平衡針對大鼠鎮(zhèn)痛作用的實驗研究

袁紅,陳榕,黃大鵬,王文遠,陳占祿,陳鋒

(北京中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院,北京 100029)

平衡針是王文遠教授在中醫(yī)學(xué)理論指導(dǎo)下,經(jīng)過長期、反復(fù)的臨床摸索,以西醫(yī)神經(jīng)調(diào)控學(xué)說為物質(zhì)基礎(chǔ),總結(jié)建立針灸與心理-生理-社會自然相適應(yīng)的整體醫(yī)學(xué)調(diào)節(jié)模式[1]。它強調(diào)人體的自我平衡修復(fù)功能,通過針刺反應(yīng)點以達到對病變部位的治療和鎮(zhèn)痛作用,其最重要的特點是針對各種疼痛的療效,尤其是急性疼痛的即刻緩解效果[2]。針灸具有鎮(zhèn)痛、防衛(wèi)免疫、調(diào)整機體的作用,關(guān)于針刺鎮(zhèn)痛機制研究的報道很多,而平衡針作為一種傳統(tǒng)針灸的創(chuàng)新,對痛證的機理研究報道并不多見,本實驗試圖深入探討平衡針鎮(zhèn)痛作用的機理及途徑,為臨床上平衡針灸治療各種痛證提供理論和實驗依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 實驗動物

健康雄性SD大鼠48只,體重為180～200 g,清潔級(北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供)。

1.2 實驗儀器設(shè)備

PL-200型熱刺痛儀,由成都泰盟科技有限公司生產(chǎn);0.35 mm×25 mm毫針,為蘇州醫(yī)療用品廠有限公司出品的華佗牌無菌針灸針。

1.3 熱刺激耐痛閾值檢測方法

分別檢查大鼠雙側(cè)后肢熱刺激耐痛閾值,即采用PL-200型熱刺痛儀,盒內(nèi)輻射熱光源經(jīng)底部玻璃板聚焦到一側(cè)足底的后半部,光斑直徑為 5 mm。記錄從開始照射到產(chǎn)生縮爪的時間。每次測試間隔至少5 min,測量3次取平均值,兩側(cè)后足交替檢測。

1.4 分組處理

治療組采用常規(guī)飼養(yǎng),在進行熱刺激測耐痛閾后,進行針刺“踝痛穴”治療,治療后再測耐痛閾,觀察治療前后耐痛閾的變化。“踝痛穴”治療具體操作為,采用交叉取穴原則,取踝痛穴(前臂掌側(cè),腕橫紋正中,即橈側(cè)腕屈肌腱與掌長肌腱之間,旁開1 cm)。在施針處常規(guī)消毒后,采用毫針進行針刺,針尖平刺2～3 mm,單向捻轉(zhuǎn)至滯針,不留針,至出現(xiàn)大鼠前肢觸電樣抽動,即出針[3]。每日1次,共治療7 d。

對照組采用常規(guī)飼養(yǎng),每日采用熱刺痛儀測試耐痛閾,共檢測7 d。

1.5 檢測指標與取材

治療7 d后,次日將兩組大鼠斷頭取血6 mL,置4℃3000 rpm離心機中離心10 min后分離血清,采用放射免疫法測定血清b-EP、Ach的含量。迅速取腦,在冰盤上分離下丘腦制成腦勻漿,采用放射免疫法測定下丘腦b-EP、5-HT的含量。丘腦勻漿液及血清于－20℃冰箱保存。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)資料進行統(tǒng)計分析,計量資料用均數(shù)±標準差表示,雙側(cè)后肢熱刺激耐痛閾數(shù)值各組組間差異采用單因素方差分析(多組單因素ANOVA);生化指標數(shù)值呈正態(tài)分布采用t檢驗,非正態(tài)分布采用符號秩檢驗(Sign Rank Test),以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組大鼠雙側(cè)后肢熱刺激耐痛閾比較

由表 1可見,兩組治療前大鼠雙側(cè)后肢熱刺激耐痛閾比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。治療組治療后大鼠雙側(cè)后肢熱刺激耐痛閾與同組治療前比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。治療組治療后大鼠雙側(cè)后肢熱刺激耐痛閾與對照組比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。

表1 兩組大鼠雙側(cè)后肢熱刺激耐痛閾比較 (x±s,s)

2.2 兩組大鼠各項指標比較

由表2可見,治療組治療后血清中b-EP和Ach含量、下丘腦中5-HT含量明顯提高,下丘腦中b-EP含量明顯降低,與對照組比較,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01,P＜0.05)。

表2 兩組大鼠各項指標比較 (x±s)

3 討論

通過實驗我們發(fā)現(xiàn),在大鼠后肢熱刺激耐痛閾變化中,治療組針后比對照組大鼠熱刺激耐痛閾明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);組內(nèi)相比較,針后比針前也明顯升高(P＜0.01)。結(jié)果提示,平衡針具有良好的快速鎮(zhèn)痛作用,這與平衡針在臨床對各種疼痛的即刻療效剛好相吻合。

b-EP是由自身合成的具有阿片樣作用的肽類物質(zhì),是鎮(zhèn)痛系統(tǒng)的主要遞質(zhì),主要分為中樞和外周兩個方面起作用。它在腦內(nèi)和脊髓內(nèi)均有顯著的鎮(zhèn)痛作用。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)它通過b-EP能神經(jīng)元的神經(jīng)纖維投射到達相應(yīng)核團部位抑制疼痛信息的傳遞,如抑制脊髓背角痛覺信息的傳遞;在外周中由于垂體和免疫細胞分泌大量b-EP進入血液,二者趨向于損傷應(yīng)激組織,緩解疼痛[4]。有學(xué)者指出b-EP的鎮(zhèn)痛作用主要是通過含b-EP的免疫細胞遷移至炎癥組織,釋放b-EP,激活感覺神經(jīng)元周圍末梢上的阿片受體產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用[5]。5-HT是針刺鎮(zhèn)痛機制中重要的神經(jīng)遞質(zhì)。腦內(nèi) 5-HT能神經(jīng)元集中在中縫核群,中縫核群是腦內(nèi)調(diào)制痛覺的重要結(jié)構(gòu)。中縫背核5-HT神經(jīng)元上行纖維投射到丘腦髓板內(nèi)側(cè)核群、下丘腦、尾核和邊緣系統(tǒng);中縫大核5-HT神經(jīng)元下行纖維到達脊髓。選擇性損毀中縫核群5-HT上行和下行通路,隨著有關(guān)腦內(nèi)5-HT含量的降低,針刺鎮(zhèn)痛效應(yīng)也顯著減弱。進一步研究表明,局部損毀或采用 5-HT拮抗劑及 5-HT合成抑制劑以影響 5-HT通路的任何一個環(huán)節(jié),均可明顯減弱針刺鎮(zhèn)痛效應(yīng)[6]。Ach是重要的單胺類中樞遞質(zhì),在中樞神經(jīng)系統(tǒng)分布很廣泛。采用神經(jīng)生理、生化和藥理學(xué)方法進行研究表明,針刺鎮(zhèn)痛時中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的 Ach代謝更新加快,功能活動加強,使針刺鎮(zhèn)痛作用加強。另有報道,針刺可使大腦皮層、尾核、丘腦中Ach含量增加,并與針刺鎮(zhèn)痛呈平行關(guān)系。針刺后可通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)的Ach 來激活5-HT神經(jīng)元而產(chǎn)生鎮(zhèn)痛效應(yīng)[7]?？梢?Ach是參與針刺鎮(zhèn)痛作用機制的神經(jīng)遞質(zhì)之一。

通過平衡針治療我們發(fā)現(xiàn),①治療組下丘腦中b-EP較對照組明顯降低(P＜0.01),提示平衡針可能是促進了b-EP和受體的結(jié)合,增強了鎮(zhèn)痛效果,而使能檢測到的b-EP含量降低[8];而治療組血清中b-EP明顯升高,統(tǒng)計學(xué)差異顯著(P＜0.05),提示平衡針可能是通過對b-EP分泌的調(diào)節(jié),來應(yīng)對機體應(yīng)激狀態(tài),在應(yīng)激情況下,b-EP可由外周直接釋放,作用于感覺末梢,通過抑制傷害性感受器興奮而發(fā)揮局部鎮(zhèn)痛的作用;②下丘腦中治療組的5-HT含量比對照組升高(P＜0.05),提示平衡針通過加快了5-HT的更新率,促進5-HT的合成、釋放、利用,加強5-HT的下行抑制系統(tǒng)進而實現(xiàn)鎮(zhèn)痛作用;③治療組大鼠血清中Ach的含量較對照組有明顯升高(P＜0.05),提示平衡針通過增強Ach的更新率,增加含量調(diào)節(jié)痛反射快慢,通過抑制痛反射,改善疼痛局部血液供應(yīng),進而實現(xiàn)鎮(zhèn)痛作用。

本實驗結(jié)合行為學(xué)(耐痛閾)和生化指標檢測結(jié)果,表明平衡針具有良好的快速鎮(zhèn)痛作用,該作用可能是通過啟動內(nèi)源性鎮(zhèn)痛系統(tǒng),激發(fā)機體痛反射及外周、中樞機制而實現(xiàn)的。從大鼠行為學(xué)的角度觀察平衡針的鎮(zhèn)痛作用迅速,故平衡針突出的針刺的即時效應(yīng)值得在臨床應(yīng)用。

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