二区三区综合在线观看 | 精品亚洲成国产av| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲国产精品999| 日本欧美视频一区| 草草在线视频免费看| 国产成人精品一,二区| 激情五月婷婷亚洲| 伦理电影大哥的女人| 最近手机中文字幕大全| 最新的欧美精品一区二区| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 各种免费的搞黄视频| 欧美变态另类bdsm刘玥| 高清不卡的av网站| 国产成人精品久久久久久| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 亚洲丝袜综合中文字幕| 亚洲精品久久午夜乱码| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 亚洲五月色婷婷综合| 最黄视频免费看| 丝瓜视频免费看黄片| 精品国产乱码久久久久久小说| 色婷婷久久久亚洲欧美| 五月天丁香电影| 夫妻性生交免费视频一级片| 久久97久久精品| 在线播放无遮挡| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 欧美97在线视频| 亚州av有码| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 各种免费的搞黄视频| 久久久a久久爽久久v久久| 成人国产av品久久久| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久久欧美国产精品| 97在线视频观看| 国产精品国产av在线观看| 精品久久国产蜜桃| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 精品一区二区三卡| 2018国产大陆天天弄谢| 在线观看免费视频网站a站| 一级a做视频免费观看| 人妻 亚洲 视频| 99九九线精品视频在线观看视频| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 亚洲,欧美,日韩| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲精品视频女| 亚洲美女搞黄在线观看| 有码 亚洲区| 黄色一级大片看看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 精品久久久久久久久亚洲| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲国产精品一区三区| 高清午夜精品一区二区三区| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 极品人妻少妇av视频| 两个人免费观看高清视频| 91久久精品国产一区二区成人| 亚洲精品aⅴ在线观看| 欧美 日韩 精品 国产| 国产男人的电影天堂91| 99re6热这里在线精品视频| 高清欧美精品videossex| 在线观看免费日韩欧美大片 | 丰满乱子伦码专区| 久久女婷五月综合色啪小说| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 桃花免费在线播放| 亚洲无线观看免费| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲美女黄色视频免费看| 一个人免费看片子| 天美传媒精品一区二区| 大话2 男鬼变身卡| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 午夜久久久在线观看| 女人久久www免费人成看片| 午夜激情av网站| 亚洲欧洲国产日韩| 国产精品国产av在线观看| videossex国产| 超色免费av| 免费黄频网站在线观看国产| 观看美女的网站| 大话2 男鬼变身卡| 午夜精品国产一区二区电影| 男女边吃奶边做爰视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 三级国产精品片| 亚洲精品乱久久久久久| 十八禁网站网址无遮挡| 老司机亚洲免费影院| 亚洲精品日韩av片在线观看| 免费人成在线观看视频色| 91久久精品国产一区二区成人| 久久免费观看电影| av黄色大香蕉| 天堂8中文在线网| 在线看a的网站| 中文字幕免费在线视频6| a级毛片免费高清观看在线播放| 久久国产精品大桥未久av| 国产精品一二三区在线看| 日韩大片免费观看网站| 十八禁网站网址无遮挡| 人妻少妇偷人精品九色| 少妇人妻久久综合中文| 欧美+日韩+精品| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 免费人妻精品一区二区三区视频| 欧美精品高潮呻吟av久久| 日本av手机在线免费观看| 大话2 男鬼变身卡| 熟妇人妻不卡中文字幕| 成人影院久久| 中文字幕人妻丝袜制服| 18禁动态无遮挡网站| 激情五月婷婷亚洲| av.在线天堂| 久久久久久久大尺度免费视频| 少妇的逼好多水| 欧美最新免费一区二区三区| 青春草国产在线视频| 精品午夜福利在线看| 五月开心婷婷网| 久久精品国产亚洲网站| 五月玫瑰六月丁香| 成人免费观看视频高清| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲av福利一区| 色94色欧美一区二区| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 精品午夜福利在线看| 久久久国产精品麻豆| 天堂俺去俺来也www色官网| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产成人精品在线电影| 国产亚洲一区二区精品| 少妇的逼好多水| 色网站视频免费| 超碰97精品在线观看| 午夜久久久在线观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 香蕉精品网在线| 国产亚洲最大av| 寂寞人妻少妇视频99o| 老熟女久久久| 观看美女的网站| 一级,二级,三级黄色视频| 国产日韩欧美亚洲二区| 一区二区三区四区激情视频|