• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉與轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉荒地的生存競爭能力

    2012-10-12 08:14:06張興華田紹仁張?zhí)煊?/span>喬艷艷
    生物安全學(xué)報 2012年2期
    關(guān)鍵詞:吐絮覆蓋度出苗率

    張興華,田紹仁,張?zhí)煊瘢?捷,喬艷艷

    江西省棉花研究所,江西九江332105

    蘇云金芽孢桿菌Bacillus thuringiensis δ-內(nèi)毒素晶體蛋白基因簡稱 Bt基因(Crickmore et al.,1998),是世界上應(yīng)用最廣泛的生物殺蟲劑(關(guān)雄,2006)。據(jù)統(tǒng)計,已報道的 Bt基因有60種以上。根據(jù)它們的殺蟲范圍和基因序列差異,可大致分為6 類,即 cry1、cry2、cry3、cry4、cry5、cryt。每一類中又包含不同的亞類,前5類稱為晶體蛋白基因家族,第6類稱為細胞外溶性晶體蛋白基因(張洪瑞等,2008)。1981年Shnepf&Witeleg首次從蘇云金芽孢桿菌中分離并克隆了Bt基因,美國孟山都公司將Bt基因經(jīng)過啟動子改造后轉(zhuǎn)入棉花中,于1995年獲得了2種轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉NUCOTN33B和NUCOTN35B(謝德意,2001)。我國于1990年從蘇云金芽孢桿菌亞種aizawai7-29和KurstakiHD-1中分離克隆了Bt基因(謝道昕和范云六,1991);后對其進行改造并獲得具有自主知識產(chǎn)權(quán)的抗蟲性極強的 Bt基因[GFM cry1A BT基因(cry1Ab、cry1Ac)](郭三堆,1993;郭三堆等,1993),且由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物工程中心、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所等單位將改造的Bt基因轉(zhuǎn)入國產(chǎn)棉花品種中,于1994年成功獲得了第一批國產(chǎn)轉(zhuǎn)單價Bt基因抗蟲棉(張銳等,2007)。1998年孟山都公司將腈水解酶基因BXN與Bt基因同時轉(zhuǎn)入一個棉花中,獲得既抗蟲又抗溴苯腈除草劑的棉花品種(馮堅,2006)。

    近幾年,我國又推出了轉(zhuǎn)雙價Bt和豇豆胰蛋白酶抑制抗蟲基因(cry1Ac+CPTI)棉(Wu&Guo,2005)、轉(zhuǎn)雙價雙Bt抗蟲基因(cry1Ac+cry2Ab)棉(雒珺瑜等,2011)、轉(zhuǎn)雙價抗蟲和抗除草劑基因(cry1Ac+EPSPS)棉、轉(zhuǎn)雙價抗病基因(Chi+Glu)棉等新品種。對于這些新的轉(zhuǎn)基因棉花品種,必須在推廣種植前進行環(huán)境安全風(fēng)險評估。我國僅在2007年公布了1項技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),即農(nóng)業(yè)部953號公告-12-2007(以下簡稱953號公告)。但該標(biāo)準(zhǔn)僅適用于轉(zhuǎn)單價Bt基因抗蟲棉,一些新的轉(zhuǎn)雙價復(fù)合基因棉仍缺乏環(huán)境安全評價技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。為此,中華人民共和國農(nóng)業(yè)部從“十一五”起開始設(shè)立環(huán)境安全評價技術(shù)研究專項。本文對轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉與轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉荒地的生存競爭能力進行研究,以期為轉(zhuǎn)雙價雙Bt抗蟲基因棉和轉(zhuǎn)雙價抗蟲、抗除草劑基因棉環(huán)境安全評價技術(shù)的建立提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    試驗品種:轉(zhuǎn)雙價雙Bt抗蟲基因(cry1Ac+cry2Ab)棉,轉(zhuǎn)雙價抗蟲、抗除草劑基因(cry1Ac+EPSPS)棉均由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所提供;對照品種:非轉(zhuǎn)基因常規(guī)棉——贛棉11號為江西省棉花研究所研制品種。

    1.2 方法

    1.2.1 試驗設(shè)計 試驗地設(shè)在江西省棉花研究所內(nèi),面積40 m×6 m。試驗品種和對照品種各設(shè)4個重復(fù),隨機排列,每個重復(fù)的小區(qū)面積為3 m×2 m,播40粒棉種,分地表撒播和3 cm深度點播2種方式。播種后不進行任何栽培管理。

    1.2.2 調(diào)查內(nèi)容 試驗期間調(diào)查優(yōu)勢雜草種類、高度和覆蓋度(目測各種雜草占小區(qū)的比例),棉花出苗數(shù)、株高、生育進程(蕾、鈴、吐絮)、吐絮瓣數(shù)、吐絮瓣脫落率、自生苗等指標(biāo)。

    1.2.3 調(diào)查時間 于2011年5月4日播種前調(diào)查各小區(qū)雜草種類、高度和覆蓋度,6月5日播種后30 d開始第1次調(diào)查,以后每隔1個月調(diào)查1次,至11月上旬結(jié)束。2012年3月底進行第2次吐絮棉瓣脫落率和自生苗調(diào)查。

    1.2.4 數(shù)據(jù)處理 將試驗數(shù)據(jù)進行方差分析、LSD最小顯著性極差檢驗。其中,由于吐絮瓣數(shù)和絮瓣脫落率各有1~2個小區(qū)數(shù)據(jù)為0,無法進行生物統(tǒng)計上的差異顯著性分析。鑒于此,作者應(yīng)用普通方法進行統(tǒng)計,自定差異顯著性標(biāo)準(zhǔn):<5%為差異不顯著,5% ~10%為差異顯著,>10%為差異極顯著。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 地表撒播競爭能力表現(xiàn)

    2.1.1 播種前雜草情況 播種前,試驗地雜草平均覆蓋度95.4%,平均高度10~70 cm。其中,優(yōu)勢雜草5種:野麥Avena fatua L.、南苜蓿Medicago hispida Gaertn.、野芹菜 Sanicula lamelligera Hance、風(fēng)花菜Rorippaislandica(Oed.)Borb.、豬殃殃 Galium aparine L.var.tenerum(Gren.Et Godr.)Rcbb.;非優(yōu)勢雜草4種:野老鸛草Geranium carolinianum L.、一年蓬 Erigeron annuus(L.)Pers.、刺兒菜 Cephalanoplos segetum(Bge.)Kitam.、小飛蓬 Conyza canadensis(L.)Cronq.;其他雜草數(shù)量稀少(表1)。

    表1 播種前雜草種類、高度及覆蓋度Table 1 The species,height and coverage of weed before sowing

    2.1.2 出苗競爭力 6月 5日和 7月5日:轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉各小區(qū)雜草平均高度分別為50.0 和57.5 cm,平均覆蓋度分別為 88.8%和 97.5%(表2),平均出苗率分別為 2.5% 和 6.9%(表 3);轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉各小區(qū)雜草平均高度分別為47.5 和50.0 cm,平均覆蓋度分別為87.5%和91.3%(表2),平均出苗率分別為 2.5% 和 5.0%(表 3)。以上指標(biāo)與對照相比差異均不顯著。這表明轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉和轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉在6~7月出苗率競爭優(yōu)勢均較小,棉苗被雜草覆蓋。

    8月5日和9月5日:轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉各小區(qū)雜草平均高度分別為150.0和167.5 cm,平均覆蓋度均為100%(表2),平均出苗率分別為9.4%和10.6%(表3);轉(zhuǎn) cry1Ac+EPSPS 基因棉各小區(qū)雜草平均高度分別為150和175.0 cm,平均覆蓋度均為100%(表2),平均出苗率分別為5.6%和7.5%(表3)。以上指標(biāo)中,僅9月5日的轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉平均出苗率與對照相比差異顯著,其余均不顯著。

    出苗競爭力方面雜草化風(fēng)險評估:(1)直到9月份,轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉出苗率與對照相比才表現(xiàn)出顯著的競爭優(yōu)勢,此時已是棉花生長末期,失去了成熟的機會,不能繁殖傳代,因此不具有雜草化風(fēng)險;(2)轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉出苗率與對照相比始終無顯著的競爭優(yōu)勢,也不具有雜草化風(fēng)險。

    表2 2種播種方式下小區(qū)雜草高度及覆蓋度Table 2 The height and coverage of weed in each district by two sowing methods

    表3 2種播種方式下轉(zhuǎn)基因棉的出苗率、株高及生育進程Table 3 The seedling emergence,height and growing process of transgenic cotton by two sowing methods

    2.1.3 株高競爭力 在7~11月5個調(diào)查日中,轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉平均株高分別為15.00、21.33、36.78、36.80 和 36.85 cm,轉(zhuǎn) cry1Ac+EPSPS基因棉平均株高分別為 13.75、19.95、28.05、28.13 和29.38 cm,與對照相比差異均不顯著(表3)。這表明在整個生長期,轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉和轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉與對照相比,株高競爭優(yōu)勢均較弱;與同期雜草(表2)相比,株高也處于劣勢,出苗稀少,一直處于雜草的覆蓋下,生長上無競爭力。由此可見,這2種轉(zhuǎn)基因棉在株高競爭力方面均無雜草化風(fēng)險。

    2.1.4 生育進程競爭力 轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉吐絮比對照快1個月(表3),顯示出生育進程競爭優(yōu)勢,具有一定的雜草化風(fēng)險;轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉成鈴比對照慢2個月(表3),在生育進程上無競爭力,且在生長期內(nèi),成鈴未進入吐絮期由此喪失絮棉種子繁殖的機會,從而在棉生育進程競爭力上不具有雜草化風(fēng)險。

    2.1.5 吐絮瓣和絮瓣脫落競爭力 2011年11月5日,轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉和轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉平均吐絮瓣數(shù)分別為1.5和0個,與對照相比差異均不顯著;絮瓣脫落率與對照均為0。2012年3月28日,2種轉(zhuǎn)基因棉的平均吐絮瓣數(shù)分別為8.0和0個,與對照相比差異也不顯著;絮瓣脫落率與對照均為0(表4)。這表明轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉和轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉吐絮瓣競爭優(yōu)勢均不顯著,且吐絮的棉瓣不能脫落,喪失了繁殖機會,因此都不具有雜草化風(fēng)險。

    表4 2種播種方式下棉吐絮瓣數(shù)和絮瓣脫落率Table 4 The number of cotton boll opening valve and the floc valve dropping rate of cotton by two sowing methods

    2.1.6 自生苗 2012年3月 28日,轉(zhuǎn) cry1Ac+cry2Ab基因棉、轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉和對照各小區(qū)均無自生苗,這是由于三者吐絮棉瓣中的棉籽(種子)均為不成熟的空殼。因此,這2種轉(zhuǎn)基因棉無自生苗上的雜草化風(fēng)險。

    2.2 3cm深度播種競爭能力表現(xiàn)

    2.2.1 播種前雜草情況 播種前,試驗地雜草平均覆蓋度98.3%,雜草平均高度20~120 cm。其中,優(yōu)勢雜草5種:野麥、南苜蓿、野芹菜、風(fēng)花菜、豬殃殃;非優(yōu)勢雜草4種:野老鸛草、一年蓬、小飛蓬、羊蹄Rumex japonicus Houtt.;其他雜草數(shù)量稀少(表1)。

    2.2.2 出苗競爭力 6月 5日和 7月5日:轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉各小區(qū)雜草平均高度分別為52.5和46.3 cm,與對照相比差異均不顯著;平均覆蓋度分別為61.3%和87.5%,與對照相比差異均顯著(表2);平均出苗率分別為13.8%和18.1%,與對照相比,前者差異不顯著,后者差異顯著(表3)。轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉各小區(qū)雜草平均高度分別為61.3和41.3 cm,與對照相比,前者差異顯著,后者差異不顯著;平均覆蓋度分別為75.0%和88.8%,與對照相比差異均顯著(表2);平均出苗率分別為10.6%和8.8%,與對照相比差異均不顯著(表3)。這表明2種轉(zhuǎn)基因棉在6~7月出苗競爭力較弱,棉苗被雜草覆蓋。

    8月5日和9月5日:轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉各小區(qū)雜草平均高度分別為110.0和120 cm,與對照相比差異均不顯著;平均覆蓋度均為100%,與對照相等(表2);平均出苗率分別為20.6%和24.4%,與對照相比差異均顯著(表3)。轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉各小區(qū)雜草平均高度分別為87.5和115.0 cm,與對照相比差異均不顯著;平均覆蓋度均為100%,與對照相等(表3);平均出苗率分別為14.4%(與對照差異不顯著)和15.6%(與對照相等),棉苗被雜草覆蓋。

    出苗競爭力方面雜草化風(fēng)險評估:(1)在整個生長期中,轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉出苗率競爭優(yōu)勢與對照相比均未達到顯著水平,因此不具有顯著的雜草化風(fēng)險;(2)轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉出苗競爭力與對照相比,在7月份之前處于弱勢,到9月份出苗率與對照相等,所以其在出苗競爭力方面也不具有雜草化風(fēng)險。

    2.2.3 株高競爭力 7月5日、8月5日、9月5日和10月5日,轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉平均株高分別為 25.00、29.50、33.92 和 33.93 cm,轉(zhuǎn) cry1Ac+EPSPS 基因棉平均株高分別為 21.25、30.25、40.51和40.52 cm,與對照相比差異均不顯著(表3);11月5日,各小區(qū)雜草已處于枯萎狀態(tài)。由此可見,這2種轉(zhuǎn)基因棉株高競爭力與對照相比均無顯著優(yōu)勢,不具有雜草化風(fēng)險。

    2.2.4 生育進程競爭力 轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉、轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉在生育進程上與對照均一致(表3),無競爭優(yōu)勢,這也說明它們無雜草化風(fēng)險。

    2.2.5 吐絮瓣和絮瓣脫落競爭力 2011年11月5日,轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉和轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉平均吐絮瓣數(shù)分別為6.8和11個,與對照相比差異均顯著;絮瓣脫落率和對照均為0。2012年3月28日,2種轉(zhuǎn)基因棉平均吐絮瓣數(shù)分別為16.0和36.0個,與對照相比差異均極顯著;絮瓣脫落率分別為0和8.3%,與對照相比差異均顯著(表4)。這表明轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉和轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉與對照相比,吐絮瓣和絮瓣脫落競爭力均呈顯著的負優(yōu)勢,不具有繁殖傳代意義上的雜草化風(fēng)險。

    2.2.6 自生苗 2012年3月28日,轉(zhuǎn) cry1Ac+cry2Ab基因棉、轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉和對照各小區(qū)均無自生苗,這是由于三者吐絮棉瓣中的棉籽(種子)均為不成熟的空殼。因此,這2種轉(zhuǎn)基因棉在荒地3 cm深播下無自生苗的雜草化風(fēng)險。

    綜上所述,在地表撒播和3 cm深度播種條件下,轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉和轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉各項指標(biāo)的競爭能力均無顯著優(yōu)勢,在推廣種植上不存在雜草化風(fēng)險。

    3 結(jié)論與討論

    轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉、轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉和對照非轉(zhuǎn)基因棉在荒地撒播和3 cm深播2種方式的生存競爭能力檢測結(jié)果表明,僅轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉撒播的平均出苗競爭優(yōu)勢與對照相比達到顯著差異,其余檢測指標(biāo)與對照相比均無顯著的競爭優(yōu)勢。因此,從整體上看,可以定性地確定受檢的轉(zhuǎn)cry1Ac+cry2Ab基因棉和轉(zhuǎn)cry1Ac+EPSPS基因棉在推廣種植上不存在雜草化風(fēng)險。

    本研究未調(diào)查雜草數(shù)量,而是調(diào)查了雜草覆蓋度。953號公告規(guī)定,在轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花生存競爭能力的荒地測定中,需調(diào)查雜草數(shù)量。作者研究發(fā)現(xiàn),荒地雜草種類繁多,無法調(diào)查雜草株數(shù),如禾本科和苜蓿類雜草,不僅難以準(zhǔn)確計算,而且極其耗時。另外,其覆蓋度也比一些大型雜草小,如一年蓬、風(fēng)花菜、野芹菜等。由此可見,在植物生長競爭力方面,覆蓋度指標(biāo)更為重要,指標(biāo)越大,說明競爭能力越強,優(yōu)勢也越大。因此作者認為,在荒地競爭能力檢測中,無需調(diào)查雜草數(shù)量,通過調(diào)查、統(tǒng)計各種雜草覆蓋度即可說明其占據(jù)棲息地的競爭能力。

    953號公告規(guī)定,在轉(zhuǎn)基因抗蟲棉荒地生存競爭能力測定中,需對棉花的覆蓋度做調(diào)查。作者研究發(fā)現(xiàn),棉花在荒地不僅出苗少,植株瘦弱矮小,而且大部分荒地被雜草覆蓋。因此認為,在荒地檢測時對于棉花覆蓋度可以忽略不測,除非有新的轉(zhuǎn)基因棉花在荒地中表現(xiàn)更強的生長競爭力,則可以臨時用游標(biāo)卡尺逐株測量后統(tǒng)計棉花的覆蓋度(張興華等,2010)。

    此外,本研究采用百分?jǐn)?shù)方法自定義差異顯著性值。在檢測棉花荒地的生存競爭能力中,由于某個處理中某個重復(fù)小區(qū)會產(chǎn)生無苗生出、無鈴?fù)滦?、無吐絮棉瓣脫落的情況而不能進行生物統(tǒng)計中的方差分析和顯著性檢驗。據(jù)作者研究,在荒地條件下棉長勢不良,出苗株數(shù)稀少,彼此間量值很低,差異值較小。因此,自定義定性評價標(biāo)準(zhǔn):<5%為差異不顯著,5% ~10%為差異顯著,>10%為差異極顯著。經(jīng)實踐檢驗,此標(biāo)準(zhǔn)符合實際,且實用性強,可操作性好。在2012年初召開的“轉(zhuǎn)基因抗病棉花生存競爭能力檢測技術(shù)操作規(guī)程和評價指標(biāo)”江西省地方標(biāo)準(zhǔn)審定會上得到評審專家的認可。

    馮堅.2006.轉(zhuǎn)基因耐除草劑作物的歷史、現(xiàn)狀及展望.雜草科學(xué),24(1):1-6.

    關(guān)雄.2006.蘇云金芽孢桿菌研究回顧與展望.中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報,8(6):5-11.

    郭三堆.1993.Cry1A殺蟲基因的人工合成.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),26(2):85.

    郭三堆,洪朝陽,徐瓊芳,毛立群,范云六.1993.蘇云金芽孢桿菌aizawai7-29δ-內(nèi)毒素基因改造后的殺蟲活性研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),26(5):77-82.

    雒珺瑜,崔金杰,張帥,陸雪君.2011.轉(zhuǎn)Cry1Ac+Cry2Ab基因棉對棉田節(jié)肢動物群落的影響.植物保護,37(6):90-92.

    謝道昕,范云六.1991.蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)殺蟲晶體蛋白基因?qū)朊藁ǐ@得轉(zhuǎn)基因植株.中國科學(xué)(B)輯,(4):367-373.

    謝德意.2001.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉研究進展、問題與對策.中國棉花,28(2):6-8.

    張洪瑞,朱其松,高苓昌,杜本懷,宋克勤,張士永,陳峰.2008.Bt基因及其在轉(zhuǎn)基因抗蟲植物中的研究進展.河北農(nóng)業(yè)科學(xué),12(6):87-89.

    張銳,王遠,孟志剛,孫國清,郭三堆.2007.國產(chǎn)轉(zhuǎn)基因抗蟲棉研究回顧與展望.中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報,9(4):32-42.

    張興華,喬艷艷,李捷.2010.轉(zhuǎn)雙價(Chi+Glu)基因抗病棉栽培地生存競爭能力研究.江西農(nóng)業(yè)學(xué)報,22(6):1-3.

    Crickmore N,Zeigler D R,F(xiàn)eitelson J,Schnepf E,van Rie J,Lereclus D,Baum J and Dean D H.1998.Bacillus thuringiensis and its pesticidal crustal proteins.Microbiology and Molecular Biology Reviews,62:775 -806.

    Wu K M and Guo Y Y.2005.The evolution of cotton pest management practices in China.Annual Review of Entomology,50:31-52.

    猜你喜歡
    吐絮覆蓋度出苗率
    呼和浩特市和林格爾縣植被覆蓋度變化遙感監(jiān)測
    基于NDVI的晉州市植被覆蓋信息提取
    早播條件下不同高油酸花生品種與種衣劑處理對花生出苗的影響
    低覆蓋度CO分子在Ni(110)面的吸附研究
    提高玉米密植品種出苗率技術(shù)要點
    不同基質(zhì)對萬壽菊出苗率和扦插成活率的影響
    2014年阿瓦提縣機采棉脫葉劑篩選試驗報告
    2014年阿瓦提縣機采棉脫葉劑篩選試驗報告
    柳絮
    棉花吐絮期管理技巧
    精品国产乱码久久久久久小说| 午夜福利影视在线免费观看| 国产一区二区在线观看av| 久久久久久久久久久免费av| 一区福利在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产精品久久久久久久久免| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产日韩一区二区三区精品不卡| www.熟女人妻精品国产| 女人精品久久久久毛片| 香蕉国产在线看| 母亲3免费完整高清在线观看 | 中文字幕人妻丝袜制服| 熟女av电影| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产亚洲精品第一综合不卡| 香蕉精品网在线| av不卡在线播放| 美女福利国产在线| 黄色毛片三级朝国网站| 一区二区三区四区激情视频| 久久久精品94久久精品| av免费在线看不卡| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 亚洲美女视频黄频| 2022亚洲国产成人精品| 视频在线观看一区二区三区| 国产福利在线免费观看视频| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久鲁丝午夜福利片| 黄片小视频在线播放| 欧美精品高潮呻吟av久久| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲精品国产av蜜桃| 免费看av在线观看网站| 曰老女人黄片| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 午夜激情av网站| 少妇熟女欧美另类| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 三上悠亚av全集在线观看| 少妇 在线观看| 秋霞在线观看毛片| 妹子高潮喷水视频| 在线观看www视频免费| 少妇人妻精品综合一区二区| 九色亚洲精品在线播放| 国产精品久久久久久av不卡| 午夜91福利影院| 免费观看无遮挡的男女| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 有码 亚洲区| 伦理电影免费视频| 国产精品女同一区二区软件| 大片电影免费在线观看免费| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 一级毛片 在线播放| 久久久久视频综合| 精品午夜福利在线看| 有码 亚洲区| 两个人看的免费小视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 一二三四中文在线观看免费高清| 丝袜美足系列| 水蜜桃什么品种好| 国产精品国产三级国产专区5o| 少妇人妻精品综合一区二区| 如何舔出高潮| 久热久热在线精品观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 久久久久久人妻| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 欧美中文综合在线视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 免费av中文字幕在线| 久久综合国产亚洲精品| 97在线视频观看| 国产综合精华液| 国产综合精华液| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 9191精品国产免费久久| 亚洲国产最新在线播放| 中文字幕精品免费在线观看视频| 99久久精品国产国产毛片| 丝袜脚勾引网站| 99久国产av精品国产电影| 校园人妻丝袜中文字幕| 久久精品久久精品一区二区三区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久影院123| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 男男h啪啪无遮挡| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲一区中文字幕在线| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 韩国精品一区二区三区| 在线观看免费视频网站a站| www.av在线官网国产| 欧美激情高清一区二区三区 | 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久久欧美国产精品| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 成年人免费黄色播放视频| 久久国产精品大桥未久av| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 男的添女的下面高潮视频| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲av.av天堂| 多毛熟女@视频| 看免费av毛片| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲五月色婷婷综合| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 晚上一个人看的免费电影| 国产亚洲精品第一综合不卡| 精品一品国产午夜福利视频| 18禁国产床啪视频网站| 欧美人与善性xxx| 国产免费现黄频在线看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲成国产人片在线观看| 两个人看的免费小视频| av国产精品久久久久影院| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 男人舔女人的私密视频| 天天影视国产精品| 亚洲国产日韩一区二区| 最近中文字幕2019免费版| 久久久久久久久久人人人人人人| 老鸭窝网址在线观看| 日韩伦理黄色片| 啦啦啦在线观看免费高清www| 多毛熟女@视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲国产精品成人久久小说| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲图色成人| 新久久久久国产一级毛片| 另类亚洲欧美激情| 国产精品av久久久久免费| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 婷婷色麻豆天堂久久| 午夜日本视频在线| 国产精品一国产av| 中国三级夫妇交换| 中国国产av一级| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产精品久久久久久精品电影小说| 18禁动态无遮挡网站| 在线观看一区二区三区激情| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲国产精品999| 女性生殖器流出的白浆| 母亲3免费完整高清在线观看 | av一本久久久久| 好男人视频免费观看在线| 一二三四在线观看免费中文在| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 午夜免费观看性视频| 国产色婷婷99| 日韩精品免费视频一区二区三区| 午夜免费男女啪啪视频观看| 午夜免费男女啪啪视频观看| 色网站视频免费| 只有这里有精品99| 桃花免费在线播放| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 伦精品一区二区三区| 美女高潮到喷水免费观看| 日本-黄色视频高清免费观看| 国产免费福利视频在线观看| 母亲3免费完整高清在线观看 | 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲国产av新网站| 亚洲精品乱久久久久久| 午夜激情久久久久久久| 大片电影免费在线观看免费| 中国国产av一级| 嫩草影院入口| 久久韩国三级中文字幕| 99久国产av精品国产电影| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产精品av久久久久免费| 考比视频在线观看| 亚洲中文av在线| freevideosex欧美| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 赤兔流量卡办理| 天天操日日干夜夜撸| 久久女婷五月综合色啪小说| 午夜日本视频在线| 2018国产大陆天天弄谢| 一二三四中文在线观看免费高清| 久久精品久久久久久久性| 午夜福利一区二区在线看| 亚洲一码二码三码区别大吗| 亚洲av男天堂| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲av综合色区一区| 美女中出高潮动态图| 国产免费现黄频在线看| 交换朋友夫妻互换小说| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 97人妻天天添夜夜摸| 欧美 日韩 精品 国产| 日韩在线高清观看一区二区三区| 欧美日韩综合久久久久久| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 成人国语在线视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 免费黄色在线免费观看| 国产淫语在线视频| 天堂中文最新版在线下载| 99香蕉大伊视频| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 五月天丁香电影| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 天堂8中文在线网| 色婷婷久久久亚洲欧美| 在线观看人妻少妇| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲精品成人av观看孕妇| 在线观看免费视频网站a站| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 久久99热这里只频精品6学生| 韩国av在线不卡| 两个人免费观看高清视频| 边亲边吃奶的免费视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久国内精品自在自线图片| 国产野战对白在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产一区二区三区av在线| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 一本久久精品| 99久久人妻综合| 国产毛片在线视频| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 久久精品久久久久久久性| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 一级毛片 在线播放| 亚洲国产最新在线播放| 老熟女久久久| 国产一区二区激情短视频 | 国产 一区精品| 搡老乐熟女国产| 国产乱来视频区| 少妇精品久久久久久久| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 爱豆传媒免费全集在线观看| 老司机亚洲免费影院| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 成年美女黄网站色视频大全免费| 99热网站在线观看| 国产免费视频播放在线视频| 成年av动漫网址| 黄频高清免费视频| 色哟哟·www| 狂野欧美激情性bbbbbb| 精品视频人人做人人爽| 成人毛片60女人毛片免费| 最近最新中文字幕免费大全7| 午夜老司机福利剧场| 亚洲国产成人一精品久久久| 人妻一区二区av| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲综合色惰| 黄色怎么调成土黄色| 黄色视频在线播放观看不卡| 少妇被粗大的猛进出69影院| 2022亚洲国产成人精品| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产精品蜜桃在线观看| 久久av网站| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产在视频线精品| 美女中出高潮动态图| 一级,二级,三级黄色视频| av天堂久久9| 另类精品久久| kizo精华| 亚洲人成电影观看| 91久久精品国产一区二区三区| 婷婷成人精品国产| 波野结衣二区三区在线| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 99久久综合免费| 男人舔女人的私密视频| 精品国产乱码久久久久久男人| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品偷伦视频观看了| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲精品在线美女| 欧美人与善性xxx| 成人黄色视频免费在线看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 在线观看人妻少妇| 一级片免费观看大全| 亚洲综合色惰| 水蜜桃什么品种好| 捣出白浆h1v1| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 春色校园在线视频观看| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲美女视频黄频| a 毛片基地| 熟女av电影| 桃花免费在线播放| 亚洲精品成人av观看孕妇| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产精品人妻久久久影院| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产男女内射视频| 老汉色∧v一级毛片| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 午夜久久久在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| av.在线天堂| 中文字幕最新亚洲高清| 国产爽快片一区二区三区| 国产有黄有色有爽视频| 大片电影免费在线观看免费| 国产精品一二三区在线看| 国产在线免费精品| 亚洲美女视频黄频| 我要看黄色一级片免费的| 一级爰片在线观看| 亚洲成人av在线免费| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 日本av手机在线免费观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| av在线app专区| 伊人久久国产一区二区| 亚洲精品美女久久av网站| 精品久久久久久电影网| 免费观看性生交大片5| www.自偷自拍.com| 黄色配什么色好看| 国产伦理片在线播放av一区| av.在线天堂| 色婷婷av一区二区三区视频| 性色avwww在线观看| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产成人精品久久久久久| 性少妇av在线| 天美传媒精品一区二区| 超碰成人久久| 精品一区二区三卡| 大话2 男鬼变身卡| 色吧在线观看| 好男人视频免费观看在线| 高清在线视频一区二区三区| 国产高清不卡午夜福利| 中文字幕人妻熟女乱码| 色播在线永久视频| 伊人久久国产一区二区| 永久网站在线| 亚洲国产欧美在线一区| 午夜老司机福利剧场| 亚洲伊人色综图| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲美女视频黄频| 观看美女的网站| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久精品国产亚洲av涩爱| 精品一区二区免费观看| 久久国内精品自在自线图片| 国产精品久久久久久久久免| videosex国产| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲一区中文字幕在线| 丝袜喷水一区| 国产免费福利视频在线观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久精品久久久久久久性| 久久毛片免费看一区二区三区| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日本wwww免费看| 日韩免费高清中文字幕av| 精品亚洲成国产av| 免费观看在线日韩| 亚洲av欧美aⅴ国产| 嫩草影院入口| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲av日韩在线播放| 中文欧美无线码| 国产精品免费大片| av女优亚洲男人天堂| 久久久国产精品麻豆| 亚洲av男天堂| 久久久久精品性色| 国产一区二区三区综合在线观看| 99香蕉大伊视频| 久久精品国产综合久久久| 在线观看人妻少妇| 成年美女黄网站色视频大全免费| av网站在线播放免费| 青春草国产在线视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 久久精品国产亚洲av高清一级| 搡老乐熟女国产| 在线观看www视频免费| 黄片小视频在线播放| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 色哟哟·www| 婷婷色av中文字幕| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲综合色网址| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产免费又黄又爽又色| 日韩av不卡免费在线播放| 成人影院久久| 亚洲欧美色中文字幕在线| 日韩av在线免费看完整版不卡| 色视频在线一区二区三区| 久久精品国产亚洲av天美| 最近中文字幕2019免费版| 有码 亚洲区| 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲人成网站在线观看播放| 在线观看免费日韩欧美大片| 精品少妇久久久久久888优播| 欧美精品一区二区免费开放| 国产亚洲最大av| 少妇 在线观看| 美女高潮到喷水免费观看| 交换朋友夫妻互换小说| 丁香六月天网| 亚洲第一区二区三区不卡| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 亚洲精品乱久久久久久| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 一区二区av电影网| 五月天丁香电影| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产国语露脸激情在线看| 日本欧美国产在线视频| 91精品三级在线观看| 久久久国产一区二区| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 不卡视频在线观看欧美| 日韩av免费高清视频| 人妻少妇偷人精品九色| 国产毛片在线视频| 人人妻人人澡人人看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久久久国产网址| 中文字幕色久视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 免费观看在线日韩| 精品少妇久久久久久888优播| 另类亚洲欧美激情| 久久精品国产自在天天线| 高清不卡的av网站| 国产野战对白在线观看| 国产精品无大码| 我要看黄色一级片免费的| 久久久久久人妻| 男女啪啪激烈高潮av片| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产精品国产av在线观看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产免费视频播放在线视频| 国产又爽黄色视频| 国产av精品麻豆| 色哟哟·www| 午夜影院在线不卡| 国产 一区精品| 午夜福利视频精品| 久久久欧美国产精品| 免费观看a级毛片全部| 国产成人aa在线观看| 老汉色av国产亚洲站长工具| 日本vs欧美在线观看视频| 在线 av 中文字幕| 欧美日韩综合久久久久久| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲欧美成人精品一区二区| 视频区图区小说| 免费黄色在线免费观看| 人成视频在线观看免费观看| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 久久久久久伊人网av| 一区二区三区激情视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲国产欧美日韩在线播放| 欧美激情高清一区二区三区 | 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 十八禁网站网址无遮挡| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 9191精品国产免费久久| 日韩电影二区| 制服诱惑二区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 欧美bdsm另类| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产探花极品一区二区| 午夜激情久久久久久久| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 亚洲第一青青草原| 国产福利在线免费观看视频| 午夜久久久在线观看| 成年av动漫网址| 永久网站在线| 国产精品欧美亚洲77777| 精品人妻一区二区三区麻豆| 中文天堂在线官网| 卡戴珊不雅视频在线播放| 少妇被粗大的猛进出69影院| 超色免费av| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产成人精品久久久久久| 最近中文字幕高清免费大全6| 久久久国产欧美日韩av| 成人毛片60女人毛片免费| 高清欧美精品videossex| 熟女av电影| 777米奇影视久久| 99久久人妻综合| 日韩制服骚丝袜av| 另类精品久久| 久久久久久久久久久久大奶| 中文字幕av电影在线播放| 青春草视频在线免费观看| av片东京热男人的天堂| 在线观看www视频免费| av网站免费在线观看视频| 最近手机中文字幕大全| 99精国产麻豆久久婷婷| 日本av手机在线免费观看| 亚洲欧美色中文字幕在线| 亚洲av成人精品一二三区| 麻豆乱淫一区二区| 1024视频免费在线观看| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲在久久综合| 国产激情久久老熟女| 国产爽快片一区二区三区| 国产黄频视频在线观看| 性色av一级| 美女大奶头黄色视频| 最近手机中文字幕大全| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 欧美国产精品va在线观看不卡| 熟女电影av网| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产精品一区二区在线观看99| 国产精品久久久久久av不卡| 两个人免费观看高清视频| 国产激情久久老熟女| 国产精品国产av在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲男人天堂网一区| 国产一区二区 视频在线| 国产精品久久久av美女十八| 又大又黄又爽视频免费| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲美女视频黄频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 国产精品久久久久成人av| 亚洲,欧美,日韩| 日日摸夜夜添夜夜爱| 欧美黄色片欧美黄色片| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 国产淫语在线视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲精品一区蜜桃| 欧美bdsm另类| 精品亚洲成a人片在线观看| 免费高清在线观看视频在线观看| 免费日韩欧美在线观看| 黄频高清免费视频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 中文字幕人妻丝袜制服| 一区二区三区四区激情视频| 欧美在线黄色| xxx大片免费视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 人人妻人人澡人人看| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 一级黄片播放器| 男的添女的下面高潮视频| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 人妻人人澡人人爽人人| 午夜福利在线免费观看网站| 久久久久久久久免费视频了| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 成人黄色视频免费在线看| 亚洲精品日本国产第一区| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲成人手机|