自制外傷藥乳膏鎮(zhèn)痛抗炎作用試驗(yàn)

劉 鑫，劉萬(wàn)平

（商丘職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程系，河南 商丘476000）

自制外傷藥乳膏由蜂蜜、大黃、延胡索、青木香、紅花、旋覆花、乳香、沒(méi)藥等十幾味中藥組方制備而成，系我院中獸醫(yī)教研室劉萬(wàn)平教授自制制劑，經(jīng)多年的臨床使用證實(shí)，具有活血化瘀、瘀去生新、復(fù)通血脈、行氣止痛之功效。本試驗(yàn)采用熱板法和醋酸扭體法觀察鎮(zhèn)痛作用；采用大鼠足腫脹模型及小鼠耳廓腫脹模型觀察抗炎作用。

1 材料與儀器

1．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar種大鼠、昆明系小鼠，均來(lái)源于商丘市醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，試驗(yàn)前適應(yīng)性喂養(yǎng)7d。

1．2 藥物與試劑 6%、12%、18%外傷藥乳膏（每100g制劑含原藥量分別為6g、12g、18g），由商丘職業(yè)技術(shù)學(xué)院中獸醫(yī)教研室提供。氟芬那酸丁酯軟膏，由沈陽(yáng)抗生素廠生產(chǎn)（lot10010013）。其他試劑均為分析純。

1．3 儀器 BS110S電子天平（Sartorius公司生產(chǎn)），數(shù)控恒溫浴鍋Ⅱ（寧波東勝儀器科技有限公司生產(chǎn)）。

2 方法與結(jié)果

2．1 鎮(zhèn)痛作用試驗(yàn)

2．1．1 自制外傷藥乳膏對(duì)冰醋酸所致小鼠疼痛的影響 取體重18～22g健康小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。設(shè)空白組，外傷藥乳膏分大、中、小劑量組，對(duì)照組（氟芬那酸丁酯軟膏）。用藥前1d，先用8%硫化鈉脫掉小鼠腹部長(zhǎng)的毛，以備第2天試驗(yàn)用。試驗(yàn)當(dāng)日，在各小鼠腹部分別涂藥，連續(xù)給藥7d，于末次給藥30min后，每鼠腹腔注射0．3%醋酸0．2mL，詳細(xì)記錄各鼠出現(xiàn)每一次扭體反應(yīng)的時(shí)間及20min內(nèi)小鼠的扭體次數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表1。外傷藥乳膏能顯著延長(zhǎng)小鼠鎮(zhèn)痛潛伏期，動(dòng)物扭體次數(shù)隨外傷藥乳膏濃度的增高而降低，且中、大劑量組分別與對(duì)照組和鎮(zhèn)痛強(qiáng)度相當(dāng)，具有較好的鎮(zhèn)痛作用。

2．1．2 外傷藥乳膏對(duì)小鼠熱板法致痛的影響 取體重18～22g雌性小鼠，于室溫22℃放入在恒溫水浴鍋預(yù)熱到55℃±1℃的500mL燒杯中，1只／次，用秒表記錄小鼠自投入熱板至出現(xiàn)舔后足的時(shí)間（s）作為該鼠的痛閾值，如此測(cè)定2次，間隔30min，取均值為給藥前痛閾值。篩選出痛閾小于30s的小鼠為試驗(yàn)所用。以給藥前痛閾值隨機(jī)分為3組：第1組為外傷藥乳膏組（中劑量），將外傷藥乳膏按1g／cm2的劑量涂在燒杯底部的基質(zhì)上（第2組、第3組按同樣劑量分別涂氟芬那酸丁酯軟膏和賦形劑），把小鼠放在藥膏上，讓四肢充分與藥膏接觸。第2組為氟芬那酸丁酯軟膏組，第3組為賦形劑，后兩組的處理方法均同第1組。3組小鼠接觸藥物后30、60、90min再分別測(cè)定其痛閾值，每次測(cè)定完后均將小鼠放在藥膏上。結(jié)果見(jiàn)表2。表明小鼠足部接觸外傷藥乳膏60min后可明顯延長(zhǎng)痛閾值。而在60 min前作用不明顯，氟芬那酸丁酯軟膏組也是在60 min后出現(xiàn)鎮(zhèn)痛作用，兩藥作用基本相同。該試驗(yàn)表明，外傷藥乳膏外用具有一定的鎮(zhèn)痛作用。

表1 外傷藥乳膏對(duì)醋酸致小鼠疼痛的影響（±S）

表1 外傷藥乳膏對(duì)醋酸致小鼠疼痛的影響（±S）

注：與空白組比較，＊：P＜0．05；＊＊：P＜0．01

組別 劑量（g）第1次扭體反應(yīng)時(shí)間（min） 扭體次數(shù)空白組0．5 5．2±4．1 38．14±11．25小劑量組 0．5 8．6±2．3＊ 25．11±14．26＊中劑量組 0．5 8．3±2．1＊ 15．30±11．96＊＊大劑量組 0．5 6．5±2．8 14．70±10．17＊＊對(duì)照組 0．5 7．7±3．3 14．98±10．34＊＊

2．2 抗炎作用試驗(yàn)

2．2．1 自制動(dòng)物外傷藥乳膏對(duì)蛋清致炎大鼠足趾腫脹的影響 取大鼠50只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為空白組、外傷藥乳膏大劑量組、中劑量組、小劑量組、對(duì)照組（氟芬那酸丁酯軟膏）共5組，每組10只。試驗(yàn)當(dāng)日首先用自制容積測(cè)定裝置測(cè)定各組大鼠右后足正常體積（mL），然后給各組動(dòng)物分別涂藥物于右后足，均給藥0．3g。30min后，于右后足皮下注射100%新鮮雞蛋清0．1mL／只，測(cè)定注射蛋清30、60、90min的右后足體積，連續(xù)3次。結(jié)果見(jiàn)表3。外傷藥乳膏大劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組的足腫脹程度與空白對(duì)照組比較差異顯著，說(shuō)明其對(duì)蛋清引起的大鼠足腫脹程度有抑制作用。

2．2．2 自制動(dòng)物外傷藥乳膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 取體重25g～30g雄性小鼠50只，按體重隨機(jī)分為空白組、藥乳膏大、中、小劑量及對(duì)照組（氟芬那酸丁酯軟膏），每組10只，面積3cm×1cm左右，45min后各組以蒸餾水棉球擦去藥液，用于棉球擦凈，給小鼠右耳兩面涂二甲苯0．05mL／只，致腫，左耳作對(duì)照。30min后將小鼠脫頸處死，用8 mm直徑打孔器在每只動(dòng)物雙耳相同部位打下圓耳片，置于電子分析天平上稱重，以左右耳片重之差為腫脹度求出腫脹抑制率。結(jié)果見(jiàn)表4。外傷藥乳膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹具有明顯的抑制作用。

表2 外傷藥乳膏對(duì)小鼠熱板致痛的影響 （±S）

表2 外傷藥乳膏對(duì)小鼠熱板致痛的影響 （±S）

注：與賦形劑組比較，＊：P＜0．05，n＝6

組別 劑量g／（cm2） 給藥前痛閾值t／s給藥后不同時(shí)間痛閾值（t／s）30min 60min 90min賦形劑 1 16．82±4．39 18．18±5．40 17．71±5．12 17．30±5．61外傷藥乳膏中劑量 1 17．77±3．95 23．03±5．82 24．03±6．34＊ 25．75±7．43＊氟芬那酸丁酯軟膏 1 16．63±4．55 21．89±4．38 23．05±5．41＊ 2 416．00±5．76＊

表3 外傷藥乳膏對(duì)蛋清致大鼠足趾腫脹的影響 （±S）

表3 外傷藥乳膏對(duì)蛋清致大鼠足趾腫脹的影響 （±S）

注：與空白組比較，＊：P＜0．05，n＝10。下表同

組別不同時(shí)間右足容積v／（mL）致炎前30min 60min 90min空白組2．16±0．56 3．79±0．88 4．61±1．06 4．56±1．19小劑量組 2．01±0．67 3．22±0．63 4．20±0．67 4．18±0．53中劑量組 2．12±0．45 3．16±0．51 3．68±0．46＊ 3．71±0．44＊大劑量組 2．05±0．75 3．14±0．69 3．16±0．60＊ 3．54±0．87＊對(duì)照組2．10±0．80 3．14±0．98 3．78±1．05 3．84±0．94

表4 外傷藥乳膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳部腫脹的影響（±S）

表4 外傷藥乳膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳部腫脹的影響（±S）

組別 腫脹度m（mg） 腫脹度抑制率（%）空白組3．68±0．99 －小劑量組 2．66±0．86＊ 27．72中劑量組 2．35±0．64＊ 36．14大劑量組 2．27±0．65＊ 38．32對(duì)照組 2．30±0．81＊37．50

3 小結(jié)

通過(guò)藥理試驗(yàn)表明，自制動(dòng)物外傷藥乳膏對(duì)二甲苯所致耳廓腫脹、蛋清致大鼠后足、醋酸誘發(fā)的小鼠扭體及熱板法致痛試驗(yàn)具有抗炎、鎮(zhèn)痛作用，這與外傷藥乳膏里中藥解毒、消腫、活血、止痛、散瘀、瀉火、行水功效是一致的。本試驗(yàn)為外傷藥乳膏的臨床應(yīng)用及進(jìn)一步研究提供了可靠依據(jù)。

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