室內(nèi)質(zhì)控在獻(xiàn)血者轉(zhuǎn)氨酶初篩檢測(cè)中的應(yīng)用研究

馬健華 賈幼珍 范澤輝 賈穎

當(dāng)前各血站血液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室均已建立了一整套比較完善的室內(nèi)質(zhì)量控制體系，對(duì)于監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)誤差和隨機(jī)誤差起到了非常重要的作用。但許多血站流動(dòng)采血車轉(zhuǎn)氨酶初篩尚未納入室內(nèi)質(zhì)控管理，初篩結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確性未能得到很好的監(jiān)控，造成了較大的血液浪費(fèi)或獻(xiàn)血者流失。筆者針對(duì)流動(dòng)采血車轉(zhuǎn)氨酶初篩的檢測(cè)過程建立了相應(yīng)的室內(nèi)質(zhì)控體系，報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象 2008至2010年本地區(qū)自愿無(wú)償獻(xiàn)血者ALT初篩檢測(cè)結(jié)果及采后血液復(fù)檢結(jié)果。

1.2 儀器與試劑 初篩丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑(北京利德曼)，質(zhì)控血清:中生北控;初篩儀器:北京倍肯F-6124型半自動(dòng)生化分析儀;復(fù)檢采用試劑:(日本和光，四川邁克)復(fù)檢儀器:7600-010ID型全自動(dòng)生化分析儀。

1.3 方法與結(jié)果判斷

1.3.1 質(zhì)控品的選擇

1.3.1.1 選擇質(zhì)控品所含待測(cè)物的濃度一般在臨界值附近。

1.3.1.2 采用中生北控干粉的質(zhì)控品，按要求融化后分裝于0.5 ml離心管內(nèi)，每次配置量至少使用3個(gè)月，在低于-20℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.1.3 在日常使用之前對(duì)質(zhì)控品的外觀、批號(hào)和效期進(jìn)行檢查，并對(duì)其性能進(jìn)行確認(rèn)，嚴(yán)格按質(zhì)控品使用要求進(jìn)行操作。

1.3.1.4 要求質(zhì)控品與常規(guī)標(biāo)本檢測(cè)條件相同;質(zhì)控品檢測(cè)要求在開機(jī)后工作前進(jìn)行。

1.3.2 質(zhì)控圖框架的建立

1.3.2.1 基礎(chǔ)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的獲得:在正式實(shí)驗(yàn)之前，首先對(duì)將要使用的質(zhì)控品由操作人員在常規(guī)條件下連續(xù)檢測(cè)該質(zhì)控品20次，獲得20個(gè)質(zhì)控?cái)?shù)值。

1.3.2.2 質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的處理:首先設(shè)定“假設(shè)”常規(guī)檢測(cè)的變異系數(shù)(cv)≤15%［1］，再計(jì)算上述20個(gè)質(zhì)控結(jié)果的平均值()及標(biāo)準(zhǔn)差(s)。采用Levey-Jennings(L-J)質(zhì)控圖框架，將±2s設(shè)置為警告限，±3s設(shè)置為控制限，即控制上限值為+3s，控制下限值為-3s。以Y軸為質(zhì)控品的測(cè)定值，X軸為測(cè)定時(shí)間，繪制質(zhì)控圖，并以此對(duì)以后的20次實(shí)驗(yàn)的質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，發(fā)現(xiàn)超出±2s或±3s的結(jié)果為警告或失控。

1.3.2.3 質(zhì)控圖框架的建立:待20次試驗(yàn)的質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)完全得出后，再以此后20個(gè)質(zhì)控?cái)?shù)值計(jì)算并繪制出常規(guī)的L-J質(zhì)控圖，結(jié)合Westgard多規(guī)則質(zhì)控法［2］對(duì)以后的每次質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行分析。

1.3.3 質(zhì)控規(guī)則的選擇及原因分析:針對(duì)流動(dòng)采血車實(shí)驗(yàn)條件、人員等特殊情況，筆者根據(jù)采血車特點(diǎn)選擇了以下規(guī)則:①12 s規(guī)則:12s規(guī)則作為警告規(guī)則，即當(dāng)有一個(gè)質(zhì)控品測(cè)定值超出±2s時(shí)為警告，用于提示可能存在隨機(jī)誤差，應(yīng)引起注意，雖不作為失控的依據(jù)，但需關(guān)注質(zhì)控圖的趨勢(shì)變化。②13 s規(guī)則:13 s規(guī)則作為在控與失控的判斷規(guī)則，即如果出現(xiàn)一個(gè)質(zhì)控品測(cè)定值超出±3s時(shí)為失控，用于提示可能存在隨機(jī)誤差;應(yīng)查找原因予以解決。③22 s規(guī)則:22 s規(guī)則用于發(fā)現(xiàn)由于儀器、試劑、環(huán)境條件等因素引起的系統(tǒng)誤差。即如果連續(xù)2個(gè)質(zhì)控品測(cè)定值同時(shí)超出±2s即為失控，用于提示可能存在系統(tǒng)誤差;亦應(yīng)查找原因進(jìn)行分析并采取措施。

1.3.4 失控情況處理:如出現(xiàn)違背質(zhì)控規(guī)則的情況，應(yīng)分析失控的原因，及時(shí)采取糾正措施。

1.3.5 操作方法及注意事項(xiàng)

1.3.5.1 各流動(dòng)采血車每天早晨出車前從冰柜中取一支質(zhì)控血清，于37℃融化后24 h內(nèi)使用，在工作前先對(duì)質(zhì)控血清按《轉(zhuǎn)氨酶檢測(cè)操作規(guī)程》及《半自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程》進(jìn)行操作，并將檢測(cè)結(jié)果記錄并描點(diǎn)于質(zhì)控圖上。

1.3.5.2 對(duì)半自動(dòng)生化分析儀按要求定期進(jìn)行維護(hù)校準(zhǔn)，使之處于最佳工作狀態(tài)。

1.3.5.3 對(duì)初篩操作人員進(jìn)行相關(guān)培訓(xùn)，并在實(shí)際工作過程中加以考核，發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)改進(jìn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2008年未開展室內(nèi)質(zhì)控時(shí)，檢測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定，初篩淘汰率及復(fù)檢報(bào)廢率均較高，本站自2009年初開展室內(nèi)質(zhì)控后，獻(xiàn)血者轉(zhuǎn)氨酶的初篩淘汰率及復(fù)檢淘汰率均呈下降趨勢(shì)，且開展室內(nèi)質(zhì)控后，結(jié)果均呈現(xiàn)穩(wěn)定變化趨勢(shì)。2008至2010年遷安市無(wú)償獻(xiàn)血者ALT初檢淘汰率為16.0%，且呈顯著下降趨勢(shì)(χ2=55.1，P＜0.01)。2009、2010年淘汰率比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.82，P ＞0.05)。見表1。

表1 2008至2010年遷安市無(wú)償獻(xiàn)血者ALT初篩淘汰率情況例(%)

2008至2010年遷安市無(wú)償獻(xiàn)血者ALT復(fù)檢淘汰率為0.42%，且呈顯著下降趨勢(shì)(χ2=28.0，P ＜0.01)。2009、2010年復(fù)檢淘汰率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.74，P＞0.05)。見表2。

表2 2008至2010遷安市無(wú)償獻(xiàn)血者ALT復(fù)檢淘汰率情況例(%)

3 討論

室內(nèi)質(zhì)量控制是由實(shí)驗(yàn)室的工作人員采用一系列的統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法，連續(xù)地評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)室測(cè)定工作的可靠程度，判斷檢驗(yàn)報(bào)告是否可發(fā)出的過程［3］，室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的回顧分析可以幫助我們判斷誤差的來(lái)源，然后根據(jù)它們不同的特點(diǎn)采取相應(yīng)的措施加以糾正［4］。目前，大多數(shù)血液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室均采用“即刻法”質(zhì)控法和Levey-Jennings質(zhì)控框架圖，從21次起以后的檢測(cè)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)入Levey-Jennings質(zhì)控圖［5］，筆者考慮到流動(dòng)采血車上初篩檢測(cè)人員非檢驗(yàn)專業(yè)人員，采用“即刻法”質(zhì)控法對(duì)數(shù)據(jù)的計(jì)算比較麻煩，不易操作，因此對(duì)建立質(zhì)控圖框架的前20個(gè)數(shù)據(jù)通過假設(shè)常規(guī)條件下的變異系數(shù)獲得。經(jīng)過本站初步實(shí)踐應(yīng)用后表明:該套質(zhì)控方法克服了常規(guī)作圖法的不便，且第一次試驗(yàn)數(shù)據(jù)即可得到有效監(jiān)控。當(dāng)操作人員發(fā)現(xiàn)某次質(zhì)控結(jié)果失控時(shí)，要立即查找原因，及時(shí)采取糾正措施，如果短時(shí)間內(nèi)找不到失控的原因，避免獻(xiàn)血者等待時(shí)間過長(zhǎng)，本站采取如下措施:一是當(dāng)質(zhì)控結(jié)果是超過+3s失控時(shí)，操作人員可以先進(jìn)行樣本的檢測(cè)，對(duì)于臨界值標(biāo)本要進(jìn)行多次檢測(cè)取平均值決定是否允許其獻(xiàn)血;但對(duì)于質(zhì)控結(jié)果在-3s以外的值，操作人員在未找到失控原因及解決辦法時(shí)，可以先采取判定標(biāo)準(zhǔn)(40 U/L)下浮一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)掌握，待找到并消除失控原因后恢復(fù)正常。從表2中可以看出，本站自2009年初開始進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控起，報(bào)廢率較以前明顯降低，且2009年與2010年報(bào)廢率無(wú)明顯差異，說明開展室內(nèi)質(zhì)控后，檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定，變異小，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)因檢測(cè)設(shè)備或檢測(cè)試劑異常等情況，予以糾正，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，從而有效地減少了血液報(bào)廢和獻(xiàn)血者流失。

1 袁紅，楊明清.血液免疫學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量保證//楊成民，李家增，季陽(yáng)主編.基礎(chǔ)輸血學(xué).第1版.北京:中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社，2001.682-710.

2 劉保廷，雷桂華.應(yīng)用Levey-Jennings質(zhì)控圖結(jié)合Westgard多規(guī)則進(jìn)行臨床化學(xué)室內(nèi)質(zhì)控.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2004，6:43-44.

3 Levey S，Jennings ER.The use of control charts in the clinical.Am J Clin Pathol，1950，20:1059-1066.

4 劉海田，劉淼，李勇輝，等主編.血液制品采集檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)及質(zhì)量控制實(shí)務(wù)全書.第1版.北京:北京中軟電子出版社，2003.196-197.

5 石海鵬.1種ELISA室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法實(shí)踐.中國(guó)輸血雜志，2010，23:296-298.