牛病毒性腹瀉的防控

鄧明亮，紀(jì)素坤，張敏敏，郭愛珍

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖北武漢 430070）

牛病毒性腹瀉的防控

鄧明亮，紀(jì)素坤，張敏敏，郭愛珍

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖北武漢 430070）

牛病毒性腹瀉(BVD）又稱牛病毒性腹瀉-黏膜病，是由牛病毒性腹瀉病毒引起的一種病理過(guò)程復(fù)雜、臨床表現(xiàn)多樣的傳染病。急性病例以發(fā)熱、腹瀉、咳嗽、黏膜糜爛和潰瘍、白細(xì)胞減少為主要特征，但常表現(xiàn)為持續(xù)感染和免疫抑制，妊娠母?？杀憩F(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或畸形胎等癥狀。該病呈世界性分布，我國(guó)已有20多個(gè)省份報(bào)道了該病，并且感染情況日趨嚴(yán)重。該病毒除感染黃牛、奶牛和牦牛外，還感染羊、豬、鹿等多種家養(yǎng)和野生動(dòng)物，嚴(yán)重威脅著我國(guó)畜牧養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，應(yīng)引起高度重視。

一、病原

牛病毒性腹瀉病毒屬于黃病毒科瘟病毒屬成員，是一種有囊膜的單股正鏈RNA病毒。病毒粒子多呈球形，直徑約為23～50 nm。在分類學(xué)上與豬瘟病毒和邊界病毒同為一屬，抗原性有交叉。BVDV基因組長(zhǎng)約12.5kb，包括5'端非翻譯區(qū)、一個(gè)大的開放閱讀框和3'端非編碼區(qū)。開放閱讀框編碼結(jié)構(gòu)蛋白（C、Erns或E0、E1和E2）和非結(jié)構(gòu)蛋白。根據(jù)病毒基因組5'-UTR序列不同可將BVDV分兩種基因型BVDV-1型和BVDV-2型，每種基因型又可分為多種基因亞型，我國(guó)主要流行BVDV-1b型。但近年來(lái)，我國(guó)開始出現(xiàn)BVDV-2型感染，并且感染率呈上升趨勢(shì)。BVDV-2型能引起持續(xù)感染和急性出血性綜合征，對(duì)牛的致病力更強(qiáng)，致死率更高。另外根據(jù)病毒對(duì)細(xì)胞的病變效應(yīng)，每種基因型可分為兩種生物型，即致細(xì)胞病理變化型和非致細(xì)胞病理變化型。本病毒能在胎牛腎、睪丸和肺，胎羊睪丸和豬腎細(xì)胞上增殖。急性高熱期病牛的血液和流產(chǎn)胎兒的脾和骨髓是常用于分離病毒的樣本。

該病毒對(duì)高溫敏感，在56℃下很快滅活，但在低溫下穩(wěn)定，真空凍干的病毒在-60℃～-70℃條件下可保存多年；對(duì)乙醚、氯仿、胰酶、pH3敏感。

二、流行病學(xué)

病毒可感染牛、羊、豬等多種家畜，以牛為主，各年齡的牛對(duì)該病均易感，以6～18月齡者居多。發(fā)病?？杀憩F(xiàn)為多種臨床癥狀如黏膜損害、腹瀉、肺炎、流產(chǎn)、出血性綜合征等急性感染癥狀。該病四季都有發(fā)生，冬季與早春多見，新疫區(qū)急性病例較多、發(fā)病率5%，死亡率高達(dá)90%以上，老疫區(qū)急性病例少、發(fā)病率和死亡率較低，而隱性感染率達(dá)50%以上。

隱性感染的主要形式是持續(xù)感染，其后果是損害機(jī)體的免疫機(jī)能，導(dǎo)致免疫抑制，增加其他病原體感染機(jī)會(huì)和疫苗的免疫失敗。持續(xù)性感染還導(dǎo)致感染畜天生具有免疫耐受性，體內(nèi)無(wú)BVDV抗體，因此不易被檢出，但一直帶毒并通過(guò)鼻涕、唾液、尿液、眼淚和乳汁等分泌物向體外排毒，成為該病危險(xiǎn)的傳染源。

該病傳播途徑可為直接或間接接觸傳播，主要通過(guò)攝食被病毒污染的飼料、飲水而感染，也可因吸入因病畜咳嗽、劇烈呼吸噴出的傳染性飛沫而感染。另外運(yùn)輸工具、飼養(yǎng)用具或者通過(guò)胎盤垂直感染、自然交配和人工授精等途徑也可以傳播該病。

三、臨床癥狀

根據(jù)臨床癥狀與發(fā)病過(guò)程，可分為急性和慢性兩種類型。

1.急性型。青年牛易發(fā)生，黏膜損害和腹瀉是主要癥狀。病牛發(fā)病急，高熱可達(dá)40℃～42℃，持續(xù)4～7 d后下降，有的出現(xiàn)體溫第二次升高；隨體溫升高白細(xì)胞減少，持續(xù)1～6 d，繼而白細(xì)胞數(shù)量又會(huì)增多，有的會(huì)發(fā)生第二次減少。病畜精神萎靡，厭食，呼吸急促伴咳嗽，鼻眼有漿液性分泌物；發(fā)病2～3 d后鼻鏡、舌、齒齦、腭、口腔黏膜充血并有潰瘍，流涎增多，呼出惡臭氣體。通常在口腔損傷之后發(fā)生嚴(yán)重腹瀉，腹瀉病牛的糞便從水樣逐漸到粘稠，含有大量粘液和氣泡，甚至帶血。病牛常在癥狀出現(xiàn)后5～7 d因嚴(yán)重脫水而死亡。

2.慢性型。該類型較少見。體溫只發(fā)生輕微波動(dòng)，主要表現(xiàn)消瘦，鼻鏡潰爛，甚至連成一片；眼有分泌物，通常門齒齒齦發(fā)紅，但口腔里很少發(fā)生糜爛；蹄葉炎和趾間皮膚糜爛，病牛明顯跛行；可出現(xiàn)持續(xù)或間歇性腹瀉。多數(shù)病例在2～6個(gè)月內(nèi)死亡，也可達(dá)1年。妊娠母牛感染后可發(fā)生流產(chǎn)或產(chǎn)先天性缺陷犢牛。

四、病理變化

病理變化主要集中在消化道和淋巴組織。鼻鏡、鼻腔黏膜有小而淺的爛斑；消化道黏膜充血、出血和糜爛，尤以腸道變化最嚴(yán)重，腸道黏膜出現(xiàn)卡他性、出血性、壞死性、潰瘍性等不同表現(xiàn)的炎癥；真胃黏膜彌漫性出血和水腫，并伴有潰瘍。腸系膜淋巴結(jié)水腫，增大如棗樣，切口外翻，有混濁液體流出。運(yùn)動(dòng)失調(diào)的新生犢牛腦膜及腦膜下積水，心內(nèi)外膜出血。

五、診斷

可根據(jù)其流行病學(xué)、臨床癥狀及病理變化作出初步診斷，但牛感染時(shí)多為隱性感染，且該病易與其他疾病如牛瘟、口蹄疫、水皰性口炎、牛傳染性鼻氣管炎等病的臨床癥狀相混淆，因此確診有賴于實(shí)驗(yàn)室檢查。

1.病毒分離和鑒定。急性發(fā)熱期可采集血液、眼鼻分泌物和尿液，死亡動(dòng)物可采集甲狀腺、脾、腸系膜淋巴結(jié)、骨髓等材料。將病料負(fù)染和電鏡觀察，或接種于犢牛睪丸、腎、鼻甲細(xì)胞、胎牛肺細(xì)胞等牛源細(xì)胞作分離培養(yǎng)。

2.血清學(xué)診斷。常用的血清學(xué)診斷方法有血清中和試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、快速診斷試紙條等。血清中和試驗(yàn)采取雙份血清（間隔3～4周），血清抗體滴度升高4倍以上者為陽(yáng)性，該法可定性也可定量，但處于免疫耐受的牛不產(chǎn)生抗BVDV的抗體，血清學(xué)陰性，所以可能造成漏檢。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是用于檢測(cè)BVDV最廣泛的方法之一，具有特異性強(qiáng)、敏感性高、重復(fù)性好、可批量檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，可用于檢測(cè)抗原或抗體。試紙條可用于快速檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單，不需特殊設(shè)備，也可檢測(cè)抗原或抗體。

3.分子生物學(xué)診斷。主要有反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR），該技術(shù)根據(jù)BVDV 5'端非翻譯區(qū)（5'-UTR）保守序列設(shè)計(jì)合成一對(duì)或幾對(duì)特異性引物，應(yīng)用RT-PCR技術(shù)對(duì)BVDV基因某段序列進(jìn)行基因擴(kuò)增。由于該方法高度特異靈敏性，得到了廣泛應(yīng)用。

六、防制

1.治療。本病無(wú)特效治療方法和藥物，實(shí)施對(duì)癥治療。由于本病引起的免疫抑制易導(dǎo)致其他病原體的繼發(fā)感染，在對(duì)發(fā)病牛進(jìn)行對(duì)癥治療的同時(shí)，應(yīng)使用抗菌藥物（抗生素或磺胺類等）治療以減少繼發(fā)感染。針對(duì)病牛脫水電解質(zhì)平衡紊亂的情況可輸液擴(kuò)充血容量并糾正酸中毒；腹瀉癥狀可投服收斂止瀉藥。用藥時(shí)需特別注意：急性感染牛禁用皮質(zhì)類固醇，因這類藥可加重消化道糜爛和潰瘍。對(duì)有飲食欲的?？捎眠m當(dāng)劑量的阿司匹林進(jìn)行退熱治療。

2.預(yù)防。需采取綜合性措施，進(jìn)行全面預(yù)防。

（1）謹(jǐn)慎引牛，加強(qiáng)檢疫。堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，不從疫區(qū)購(gòu)牛；對(duì)新購(gòu)牛要用血清學(xué)診斷方法進(jìn)行檢測(cè)，避免引入陽(yáng)性牛。定期對(duì)牛群進(jìn)行血清學(xué)檢查以便及時(shí)掌握本病在牛群中的流行狀況，如發(fā)現(xiàn)有少數(shù)牛出現(xiàn)抗體陽(yáng)性，應(yīng)將其淘汰以防病情擴(kuò)大。

（2）加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少環(huán)境應(yīng)激。保持良好的環(huán)境衛(wèi)生，及時(shí)清除牛舍內(nèi)外、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)上的糞便及其他污物，保持干燥并定期消毒。牛舍應(yīng)安裝通風(fēng)換氣設(shè)備，及時(shí)進(jìn)行通風(fēng)換氣。

（3）做好免疫接種，提高機(jī)體免疫力。目前國(guó)內(nèi)有幾家單位都在研究新型疫苗，但尚無(wú)商業(yè)化國(guó)產(chǎn)疫苗問(wèn)世。國(guó)外已經(jīng)有商品化的Ⅰ型和Ⅱ型毒株的減毒活疫苗和滅活疫苗。由于弱毒疫苗可導(dǎo)致妊娠母牛子宮感染引起流產(chǎn)或新生犢牛免疫抑制，因此妊娠母牛和6月齡以下的犢牛不能使用弱毒疫苗。弱毒疫苗接種年齡應(yīng)在9～12月齡。受威脅較大的牛群每隔3～5年接種1次，對(duì)育成母牛和種公牛應(yīng)于配種前再接種1次，多數(shù)?？色@得終生免疫。也可將弱毒疫苗和滅活疫苗聯(lián)合使用提高免疫效果。有研究報(bào)道豬瘟兔化弱毒疫苗接種牛群可對(duì)該病提供保護(hù)，實(shí)際工作中也存在用豬瘟兔化弱毒疫苗接種牛群預(yù)防牛病毒性腹瀉的情況，但這種應(yīng)用的生物安全后果未進(jìn)行過(guò)全面評(píng)估。

七、結(jié)語(yǔ)

牛病毒性腹瀉是呈世界性分布的重要傳染病，尤其在養(yǎng)牛業(yè)發(fā)達(dá)的國(guó)家，這種疾病的發(fā)生更為嚴(yán)重，給養(yǎng)牛業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。一些歐美國(guó)家已經(jīng)將此病列為重大疫病，并通過(guò)淘汰持續(xù)感染牛和疫苗預(yù)防接種等措施實(shí)施根除計(jì)劃，取得良好效果。隨著我國(guó)牛養(yǎng)殖量的增加，飼養(yǎng)方式向規(guī)?；图s化等現(xiàn)代養(yǎng)殖模式的轉(zhuǎn)變，我國(guó)養(yǎng)牛業(yè)受該病的威脅也越來(lái)越大。然而，我國(guó)對(duì)該病缺乏深入研究，流行病學(xué)資料不全，缺乏檢測(cè)試劑盒和疫苗等防控產(chǎn)品，給該病的防控帶來(lái)了很大困難。只有加強(qiáng)相關(guān)研究和技術(shù)推廣，并建立扎實(shí)完善的生物安全體系，通過(guò)對(duì)引牛、牛舍環(huán)境衛(wèi)生、預(yù)防接種、持續(xù)感染監(jiān)測(cè)、淘汰持續(xù)感染牛和牛群移動(dòng)限制等多環(huán)節(jié)進(jìn)行有效監(jiān)督和控制，最終達(dá)到凈化該病的目的。

（略）