布洛芬注射液細菌內(nèi)毒素檢查法標準的制訂

王靜靜，高天勤

(濱州醫(yī)學院附屬醫(yī)院，山東 濱州256603)

布洛芬是一種療效確切、不良反應(yīng)小、安全性高的非甾體解熱鎮(zhèn)痛藥，臨床主要用于治療感冒發(fā)熱、頭痛、牙痛、風濕及類風濕性關(guān)節(jié)炎以及外科手術(shù)后的疼痛等［1］。布洛芬注射液是新近開發(fā)的劑型，進一步擴大了其臨床范圍，方便了患者。筆者參照《中國藥典》2010年版進行試驗，建立了該品種的細菌內(nèi)毒素檢查法，現(xiàn)報告如下［2］。

1 實驗材料

布洛芬注射液，規(guī)格 400 mg(4 mL)，批號 111021、111022、11023為山東某公司生產(chǎn)。細菌內(nèi)毒素工作標準品，批號150601－201070，效價140 EU/支(中國藥品生物制品檢定所)。鱟試劑(TAL)批號:1102240(湛江博康海洋生物有限公司，規(guī)格:0.1 mL/支);批號1103172(湛江安度斯生物有限公司，0.1 mL/支)。靈敏度(λ)均為 0.25 EU·mL－1，且經(jīng)靈敏度復(fù)核均符合規(guī)定。細菌內(nèi)毒素檢查用水(BET 水)批號w2010－1，內(nèi)毒素含量≤0.015 EU·mL－1(中國藥品生物物品檢定所)。

2 方法與結(jié)果［3］

2.1 細菌內(nèi)毒素限值(L)的確定 布洛芬注射液的臨床使用最高劑量為每6 h靜脈滴注400～800 mg，滴注時間30 min以上，按我國成人體重60 kg計算，每公斤體重每小時的最大用藥量(M)為13.33 mg·(kg·h)－1。根據(jù)公式 L=K/M，注射劑 K=5 EU·(kg·h)－1，計算得 L=0.375 EU·mg－1，即本品的內(nèi)毒素限值為每1 mg中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于0.375 EU。

2.2 干擾試驗

2.2.1 供試品干擾預(yù)試驗 按藥品說明書要求，市售鱟試劑(TAL)通常為 0.5 ～0.03 EU·mL－1，根據(jù)公式 MVD=CL/λ，則布洛芬注射液的最終對應(yīng)有效稀釋倍數(shù)為75、150、300、600和1 200。先用BET水將供試品稀釋成上述倍數(shù)的系列濃度，分別用上述兩個廠家的鱟試劑考察上述濃度稀釋液的干擾情況，每一濃度做2管，同時做陰性對照和標準對照，結(jié)果見表1。由表1可知，供試品在稀釋75、150、300、600和1 200倍濃度下對試驗均沒有干擾作用。

表1 布洛芬注射液干擾預(yù)試驗結(jié)果

2.3.2 供試品干擾試驗 為了最終確認是否存在干擾因素的影響，取布洛芬注射液用細菌內(nèi)毒素檢查用水分別稀釋，使其最終干擾試驗稀釋倍數(shù)為75倍，按《中國藥典》2010年版(二部)附錄中的“內(nèi)毒素檢查供試品干擾試驗”項進行試驗，結(jié)果見表2。

干擾試驗結(jié)果表明，采用安度斯公司和博康海洋公司生產(chǎn)的 TAL，Et和 Es均在0.5～2.0λ 范圍內(nèi)，確認這2個廠家的TAL在供試品稀釋75倍無干擾影響。

表2 布洛芬注射液細菌內(nèi)毒素干擾試驗結(jié)果

2.5 供試品檢查試驗 取供試品，按《中國藥典》2010年版(二部)附錄ⅪE細菌內(nèi)毒素檢查法分別用兩個廠家的鱟試劑考察其內(nèi)毒素限值，結(jié)果見表3。由表3可知，三批供試品每1 mL中含內(nèi)毒素量均小于0.375 EU。

表3 布洛芬注射液細菌內(nèi)毒素檢查試驗結(jié)果

3 討論

布洛芬是20世紀60年代上市的現(xiàn)今臨床使用最普遍的非甾體抗炎藥之一，國內(nèi)外藥典均有收載，布洛芬良好的解熱鎮(zhèn)痛效果帶動了眾多劑型的開發(fā)上市，但多為口服劑型和局部給藥劑型。布洛芬注射劑的研制，是眾多疼痛和發(fā)熱患者的福音。

眾所周知，引起熱原反應(yīng)是注射液常見的問題之一。因此，檢查注射液中的熱原質(zhì)是確保藥品質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。目前，常見的檢查方法為家兔法和鱟試劑法。布洛芬注射液具有解熱鎮(zhèn)痛作用，若采用家兔法進行熱原質(zhì)的檢查可能會因其藥效學作用而出現(xiàn)假陰性結(jié)果［3］。鱟試劑因其具有方法簡單、成本低等優(yōu)點而被廣泛采用［4］。本試驗在參考《中國藥典》2010年版的基礎(chǔ)上，建立了布洛芬注射液的細菌內(nèi)毒素檢查標準為:取本品，依法檢查(《中國藥典》2010年版二部附錄Ⅺ E)，每1 mg中含內(nèi)毒素量應(yīng)小于0.375 EU。

［1］徐雋，宋紅萍，劉忠，等.布洛芬注射液的安全性試驗［J］，中國醫(yī)院藥學雜志，2011，31(13):1093 －1095.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(二部)［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄Ⅺ E.

［3］程春雷，高天勤，曹珍艷.注射用鹽酸丙帕他莫的細菌內(nèi)毒素檢查［J］.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2011，42(3):219－221.

［4］范治云，國明.眼用平衡鹽溶液細菌內(nèi)毒素檢查標準的制訂［J］.齊魯藥事，2012，31(8):454 －455.