• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    大孔樹脂法純化玉竹總皂苷的工藝研究

    2012-10-27 03:07:48王曉林鐘方麗
    食品科學(xué) 2012年18期
    關(guān)鍵詞:玉竹總皂苷大孔

    王曉林,李 珍,鐘方麗*

    (吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院, 吉林 吉林 132022)

    大孔樹脂法純化玉竹總皂苷的工藝研究

    王曉林,李 珍,鐘方麗*

    (吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院, 吉林 吉林 132022)

    目的:篩選出分離、純化玉竹總皂苷的大孔樹脂型號及工藝條件。方法:通過靜態(tài)吸附與解吸實驗確定大孔樹脂的型號。在靜態(tài)吸附與解吸單因素試驗基礎(chǔ)上,利用四因素四水平正交試驗對LSA-33型大孔樹脂純化玉竹總皂苷的工藝進行研究,以總皂苷吸附率、解吸率為指標,確定最佳工藝。結(jié)果:LSA-33型樹脂對玉竹總皂苷具有較好的純化效果,其最佳工藝為:pH6~7的玉竹提取液,樹脂吸附4h,解吸液為體積分數(shù)95%的乙醇,解吸液用量與樹脂質(zhì)量比37.5:1(mL/g),解吸時間為2h時,玉竹浸膏中總皂苷的含量由未純化前的12.28%提高到41.75%。結(jié)論:LSA-33型大孔樹脂可較好地純化玉竹總皂苷,且操作簡單、安全、成本低廉,有較高的應(yīng)用價值。

    玉竹;總皂苷;大孔吸附樹脂; 純化

    玉竹(Rhizoma Polygonati Odorati)為百合科(Liliaceae)植物玉竹的干燥根莖,性平,味甘,具有養(yǎng)陰潤燥、生津止渴的功能,用于熱病口燥咽干、干咳少痰、心煩心悸、糖尿病等[1],廣泛分布于東北、華北、華東及湖北、湖南、廣東等地,喜陰濕環(huán)境,較耐寒,在山區(qū)和平壩都可栽培[2]。從玉竹中已經(jīng)分離鑒定了甾體皂苷、黃酮、生物堿、多糖、甾醇、鞣質(zhì)、黏液質(zhì)和強心苷等多類成分[3],玉竹多糖能夠降低糖尿病小鼠的血糖、血脂水平[4],玉竹總黃酮能清除二苯基苦味肼基(DPPH)自由基,能增強衰老模型小鼠血液中SOD活性,降低肝組織中MDA含量[5]。甾體皂苷是玉竹的活性成分之一,具有降血糖、降血脂、抗菌消炎作用[6]。藥理研究表明,玉竹還有強心、擴張血管、降血壓、抗腫瘤和增強免疫功能等作用[7]。由于玉竹具有藥食兩用功能,在市場上已經(jīng)出現(xiàn)了很多保健食品與保健飲料,如玉竹茶、玉竹面條、玉竹飲料、玉竹果圃等,在我國廣東、廣西及香港、新加坡、東南亞等國家民間還用于煲湯,保健效果良好。已有研究發(fā)現(xiàn),用大孔吸附樹脂富集、純化黃芪、仙茅、人參等總皂苷,效果較理想[8-10],而有關(guān)玉竹總皂苷純化工藝的研究尚未見報道。本實驗針對6種不同型號的大孔樹脂進行了純化玉竹總皂苷的篩選,并通過靜態(tài)實驗對LSA-33型大孔樹脂純化玉竹總皂苷的工藝條件進行優(yōu)化,從而為生產(chǎn)中更有效利用玉竹總皂苷、發(fā)揮其最大經(jīng)濟效益提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    薯蕷皂苷元對照品 中國藥品生物制品檢定所;玉竹 安徽省亳州市華申藥業(yè)有限公司;水為重蒸餾水;大孔樹脂(LSA-21、LSA-10、AB-8、LX-36、D-101、LSA-33) 西安藍曉科技有限公司;無水乙醇、甲醇、硫酸、石油醚等均為分析純。

    1.2 儀器與設(shè)備

    MAS-Ⅱ超聲波提取儀 濟寧金百特電子有限公司;752N型紫外可見分光光度計 上海精密科學(xué)儀器有限公司;RE-52A 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠;SHZD型循環(huán)水真空泵 河南省鞏義市英峪儀器一廠;CS101-AB型電熱鼓風(fēng)干燥箱 中國重慶實驗設(shè)備廠;JY2002型電子天平 上海精密科學(xué)儀器有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 總皂苷含量測定

    1.3.1.1 標準曲線的制備

    精密稱取薯蕷皂苷元對照品1.50mg,置于100mL容量瓶中,加入無水甲醇溶解并定容至刻度,配制成質(zhì)量濃度0.015mg/mL的薯蕷皂苷元對照品溶液。精密量取薯蕷皂苷元對照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0mL分別置于6個10mL具塞試管中,水浴揮干無水甲醇,加入濃硫酸溶液(1mol/L)10.0mL,置于50℃水浴保溫30min,冷卻4min,以相應(yīng)試劑為空白,在410nm波長處測吸光度。以質(zhì)量濃度(C)為橫坐標,吸光度(A)為縱坐標,繪制標準曲線,進行直線回歸[11],得回歸方程:A=0.04199C+0.01078,R=0.9994,表明薯蕷皂苷元在0.75~12.00μg/mL范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

    1.3.1.2 樣品含量測定

    取樣品液、吸附后液及解吸液各適量,置于10mL具塞試管中,按1.3.1.1節(jié)方法,于410nm波長處測定吸光度,以不加供試品的平行樣為空白。從標準曲線上計算出供試品溶液中薯蕷皂苷元的質(zhì)量濃度,供試品中總皂苷的量以薯蕷皂苷元計算。

    1.3.2 大孔吸附樹脂的預(yù)處理

    取大孔吸附樹脂LX-36、LSA-33、LSA-10、D-101、AB-8、LSA-21各50.0g加入柱內(nèi),先以95%乙醇連續(xù)洗滌數(shù)次約2h,至流出液加水(1:5)不混濁為止,后用蒸餾水洗至無醇味,然后用5% HCl溶液浸泡4h后以4~6BV/h的流速洗滌2h,再用蒸餾水洗至中性,最后用2% NaOH溶液浸泡6h后以4~6BV/h洗滌2h,再用蒸餾水洗至中性,抽濾至干,置于密閉容器中,備用[12]。

    1.3.3 玉竹總皂苷樣品液的制備

    稱取干燥玉竹50.0g于250mL圓底燒瓶中,加入50%乙醇溶液150mL超聲提取3次,每次30min,過濾,合并以上3次濾液,蒸干,加入100mL的無水甲醇超聲溶解,然后加入100mL 15%硫酸溶液回流2h,冷卻至室溫,轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,用石油醚萃取3次,每次100mL,合并石油醚萃取液,將石油醚萃取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干,殘渣用90%乙醇溶液溶解,過濾,濾液用90%乙醇溶液定容至250mL容量瓶中,待用。

    1.3.4 大孔吸附樹脂的選擇

    6種大孔吸附樹脂的物理性能見表1。取處理后樹脂LX-36、LSA-33、LSA-10、D-101、AB-8、LSA-21各2.0g,加入到100mL具塞三角瓶中,加入30mL質(zhì)量濃度0.1368mg/mL的玉竹總皂苷溶液[13],每10min振搖1次,約30s,共2h,靜止48h,濾過。分別吸取各樹脂吸附后的溶液1.0mL,在410nm波長處測定吸光度(A),計算各樹脂對玉竹總皂苷的吸附率,將靜態(tài)吸附的樹脂抽濾至干,室溫條件下,加入100mL95%乙醇溶液解吸,每10min振搖1次,約30s,持續(xù)2h,靜置48h,過濾。分別取各解吸液1.0mL,于410 nm處測定吸光度(A),計算各種樹脂對玉竹總皂苷的解吸率。各指標的計算公式如下[14]:

    表1 6種大孔樹脂的物理性能Table 1 Physical properties of 6 types of macroporous adsorption resin

    式中:C0為起始樣品液中總皂苷質(zhì)量濃度/(mg/mL);C1為吸附48h后溶液中總皂苷質(zhì)量濃度/(mg/mL);C2為解吸液中總皂苷質(zhì)量濃度/(mg/mL);V1為樣品液體積/mL;V2為解吸液體積/mL;m1為解吸液干燥后固體的稱樣量/ mg;m2為解吸液中總皂苷的測定量/mg。

    1.3.5 大孔吸附樹脂純化玉竹總皂苷最佳條件的確定

    1.3.5.1 靜態(tài)吸附和解吸單因素試驗

    (1) 吸附時間的確定

    選取LSA-33型大孔樹脂進行操作,操作步驟同1.3.4節(jié)至解吸前步驟,分別振蕩吸附1、2、3、4、5、6、7、8 h,測定溶液中總皂苷質(zhì)量濃度,計算吸附率。

    (2) 解吸液解吸液體積分數(shù)的確定

    選取LSA-33型大孔樹脂進行操作,解吸時乙醇體積為50mL,其余操作步驟同1.3.4節(jié),體積分數(shù)分別為10%、30%、50%、70%、90%,計算解吸率。

    (3) 解吸液乙醇用量的確定

    選取LSA-33型大孔樹脂進行操作,玉竹總皂苷溶液質(zhì)量濃度為0.1365mg/mL,其余操作步驟同1.3.4節(jié),解吸時乙醇體積分別為20、30、40、50、60、70、80mL,過濾后的解吸液分別移取0.5、0.75、1、1.25、1.5、1.75、2mL于7個具塞試管中,測定溶液中總皂苷的質(zhì)量濃度,計算解吸率。

    (4) 解吸時間的確定

    選取LSA-33型大孔樹脂進行操作,玉竹總皂苷溶液質(zhì)量濃度為0.1375mg/mL,其余操作步驟同1.3.4節(jié),解吸時乙醇體積為70mL,解吸時間分別為1、1.5、2、2.5、3 h,計算解吸率。

    (5) 吸附液pH值的確定

    選取LSA-33型大孔樹脂進行操作,玉竹總皂苷溶液質(zhì)量濃度為0.1358mg/mL,其余操作步驟同1.3.4節(jié)至解吸前步驟,分別用5%鹽酸溶液和5% NaOH溶液調(diào)p H值為4、5、6、7、8、9,計算吸附率。

    1.3.5.2 正交試驗

    通過單因素試驗可知,玉竹總皂苷樣品液的pH值為6~7時,吸附率較高且比較穩(wěn)定,在此基礎(chǔ)上,固定玉竹總皂苷樣品液的pH值為6~7,選擇吸附時間、解吸液乙醇體積、解吸液體積分數(shù)、解吸時間為考察因素進入正交試驗進一步優(yōu)化工藝。以解吸率為考察指標,確定大孔樹脂純化玉竹總皂苷的最佳條件。正交試驗因素水平表如表2所示。所有試驗中,每次試驗取用的LSA-33型大孔樹脂為2.0g。

    表2 正交試驗設(shè)計因素水平表Table 2 Factors and their levels for orthogonal array design

    1.3.6 工藝驗證實驗

    選取LSA-33型大孔樹脂進行操作,操作步驟同1.3.4節(jié),玉竹總皂苷溶液質(zhì)量濃度為0.1375mg/mL,調(diào)節(jié)pH值為6~7,解吸時乙醇溶液的體積分數(shù)和體積分別為95%和75mL,計算解吸率。

    1.3.7 浸膏中總皂苷含量的測定

    稱取LSA-33型大孔樹脂6.0g,共稱取3份,分別置于3個干燥250mL三角瓶中,同時分別取90mL供試品溶液(總皂苷質(zhì)量濃度為0.1375mg/mL)于250mL三角瓶內(nèi),振蕩吸附4h,每10min振搖1次,每次振搖30s,分別過濾。然后向過濾后帶有樹脂的3個三角瓶中各加入225mL 95%乙醇溶液,振蕩解吸2h,每10min振搖1次,每次振搖3 0 s,過濾,過濾后的解吸液各取1.0mL于3個具塞試管中,按照1.3.1節(jié)的方法測定溶液中總皂苷的含量。再取90mL總皂苷質(zhì)量濃度為0.1375mg/mL的玉竹總皂苷樣品液、上述解吸液220mL倒入稱質(zhì)量后的蒸發(fā)皿中水浴蒸干,基本蒸干后放入溫度調(diào)為60℃的電熱鼓風(fēng)干燥箱中干燥,待其干燥至恒質(zhì)量后稱質(zhì)量后得差值,得浸膏質(zhì)量,計算總皂苷的純度。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 大孔吸附樹脂的選擇

    6種不同型號的樹脂在相同條件下,經(jīng)過48h靜態(tài)吸附及解吸,分別計算出其對玉竹總皂苷的靜態(tài)吸附率和解吸率,結(jié)果如表3所示。

    從表3可以看出,LSA-33型樹脂的吸附率最高,D-101型樹脂的吸附率最低;從解吸率角度看,D-101型樹脂的解吸率最高,達到了95.27%,但吸附率只有36.07%,解吸率僅低于D-101型樹脂的是LSA-33型樹脂,解吸率達到了83.54%,實驗結(jié)果表明LSA-33型大孔樹脂對玉竹總皂苷的吸附率最高,解吸率也相對較高。故選用LSA-33型大孔樹脂作為進一步實驗所用的樹脂型號。

    表3 6種孔樹脂對玉竹總皂苷的吸附率與解吸率Table 3 Adsorption and desorption rates of 6 macroporous resins for total saponins in Rhizoma Polygonati Odorati

    2.2 單因素試驗

    2.2.1 吸附時間對吸附率的影響

    圖1 吸附時間對吸附率的影響Fig.1 Effect of adsorption time on adsorption rate

    圖1表明,隨著吸附時間的增加,吸附率越大,但到達3h后,增長趨勢趨于平緩,當(dāng)吸附時間為4h時吸附率最大,因此,適宜的吸附時間范圍應(yīng)該為3~5h。為了進一步考察吸附時間對純化效果的影響,選擇吸附時間的因素水平為3.0、3.5、4.0、4.5h進入正交試驗。

    2.2.2 解吸液體積分數(shù)對解吸率的影響

    圖2 解吸液體積分數(shù)對解吸率的影響Fig.2 Effect of ethanol concentration on desorption rate

    隨著解吸液體積分數(shù)的增加,LSA-33型大孔樹脂純化玉竹總皂苷的解吸率呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢,當(dāng)解吸液體積分數(shù)為90%時,解吸率最高,結(jié)果見圖2。為了進一步考察解吸液解吸液體積分數(shù)對純化效果的影響,所以選擇乙醇體積分數(shù)因素水平為80%、85%、90%、95%進入正交試驗。

    2.2.3 解吸液乙醇用量對解吸率的影響

    圖3 解吸液乙醇用量對解吸率的影響Fig.3 Effect of solvent consumption on desorption rate

    圖3表明,隨著解吸液用量的增大,解吸率呈先增大后減小的趨勢,當(dāng)解吸液體積與樹脂質(zhì)量比達到35:1時,解吸率最高,之后略有下降。為了進一步考察解吸液用量對純化效果的影響,選擇解吸液用量/樹脂質(zhì)量(mL/g)因素水平為30、32.5、35、37.5進入正交試驗。

    2.2.4 解吸時間對解吸率的影響

    隨著解吸時間的增加,解吸率越高,當(dāng)?shù)竭_2h時解吸率最大,之后逐步緩慢下降,結(jié)果見圖4。為了進一步考察解吸時間對純化效果的影響,選擇解吸時間的因素水平為1.5、2.0、2.5、3.0h進入正交試驗。

    圖4 解吸時間對解吸率的影響Fig.4 Effect of desorption time on desorption rate

    2.2.5 樣液pH 值對吸附率的影響

    實驗結(jié)果表明,吸附率隨pH值的增大呈現(xiàn)逐漸增大的趨勢,當(dāng)吸附液pH6~7時,吸附率最高,之后吸附率隨pH值的增大明顯下降,所以在實驗中將吸附液的pH值固定在6~7范圍內(nèi)即可,結(jié)果見圖5。

    圖5 樣液pH值對吸附率的影響Fig.5 Effect of initial sample pH on adsorption rate

    2.3 正交試驗

    表4 大孔樹脂純化玉竹總皂苷工藝正交試驗設(shè)計及結(jié)果Table 4 Orthogonal array design protocol and corresponding results

    試驗結(jié)果表明,4個因素對解吸率的影響順序為:解吸液用量與樹脂質(zhì)量比>解吸液體積分數(shù)>吸附時間>解吸時間。大孔樹脂靜態(tài)純化玉竹總皂苷的最佳條件為樣品液pH6~7,吸附時間4h,解吸液體積分數(shù)95%,解吸液體積與樹脂質(zhì)量比為37.5:1,解吸時間2h。

    2.4 工藝驗證實驗

    經(jīng)過上述單因素和正交試驗的考察,得出采用LSA-33型樹脂純化玉竹總皂苷的較佳工藝:樣品液pH值為6~7,吸附時間4h,解吸液體積分數(shù)95%,解吸液用量與樹脂質(zhì)量比為37.5,解吸時間2h。為了考察上述優(yōu)化工藝的穩(wěn)定性,進行了3次驗證實驗,結(jié)果表明3次實驗的吸附率和解吸率分別為50.07%、50.24%、 49.55%和71.38%、71.41%、70.68%,平均吸附率和解吸率分別為49.95%和71.16%,具有較好的重現(xiàn)性。

    2.5 浸膏中總皂苷含量的測定

    按上述優(yōu)化的工藝進行3次實驗,經(jīng)LSA-33型大孔吸附樹脂處理玉竹總皂苷樣品液后,玉竹總皂苷干膏中總皂苷純度由大約12%提高到42%左右,結(jié)果見表5。

    表5 工藝驗證實驗結(jié)果Table 5 Results obtained for experimental validation of optimal purification parameters

    3 結(jié) 論

    本實驗對6種不同型號的大孔吸附樹脂進行了玉竹總皂苷純化實驗,通過對影響大孔吸附樹脂吸附及解吸各種因素的系統(tǒng)研究,初步確定了LSA-33型大孔吸附樹脂分離純化玉竹總皂苷的效果比較理想,其最佳工藝為:樣品液pH值為6~7、吸附時間為4h、解吸液體積分數(shù)95%、解吸液用量與樹脂質(zhì)量比為37.5:1(mL/g)、解吸時間2h。在該條件下,純化產(chǎn)品中總皂苷的純度由原來的12.28%提高到42%左右,樹脂富集倍數(shù)為3倍以上,表明LSA-33型大孔樹脂對玉竹總皂苷具有良好的純化性能,為玉竹總皂苷的工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。

    [1] 劉塔斯, 楊先國, 龔力民, 等. 藥食兩用中藥玉竹的研究進展[J]. 中南藥學(xué), 2008, 6(2): 216-219.

    [2] 吳志新, 周生海, 張利華. 玉竹的栽培與加工[J]. 特種經(jīng)濟動植物, 2004, 7(6): 28.

    [3] 梁海霞, 李煥德. 玉竹的藥理活性研究進展[J]. 中南藥學(xué), 2008, 6 (3): 342-344.

    [4] 季峰, 魏賢勇, 劉廣龍, 等. 玉竹多糖降血糖作用的實驗研究[J]. 江蘇中醫(yī)藥, 2006, 27(9): 70-71.

    [5] 陳地靈, 徐大量, 林輝. 玉竹總黃酮體內(nèi)外抗氧化作用的實驗研究[J]. 今日藥學(xué), 2008, 18(6): 13-14.

    [6] 王琴, 張虹, 王洪泉. 黃精及玉竹中甾體皂甙成分的測定[J]. 中華臨床醫(yī)藥, 2003, 4(2): 75-77.

    [7] 李塵遠, 潘興瑜, 張明策, 等. 玉竹提取物B抗腫瘤機制的初步研究[J]. 中國免疫學(xué)雜志, 2003, 19(4): 253-254.

    [8] 吳紅, 梁恒, 吳道澄, 等. 大孔吸附樹脂法分離純化山茱萸總皂苷[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報, 2003, 24(8): 689-692.

    [9] 張梅, 宋芹, 張洪彬. 大孔樹脂富集、純化仙茅總皂苷[J]. 華西藥學(xué)雜志, 2005, 20(4): 295-298.

    [10] 石忠峰, 陳蔚文, 李衛(wèi)民, 等. 大孔吸附樹脂純化黃芪總皂苷的研究[J]. 中草藥, 2005, 36(9): 1322-1325.

    [11] 王曉林, 于麗穎, 辛建娟. 微波輔助提取玉竹總皂苷工藝條件優(yōu)化[J]. 食品科學(xué), 2011, 32(8): 147-150.

    [12] 白奪龍, 楊開華. 大孔吸附樹脂分離純化技術(shù)及應(yīng)用[J]. 海峽藥學(xué), 2007, 19(9): 96-99.

    [13] 唐巧玉, 周毅, 閻婷. HPD300大孔樹脂純化金橘皮黃酮類化合物的工藝研究[J]. 食品科學(xué), 2008, 29(8): 355-358.

    [14] 陳順, 關(guān)延彬. 大孔樹脂吸附骨碎補總黃酮特性的研究[J]. 中國中藥雜志, 2007, 32(8): 750-753.

    Purification of Total Saponins fromRhizoma Polygonati Odoratiby Macroporous Resin Adsorption

    WANG Xiao-lin,LI Zhen,ZHONG Fang-li*
    (School of Chemistry and Pharmaceutical Engineering, Jilin Institute of Chemical Technology, Jilin 132022, China)

    Objectives: To find out the best type of macroporous resin and determine the optimal process conditions for separation and purification of total saponins fromRhizoma Polygonati Odorati. Methods: The best type of macroporous adsorption resin for total saponins was determined by static adsorption and desorption experiments. Based on one-factor-at-atime experiments, a four-factor, three-level orthogonal array design was employed for the optimization of four process parameters for improved adsorption and desorption rates. Results: LSA-33 macroporous resin was found to be the best resin among 6 types of macroporous resin tested. The best purification conditions for total saponins were determined as follows: crude extract fromRhizoma Polygonati Odorati(pH 6-7) was adsorbed for 4 h and then desorbed with 95% ethanol at a solvent-tosolid ratio of 37.5:1 (mL/g) for 2 h. As a result, the content of total saponins in the crude extract was increased to 41.75% from 12.28%. Conclusion: LSA-33 macroporous resin is effective in purifying total saponins fromRhizoma Polygonati Odoratiwith the advantages of easy operation, high safety and low cost and thus will have high application value.

    Rhizoma Polygonati Odorati;total saponins;macroporous resin;purification

    R283.2

    A

    1002-6630(2012)18-0083-05

    2011-08-04

    王曉林(1969—),男,副教授,碩士,主要從事天然產(chǎn)物有效成分的提取及純化工藝研究。E-mail:wangxiaolin69@eyou.com

    *通信作者:鐘方麗(1970—),女,教授,博士,主要從事食品及天然藥物研究。E-mail:fanglizhong@sina.com

    猜你喜歡
    玉竹總皂苷大孔
    三七總皂苷調(diào)節(jié)PDGF-BB/PDGFR-β的表達促進大鼠淺表Ⅱ°燒傷創(chuàng)面愈合
    大孔ZIF-67及其超薄衍生物的光催化CO2還原研究
    養(yǎng)陰潤燥話玉竹
    編竹簍
    大孔鏜刀的設(shè)計
    三七總皂苷緩釋片處方的優(yōu)化
    中成藥(2018年6期)2018-07-11 03:01:10
    三七總皂苷膠束狀態(tài)與超濾分離的相關(guān)性
    中成藥(2017年8期)2017-11-22 03:18:44
    HPLC-ESI-MS法在西洋參總皂苷提取工藝研究中的應(yīng)用
    玉竹的化學(xué)成分研究
    玉竹
    91久久精品电影网| 亚洲av.av天堂| 国产精品久久久久久久电影| 久久这里有精品视频免费| 美女视频免费永久观看网站| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲av.av天堂| 三级国产精品欧美在线观看| 久久av网站| 日本91视频免费播放| 国产精品一二三区在线看| 国产精品久久久久成人av| av福利片在线| 寂寞人妻少妇视频99o| av在线老鸭窝| 丝袜在线中文字幕| 国内精品宾馆在线| 嫩草影院新地址| 最近最新中文字幕免费大全7| 人人妻人人澡人人看| 最黄视频免费看| 91aial.com中文字幕在线观看| 黄色欧美视频在线观看| 内射极品少妇av片p| 国产免费福利视频在线观看| 午夜福利网站1000一区二区三区| 2022亚洲国产成人精品| 日韩中字成人| 午夜激情久久久久久久| 久久6这里有精品| 在线 av 中文字幕| 免费观看的影片在线观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产精品伦人一区二区| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产91av在线免费观看| 美女福利国产在线| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 狂野欧美激情性bbbbbb| 一本大道久久a久久精品| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 2018国产大陆天天弄谢| 日韩中字成人| 国产亚洲5aaaaa淫片| 高清午夜精品一区二区三区| 亚洲国产日韩一区二区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 寂寞人妻少妇视频99o| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 91成人精品电影| 精品久久久噜噜| 日韩在线高清观看一区二区三区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 免费少妇av软件| av黄色大香蕉| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲人与动物交配视频| 精品久久久精品久久久| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 五月玫瑰六月丁香| 日本wwww免费看| 国产真实伦视频高清在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| av.在线天堂| 精品酒店卫生间| 日韩成人伦理影院| 一级毛片aaaaaa免费看小| 老熟女久久久| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产精品久久久久成人av| 热re99久久国产66热| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲av福利一区| 成人国产av品久久久| 亚洲国产成人一精品久久久| 黄色视频在线播放观看不卡| 精品国产国语对白av| 91精品国产国语对白视频| 亚洲色图综合在线观看| 搡老乐熟女国产| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 老熟女久久久| 欧美 日韩 精品 国产| 国产亚洲一区二区精品| 国产 精品1| 一本一本综合久久| 一区二区三区免费毛片| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| av国产久精品久网站免费入址| videossex国产| 日日摸夜夜添夜夜爱| 黄色毛片三级朝国网站 | 精品人妻一区二区三区麻豆| 纯流量卡能插随身wifi吗| 亚洲国产成人一精品久久久| 中文字幕免费在线视频6| 国产精品蜜桃在线观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 熟女人妻精品中文字幕| 女性被躁到高潮视频| 日本欧美国产在线视频| 美女cb高潮喷水在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 久久鲁丝午夜福利片| 国产精品不卡视频一区二区| 人妻 亚洲 视频| 久久这里有精品视频免费| 一级毛片aaaaaa免费看小| 日韩一区二区视频免费看| h视频一区二区三区| 免费人成在线观看视频色| 丝袜喷水一区| 美女中出高潮动态图| 午夜影院在线不卡| 国产高清三级在线| av黄色大香蕉| 十八禁高潮呻吟视频 | 亚洲精品亚洲一区二区| 交换朋友夫妻互换小说| av网站免费在线观看视频| 91久久精品电影网| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲经典国产精华液单| 99视频精品全部免费 在线| 插逼视频在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 亚洲av日韩在线播放| 男人舔奶头视频| 婷婷色麻豆天堂久久| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 成人国产av品久久久| 亚洲精品视频女| 熟女电影av网| 伊人亚洲综合成人网| 哪个播放器可以免费观看大片| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 最黄视频免费看| 亚洲综合色惰| av一本久久久久| 校园人妻丝袜中文字幕| 91精品伊人久久大香线蕉| 精品一区二区三区视频在线| 啦啦啦啦在线视频资源| 超碰97精品在线观看| 韩国av在线不卡| 99热6这里只有精品| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 在线观看免费视频网站a站| 国产欧美日韩精品一区二区| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 国产毛片在线视频| 亚洲欧美日韩东京热| 国产高清不卡午夜福利| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产免费一级a男人的天堂| av在线观看视频网站免费| 国产一区二区在线观看av| 丰满人妻一区二区三区视频av| 一边亲一边摸免费视频| 国产综合精华液| 国产 精品1| 青春草国产在线视频| 婷婷色av中文字幕| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 久久毛片免费看一区二区三区| 内射极品少妇av片p| 免费av不卡在线播放| 高清黄色对白视频在线免费看 | 一级毛片 在线播放| 各种免费的搞黄视频| 亚洲怡红院男人天堂| 大码成人一级视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 在线观看av片永久免费下载| 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲熟女精品中文字幕| 五月玫瑰六月丁香| 久久影院123| 国产成人免费无遮挡视频| 我要看黄色一级片免费的| 另类精品久久| 国产成人精品一,二区| 欧美激情国产日韩精品一区| 欧美最新免费一区二区三区| 欧美三级亚洲精品| 久久久午夜欧美精品| 国内揄拍国产精品人妻在线| 少妇人妻久久综合中文| 日韩大片免费观看网站| 18禁在线播放成人免费| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 午夜福利影视在线免费观看| 久久精品夜色国产| 涩涩av久久男人的天堂| 国产成人一区二区在线| 免费观看在线日韩| 国产精品福利在线免费观看| 99热网站在线观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 黄色怎么调成土黄色| 久久影院123| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲欧美一区二区三区国产| 中文字幕制服av| 国产精品不卡视频一区二区| 国产成人精品无人区| 亚洲精品亚洲一区二区| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 国产真实伦视频高清在线观看| 亚州av有码| 91久久精品国产一区二区成人| 国产精品久久久久久精品电影小说| 欧美日韩亚洲高清精品| 三上悠亚av全集在线观看 | 成人黄色视频免费在线看| 七月丁香在线播放| 久久午夜综合久久蜜桃| 人妻人人澡人人爽人人| 韩国高清视频一区二区三区| 日日啪夜夜爽| 久热这里只有精品99| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲欧美精品自产自拍| 一区二区三区精品91| 最新中文字幕久久久久| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲内射少妇av| 色视频在线一区二区三区| 性色avwww在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| a级毛色黄片| 伊人久久国产一区二区| 中文资源天堂在线| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 少妇被粗大猛烈的视频| 成人国产av品久久久| 久久久久久久久久人人人人人人| 黄色日韩在线| 精品亚洲成国产av| av黄色大香蕉| 日韩成人伦理影院| 曰老女人黄片| 男人和女人高潮做爰伦理| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲av在线观看美女高潮| 另类亚洲欧美激情| 熟女电影av网| 日韩中字成人| 综合色丁香网| 熟女人妻精品中文字幕| av在线老鸭窝| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日本午夜av视频| 成年女人在线观看亚洲视频| 欧美+日韩+精品| 欧美日韩在线观看h| 国产成人精品婷婷| 卡戴珊不雅视频在线播放| 天堂俺去俺来也www色官网| h视频一区二区三区| 欧美三级亚洲精品| 99久久精品热视频| 亚洲情色 制服丝袜| 日本欧美国产在线视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲中文av在线| 一区二区av电影网| 午夜免费鲁丝| 大香蕉97超碰在线| av黄色大香蕉| 在线精品无人区一区二区三| 男人舔奶头视频| 国产综合精华液| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲av成人精品一二三区| 一级二级三级毛片免费看| 国产精品一二三区在线看| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲美女黄色视频免费看| 久久精品久久精品一区二区三区| 欧美丝袜亚洲另类| 免费看光身美女| 亚洲国产av新网站| 人妻人人澡人人爽人人| 久久久精品免费免费高清| av播播在线观看一区| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 国产片特级美女逼逼视频| 久久av网站| 国产真实伦视频高清在线观看| av国产精品久久久久影院| 男人添女人高潮全过程视频| 成人毛片60女人毛片免费| 成人特级av手机在线观看| 国产精品一二三区在线看| 麻豆成人av视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲av不卡在线观看| 少妇的逼水好多| 精品国产一区二区久久| 狂野欧美激情性bbbbbb| 久久久国产精品麻豆| 一级片'在线观看视频| 天堂俺去俺来也www色官网| 夫妻性生交免费视频一级片| 日韩精品有码人妻一区| 日本av手机在线免费观看| 亚洲精品国产av蜜桃| 丝袜在线中文字幕| 久久女婷五月综合色啪小说| 26uuu在线亚洲综合色| 午夜91福利影院| 观看免费一级毛片| 免费高清在线观看视频在线观看| 免费大片18禁| 老熟女久久久| 中文欧美无线码| 免费在线观看成人毛片| 欧美区成人在线视频| 日本av手机在线免费观看| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产亚洲欧美精品永久| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲国产精品国产精品| 日韩制服骚丝袜av| 内地一区二区视频在线| av免费观看日本| 男人狂女人下面高潮的视频| 最新的欧美精品一区二区| 最近的中文字幕免费完整| av有码第一页| 91久久精品国产一区二区成人| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲国产精品一区三区| 国产色婷婷99| 日本wwww免费看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 久久国内精品自在自线图片| 国产高清不卡午夜福利| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产在线免费精品| 久久99热这里只频精品6学生| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国国产精品蜜臀av免费| 久久狼人影院| 精品久久久久久久久av| 午夜影院在线不卡| 精品午夜福利在线看| 久久精品国产a三级三级三级| 一区二区av电影网| 欧美日韩亚洲高清精品| av福利片在线| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲天堂av无毛| 乱系列少妇在线播放| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产免费福利视频在线观看| 下体分泌物呈黄色| 免费观看av网站的网址| 国产淫片久久久久久久久| av福利片在线观看| 国产伦在线观看视频一区| 啦啦啦在线观看免费高清www| 久久精品国产亚洲av天美| 国内揄拍国产精品人妻在线| 久久久久久久大尺度免费视频| 制服丝袜香蕉在线| 一本一本综合久久| 亚洲精品一二三| www.色视频.com| 精品人妻熟女av久视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 又大又黄又爽视频免费| 亚洲av免费高清在线观看| 精品一区二区三卡| 国产精品成人在线| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日韩欧美一区视频在线观看 | 人妻夜夜爽99麻豆av| 又大又黄又爽视频免费| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 久久久久国产精品人妻一区二区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 免费高清在线观看视频在线观看| 国产视频首页在线观看| 久久人人爽人人片av| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 这个男人来自地球电影免费观看 | av线在线观看网站| 国产精品国产av在线观看| 观看av在线不卡| 婷婷色综合www| 久久狼人影院| 交换朋友夫妻互换小说| 成人漫画全彩无遮挡| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲欧美一区二区三区国产| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 插逼视频在线观看| 亚洲真实伦在线观看| 精品久久久久久久久av| 久热久热在线精品观看| 欧美最新免费一区二区三区| av免费在线看不卡| 国模一区二区三区四区视频| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲人成网站在线观看播放| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 日本av免费视频播放| 热re99久久国产66热| 欧美成人精品欧美一级黄| 日韩成人伦理影院| 亚洲伊人久久精品综合| 好男人视频免费观看在线| 日本欧美视频一区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| av天堂久久9| 韩国av在线不卡| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 深夜a级毛片| 日本爱情动作片www.在线观看| 中文字幕免费在线视频6| 国产在线免费精品| 日韩中字成人| 一本久久精品| 一个人免费看片子| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 寂寞人妻少妇视频99o| 久久久国产一区二区| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 春色校园在线视频观看| 国产在视频线精品| 中文字幕免费在线视频6| 波野结衣二区三区在线| xxx大片免费视频| 美女视频免费永久观看网站| 国产欧美亚洲国产| 婷婷色综合大香蕉| 天美传媒精品一区二区| 亚洲不卡免费看| 男的添女的下面高潮视频| 18禁在线播放成人免费| 丁香六月天网| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产免费视频播放在线视频| 又爽又黄a免费视频| 久久国产精品大桥未久av | 春色校园在线视频观看| av专区在线播放| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 成人特级av手机在线观看| 99热全是精品| 亚洲性久久影院| av免费在线看不卡| 日韩亚洲欧美综合| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 69精品国产乱码久久久| 在线观看美女被高潮喷水网站| 欧美成人精品欧美一级黄| 女人久久www免费人成看片| 夫妻午夜视频| 免费黄网站久久成人精品| 国产精品国产三级专区第一集| 一区二区三区四区激情视频| 在线观看人妻少妇| 亚洲av欧美aⅴ国产| 日韩欧美精品免费久久| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 高清av免费在线| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲精品一二三| 99热网站在线观看| 久久久久精品性色| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产男人的电影天堂91| 久久99热6这里只有精品| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 午夜久久久在线观看| 少妇熟女欧美另类| 高清午夜精品一区二区三区| 日韩中文字幕视频在线看片| 久热久热在线精品观看| 免费观看av网站的网址| 亚洲国产欧美在线一区| 性色av一级| 日本黄大片高清| 美女福利国产在线| 亚洲在久久综合| 精品久久久久久久久av| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲av中文av极速乱| 激情五月婷婷亚洲| 国产成人精品一,二区| 日本与韩国留学比较| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 两个人免费观看高清视频 | 十分钟在线观看高清视频www | 久久久久久久大尺度免费视频| 夜夜爽夜夜爽视频| 精品一品国产午夜福利视频| 日韩制服骚丝袜av| 简卡轻食公司| 高清午夜精品一区二区三区| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 国产精品偷伦视频观看了| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产高清三级在线| 观看av在线不卡| 国产精品嫩草影院av在线观看| 色5月婷婷丁香| 亚洲美女视频黄频| 妹子高潮喷水视频| 国产黄片美女视频| 一级毛片久久久久久久久女| 久久精品国产亚洲av天美| 在线观看免费日韩欧美大片 | 大码成人一级视频| 久久99热6这里只有精品| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 亚洲综合精品二区| 99精国产麻豆久久婷婷| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 成人综合一区亚洲| 日韩中字成人| 黄色视频在线播放观看不卡| 亚洲在久久综合| 九色成人免费人妻av| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 交换朋友夫妻互换小说| 国内精品宾馆在线| 国产精品.久久久| 嫩草影院新地址| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 免费看av在线观看网站| 高清黄色对白视频在线免费看 | 国产伦精品一区二区三区四那| 啦啦啦在线观看免费高清www| 久久久久久久国产电影| 国产一区二区三区av在线| 国产成人aa在线观看| 在线看a的网站| 91精品伊人久久大香线蕉| 女人久久www免费人成看片| 9色porny在线观看| 赤兔流量卡办理| 亚洲精品色激情综合| 91成人精品电影| 亚洲美女视频黄频| 亚洲人成网站在线播| 国产 一区精品| 欧美成人精品欧美一级黄| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 亚洲综合精品二区| 欧美最新免费一区二区三区| 久久6这里有精品| 十八禁高潮呻吟视频 | 永久网站在线| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日韩成人伦理影院| 久久久久久伊人网av| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 最近2019中文字幕mv第一页| 久久久久久久久久人人人人人人| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 天美传媒精品一区二区| 精品一区二区三卡| 日韩三级伦理在线观看| 国产91av在线免费观看| 在线观看免费日韩欧美大片 | 亚洲伊人久久精品综合| 中文字幕制服av| 日日啪夜夜撸| 国产 精品1| 我的老师免费观看完整版| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 午夜日本视频在线| 久久精品国产亚洲网站| 大陆偷拍与自拍| 我要看黄色一级片免费的| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 国产精品久久久久久av不卡| 看十八女毛片水多多多| 免费观看性生交大片5| 亚洲国产毛片av蜜桃av| www.色视频.com| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 我的女老师完整版在线观看| av在线老鸭窝| 国产成人91sexporn| 日本欧美视频一区| 国产亚洲欧美精品永久| 赤兔流量卡办理|