進(jìn)展性腦梗死炎癥免疫因子臨床研究

孫志華

進(jìn)展性卒中臨床治療效果不佳，致死率、致殘率高，是什么因素促發(fā)或加重了腦梗死的發(fā)生和病情進(jìn)展是臨床迫切需要解決的課題。目前已經(jīng)明確動(dòng)脈粥樣硬化是腦梗死的主要病理基礎(chǔ)，炎癥機(jī)制在動(dòng)脈硬化及心腦血管病病理損害的作用和地位日益受到人們的認(rèn)可，腦梗死發(fā)生后，可引起機(jī)體發(fā)生一系列的免疫變化，眾多細(xì)胞因子在此過程中起著重要的病理作用，腦梗死后炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)是缺血中心區(qū)和周圍區(qū)神經(jīng)元損傷的重要機(jī)制之一。本研究檢測了急性進(jìn)展性腦梗死患者的血清白介素－6（interleukin－6，IL－6）、白介素－8（interleukin－8，IL－8）、腫瘤壞死因子－α（tumor necrosis factor－α，TNF－α）及其他臨床生化指標(biāo)，探討其與腦梗死的早期進(jìn)展之間是否相關(guān)，以期發(fā)現(xiàn)規(guī)律，從新的角度為臨床防治進(jìn)展性腦梗死提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 病例組：為急性腦梗死患者，入選標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)病48h內(nèi)入院；符合第四屆全國腦血管病會議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)，均經(jīng)頭CT和／或磁共振成像（MRI）證實(shí)；初發(fā)腦梗死，既往無神經(jīng)系統(tǒng)疾病病史。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往患有免疫系統(tǒng)疾病、腫瘤者；發(fā)病前后存在感染者；發(fā)病前后使用激素、免疫抑制劑、非甾體類抗炎藥物者；合并其他臟器嚴(yán)重并發(fā)癥者（心、肝、腎功能不全者）；確診系因動(dòng)脈炎發(fā)病的腦梗死患者。

共入選128例，其中男81例，女47例，年齡44歲～78歲（62.79歲±11.60歲），于入院當(dāng)時(shí)、入院第3天以及第7天進(jìn)行改良愛丁堡斯勘的那維亞神經(jīng)功能缺損評分（SSS），采用的進(jìn)展性缺血性腦卒中的評定標(biāo)準(zhǔn)為：任何2次連續(xù)SSS評估時(shí)，在意識水平、上下肢運(yùn)動(dòng)、眼球運(yùn)動(dòng)中，任何1種有≥2分的加重和／或在言語功能中有≥3分的加重。除外腦梗死后出血、發(fā)生其他新梗死灶或因嚴(yán)重的感染、高熱、心功能不全所致的病情進(jìn)展，其中進(jìn)展性腦梗死38例，非進(jìn)展性腦梗死90例。

對照組：收集同時(shí)期門診常規(guī)體檢的患有高血壓、糖尿病、高脂血癥、高黏血癥等基礎(chǔ)疾病者49例，其中男30例，女19例，年齡44歲～79歲（61.59歲±11.60歲），其年齡、性別、伴隨疾病等情況與腦梗死組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法

1.2.1 研究方法 橫斷面研究。

1.2.2 標(biāo)本收集 腦梗死患者入院次日清晨、對照組空腹采靜脈血10mL，離心、取血清存放于－70℃冰箱內(nèi)，用于IL－6、IL－8、TNF－α的測定，其余血生化指標(biāo)（血糖、膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、纖維蛋白原、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞比容）抽血送至醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室檢測。

1.2.3 血清IL－6、IL－8、TNF－α的測定方法 采用中國人民解放軍總醫(yī)院東亞放免研究所提供的試劑盒，均為放射免疫平衡法，反應(yīng)時(shí)間24h。

2 結(jié) 果

2.1 腦梗死組與對照組IL－6、IL－8、TNF－α水平的比較（見表1）

表1 腦梗死組與對照組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較（±s）

表1 腦梗死組與對照組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較（±s）

組別 n IL－6（pg／mL） IL－8（ng／mL） TNF－α（ng／mL）腦梗死組128 101.99±47.51 0.71±0.37 0.89±0.33對照組 49 84.09±44.75 0.53±0.31 0.76±0.30 P＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 進(jìn)展性腦梗死組與非進(jìn)展性腦梗死組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較 進(jìn)展性腦梗死血清IL－6、IL－8水平明顯高于非進(jìn)展性腦梗死組（P＜0.05）；TNF－α水平雖然也略高于非進(jìn)展性腦梗死組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見表2。

表2 兩組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較（±s）

表2 兩組IL－6、IL－8、TNF－α水平比較（±s）

組別 n IL－6（pg／mL） IL－8（ng／mL）TNF－α（ng／mL）進(jìn)展性腦梗死組38 118.10±51.09 0.86±0.31 0.96±0.34非進(jìn)展性腦梗死組 90 95.59±44.40 0.64±0.40 0.86±0.32 P 0.014 0.002 0.141

2.3Logistic回歸分析 只有IL－8、纖維蛋白原（FIB）、血糖進(jìn)入到最后的回歸模型，這表明IL－8、FIB、血糖對腦梗死的進(jìn)展與否的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，IL－8、FIB、血糖的參數(shù)估計(jì)值的符號均為正，可認(rèn)為它們是預(yù)示腦梗死發(fā)生進(jìn)展的危險(xiǎn)信號。從其比數(shù)比上看出，在因素FIB、血糖固定不變時(shí)，因素IL－8的水平每增加一個(gè)等級（1ng／mL）所引起的腦梗死發(fā)生進(jìn)展的近似相對危險(xiǎn)度為增加前的3.754倍；在因素IL－8、血糖固定不變時(shí)，因素FIB每增加一個(gè)等級（1g／L）所引起的腦梗死發(fā)生進(jìn)展的近似相對危險(xiǎn)度為增加前的1.944倍；在因素IL－8、FIB固定不變時(shí)，因素血糖每增加一個(gè)等級（1mmol／L）所引起的腦梗死發(fā)生進(jìn)展的近似相對危險(xiǎn)度為增加前的1.166倍。對腦梗死發(fā)生進(jìn)展的相對貢獻(xiàn)：IL－8＞FIB＞血糖。詳見表3。

表3 進(jìn)展性腦梗死組Logistic回歸分析

3 討 論

炎癥免疫因子是免疫活性細(xì)胞產(chǎn)生的一系列免疫調(diào)節(jié)因子，在機(jī)體防御疾病及損傷修復(fù)過程中具有重要作用，但炎癥免疫因子產(chǎn)生過多又可加重組織損傷。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，大量的證據(jù)表明炎癥在急性腦梗死的病理生理過程中起重要作用，大多數(shù)的炎癥反應(yīng)由細(xì)胞因子所介導(dǎo)，細(xì)胞因子在缺血性腦血管病中的作用已引起眾多學(xué)者的關(guān)注。

進(jìn)展性腦梗死患者臨床癥狀進(jìn)行性加重的病理生理機(jī)制還不太清楚，盡管有一些臨床的、放射學(xué)的和生化因素被認(rèn)為與早期的神經(jīng)功能惡化有關(guān)，但是預(yù)測價(jià)值大多較低。本課題重點(diǎn)研究進(jìn)展性腦梗死的細(xì)胞因子方面的改變，其結(jié)果顯示，進(jìn)展性腦梗死患者炎癥免疫因子有較為顯著的異常，進(jìn)一步證實(shí)炎癥免疫機(jī)制參與腦梗死的發(fā)生發(fā)展。研究表明，血清IL－6是一種在機(jī)體防御、急相反應(yīng)、免疫反應(yīng)和造血反應(yīng)等過程中起重要作用的多效細(xì)胞因子，與缺血性卒中的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［1］。一方面，IL－6作為神經(jīng)保護(hù)因子和神經(jīng)營養(yǎng)因子，對缺血后的腦損傷具有保護(hù)作用。在腦室內(nèi)注射重組的IL－6可明顯降低缺血后腦損傷［2］；另一方面，眾多研究也表明，IL－6作為一種重要的炎癥介質(zhì)，在缺血性腦損傷的腦組織中顯著增高、過度表達(dá)可能參與繼發(fā)性腦損傷的過程。有研究表明缺血性卒中患者血清IL－6水平與體溫、血糖、纖維蛋白原以及梗死體積高度相關(guān)，回歸分析證實(shí)血清中IL－6水平為早期臨床癥狀加重的獨(dú)立因素［3］。本研究結(jié)果亦顯示，進(jìn)展性腦梗死組在臨床癥狀惡化前其血清IL－6水平明顯高于非進(jìn)展性腦梗死組，提示IL－6參與局灶性腦缺血后的急性反應(yīng)，與早期的臨床癥狀加重有關(guān)，可以作為預(yù)測腦梗死進(jìn)展的血清學(xué)指標(biāo)。IL－8主要生物學(xué)功能是在炎癥反應(yīng)過程中趨化中性粒細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞。在本次研究中，同樣發(fā)現(xiàn)IL－8在腦梗死患者血清中含量明顯增高，尤其在進(jìn)展性腦梗死患者中尤為突出，經(jīng)回歸分析證實(shí)，其為腦梗死進(jìn)展惡化的危險(xiǎn)因素，是否可通過降低IL－8的活性或拮抗其功能而逆轉(zhuǎn)腦梗死的進(jìn)展，成為擺在我們面前的新課題。作為一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，TNF－α在腦缺血損傷中的作用日益受到人們的重視，但對于其是加重缺血神經(jīng)元損傷還是保護(hù)神經(jīng)元免受損傷還存在爭論。一方面認(rèn)為，TNF－α作為一種促炎癥細(xì)胞因子在腦缺血損傷中發(fā)揮重要作用。但是近年來，也有研究提示TNF－α在急性腦損傷中可能具有神經(jīng)保護(hù)作用。不少實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，預(yù)先應(yīng)用TNF－α可提高腦缺血耐受性，達(dá)到與缺血預(yù)處理相同的神經(jīng)保護(hù)效果［4，5］。本研究結(jié)果顯示，TNF－α在腦梗死患者血清中的含量明顯增高，說明TNF－α參與了腦缺血的炎癥反應(yīng)，與國外的報(bào)道相一致，提示TNF－α在腦梗死的發(fā)生發(fā)展中有重要的作用，但是在進(jìn)展性腦梗死組的研究中，未見明顯增高趨勢，回歸分析亦不提示為進(jìn)展性卒中的危險(xiǎn)因素，說明TNF－α水平與缺血性卒中神經(jīng)功能惡化的關(guān)系不明顯。

高水平的IL－6、IL－8、TNF－α在腦梗死的發(fā)病中具有重要作用，特別是IL－8是進(jìn)展性腦梗死發(fā)生發(fā)展的重要因素。腦卒中后機(jī)體免疫反應(yīng)參與并加重局部腦損傷，各種細(xì)胞因子間相互聯(lián)系、相互依賴并且可能有互相拮抗，形成復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)。對炎癥因子在腦梗死發(fā)病中作用的研究，特別是進(jìn)展性腦梗死及其關(guān)系的研究，有助于揭示腦梗死發(fā)病以及其神經(jīng)功能惡化的病理生理過程，并為臨床防治進(jìn)展性腦梗死發(fā)生和減輕其急性期應(yīng)激反應(yīng)、保護(hù)缺血神經(jīng)元提供一定的理論依據(jù)。

［1］劉清閣，邊連防，陳曉紅，等.腦梗死急性期血清IL－6、IL－8動(dòng)態(tài)變化及其與腦梗死病情、預(yù)后的相關(guān)研究［J］.中國醫(yī)師進(jìn)修雜志（內(nèi)科版），2006，29（9）：28－30；54.

［2］Oleksowicz L，Mrowiec Z，Zuckerman D，etal.Platelet activation induced by interleukin－6：Evidence for a mechanism involving arachidonic acid metabolism ［J］.Thrombosis ＆ Haemostasis，1994，72（2）：302－308.

［3］Matsumoto T，Ikeda K，Mukaida N，etal.Prevention of cerebral edema and infarct in cerebral reperfusion injury by an antibody to interleukin－8［J］.Lab Invest，1997，77：119－125.

［4］Gadre E，Lassen NA.Apoplexy with rapidly deteriorating symptoms stroke in progression：Hemodynamic and clinical aspect［J］.Ugeskr Laeger，1995，157：233－234.

［5］Linsberh PJ，Roine RO.Hyperglycemia in acute stroke［J］.Stroke，2004，35（2）：363－364.