川崎病患兒基質(zhì)金屬蛋白酶-9變化及其與心功能關(guān)系的研究

張?jiān)P 馬少春 喬凌燕

川崎病患兒基質(zhì)金屬蛋白酶-9變化及其與心功能關(guān)系的研究

張?jiān)P 馬少春 喬凌燕

目的 通過對川崎病患兒血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平的測定,探討MMP-9與川崎病（KD）及其冠狀動(dòng)脈損害(CAL)發(fā)生的關(guān)系，以及與心功能的關(guān)系。方法 以2008年8月～2011年2月在青島市兒童醫(yī)院住院的KD患兒37例為研究對象，20例健康兒童(正常對照組)，采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測血清MMP-9，并行心臟彩色多普勒超聲(UCG)檢測冠狀動(dòng)脈內(nèi)徑及左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)，據(jù)內(nèi)徑進(jìn)行分組。結(jié)果 急性期KD患兒的血清MMP-9（488±69μg/L）較對照組（73±27μg/L）均顯著增高(P<0.01)，冠狀動(dòng)脈病變組患兒血清MMP-9（726±83μg/L）較非冠狀動(dòng)脈病變組（294±57 μg/L）增高更為顯著(P<0.01)；恢復(fù)期冠狀動(dòng)脈病變組血清MMP-9（212±36μg/L）雖較急性期顯著下降，但仍顯著高于非冠狀動(dòng)脈病變組患兒（82±26 μg/L） (P<0.01)；KD患兒血清MMP-9水平與LVEF呈負(fù)相關(guān)(r=-0.407，P<0.05)。結(jié)論 MMP-9在KD急性期尤其伴CAL時(shí)表達(dá)顯著增高，能夠反映KD患兒冠狀動(dòng)脈損害的程度，與LVEF結(jié)合可估計(jì)患兒病情及預(yù)后。對于KD早期MMP-9異常增高而彩超顯示尚無CAL發(fā)生的患兒，應(yīng)盡早正規(guī)治療，以防止CAL的發(fā)生或減輕冠狀動(dòng)脈的損害程度。

川崎??；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；冠狀動(dòng)脈損害；左心室射血分?jǐn)?shù)

皮膚黏膜淋巴結(jié)綜合征又稱川崎?。╧aw asak i d isease，KD），其最嚴(yán)重的并發(fā)癥是心血管系統(tǒng)病變[1]，尤其以冠狀動(dòng)脈損害（coronary artery lesions，CAL）最常見，是導(dǎo)致患兒死亡的主要原因，因此對其早期診斷及治療尤為重要。近年來發(fā)現(xiàn)，基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）在川崎病冠狀動(dòng)脈病變的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。本研究通過對37例KD患兒MMP-9水平的檢測，并與心功能行相關(guān)性分析，探討MMP-9的檢測在KD患兒中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 KD組：選取2008年8月～2011年2月在青島市兒童醫(yī)院住院的KD患兒37例，男25例，女12例；年齡5個(gè)月～7歲，平均（30.3±4.6）個(gè)月，所有患兒的診斷、病程分期及冠狀動(dòng)脈病變分度標(biāo)準(zhǔn)均符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》第7版中的診斷、分期和冠狀動(dòng)脈病變分度標(biāo)準(zhǔn)[2],均排除心力衰竭、心肌炎、腎臟疾病、骨骼肌損傷等，入院前未接受過靜脈丙種球蛋白及阿司匹林等治療。確診后24h、發(fā)病3周后分別行心臟彩色多普勒超聲檢查，測量冠狀動(dòng)脈內(nèi)徑及左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）。合并冠狀動(dòng)脈病變組患兒15例，其中冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張（CAA）11例，冠狀動(dòng)脈瘤（CAD）形成4例；無冠狀動(dòng)脈病變組22例。入院后37例均接受靜脈丙種球蛋白及阿司匹林聯(lián)合治療。正常對照組：選取我院同時(shí)期兒保門診健康查體兒童20例，其中男13例，女7例，年齡7個(gè)月～6歲，平均（29.2±7.4）個(gè)月。兩組患兒性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法 川崎病組：急性期（確診后24h內(nèi)，使用靜脈免疫球蛋白及阿司匹林前）、恢復(fù)期（病程3～4周）晨起抽取空腹靜脈抗凝血3m L送檢，標(biāo)本抽取后于30m in內(nèi)送檢驗(yàn)科，3000r/m in離心10m in留取血清，冷凍于-80℃冰箱中備用。對照組：正常健康查體兒童于清晨抽取空腹血3m L，標(biāo)本處理方法與川崎病組相同。MMP-9檢測采用試劑盒由美國R&D公司提供的雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，所有計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，方差不齊采用t’檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用直線相關(guān)分析法。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 KD患兒與正常對照組兒童血清MM P-9水平的比較 KD患兒急性期冠狀動(dòng)脈病變組急性期（15例）MM P-9（726±83）μg/L，恢復(fù)期（15例）（212±36）μg/L，KD患兒非冠狀動(dòng)脈病變組急性期（22例）（294±57）μg/L，恢復(fù)期（22例）（82±26）μg/L，正常對照組（20例）（73±27）μg/L。KD患兒急性期冠狀動(dòng)脈病變組與非冠狀動(dòng)脈病變組血清MM P-9水平均較正常對照組明顯增高（t’＝29.34，P<0.01；t’＝16.24，P<0.01），且冠狀動(dòng)脈病變組比非冠狀動(dòng)脈病變組增高更為顯著（t=18.79，P<0.01）。KD患兒冠狀動(dòng)脈組恢復(fù)期MMP-9水平明顯低于急性期，但仍顯著高于正常對照組（t=13.22，P<0.01），非冠狀動(dòng)脈組恢復(fù)期降至正常水平（t=1.14，P>0.05）。

2.2 KD患兒急性期與恢復(fù)期LVEF的比較 急性期LVEF明顯低于恢復(fù)期，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.22，P<0.01），見表1。

表1 川崎病患兒急性期與恢復(fù)期LVEF的比較()

表1 川崎病患兒急性期與恢復(fù)期LVEF的比較()

組別 例數(shù) LVEF（%） MMP-9（μg/L）急性期 37 60.4±4.58 488±69恢復(fù)期 37 65.7±6.12 113±38

2.3 KD患兒MMP-9水平與LVEF的相關(guān)性分析 急性期MMP-9與LVEF呈負(fù)相關(guān)（r=-0.407，P<0.05），而恢復(fù)期LVEF多已恢復(fù)正常，二者之間無明顯相關(guān)性（r=-0.113，P>0.05）。

3 討論

近幾年來，文獻(xiàn)報(bào)道，KD已取代風(fēng)濕熱，成為后天性心臟病患兒中最常見的病因，發(fā)病率呈上升趨勢[3]，并可能成為KD患兒成年后出現(xiàn)缺血性心臟病的危險(xiǎn)因素之一[4]。KD的主要危險(xiǎn)在于其心血管系統(tǒng)并發(fā)癥，尤其是CAL，探討其發(fā)生的有關(guān)因素有利于及早防治并評估預(yù)后。許多研究發(fā)現(xiàn)[5]，KD患兒在其病程的各時(shí)期都有可能存在不同程度的CAL和心肌缺血，同時(shí)也出現(xiàn)了許多用來評價(jià)CAL和心肌缺血程度的檢查、檢驗(yàn)項(xiàng)目。如能發(fā)現(xiàn)提示患兒早期冠狀動(dòng)脈、心肌的損害的較特異的生化指標(biāo)，并盡早加以干預(yù)，將有可能使KD患兒的生存率和生活質(zhì)量明顯提高。

KD是一種以全身性血管炎為主要病變的急性小兒疾病。日本MCLS研究委員會(huì)的總結(jié)顯示[2]，病理形態(tài)學(xué)上，中等動(dòng)脈尤其是冠狀動(dòng)脈病變最嚴(yán)重。CAL的發(fā)病機(jī)制尚不明了，但其病理基礎(chǔ)已較明確，其主要為ECM的降解、血管中膜的變薄、動(dòng)脈透壁性炎癥、細(xì)胞的凋亡與遷移、內(nèi)彈性膜的破壞、血管結(jié)構(gòu)的重建，所致早期冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張和冠狀動(dòng)脈瘤及血栓的形成，冠狀動(dòng)脈晚期形成狹窄、梗阻及瘢痕。Gav in等[6]的研究進(jìn)一步證實(shí)了KD是全身系統(tǒng)性的血管炎，并提示了KD患者中MMP-9可能發(fā)揮了較重要的作用，其經(jīng)von Gieson’s染色發(fā)現(xiàn)，在KD急性期，MMP-9的免疫定位不僅于冠狀動(dòng)脈瘤內(nèi)，同時(shí)于心肌及未受炎性侵犯的冠狀動(dòng)脈血管壁中也存在，而在非KD患者中其MMP-9染色均為陰性。

目前已發(fā)現(xiàn)的MMPs有20余種，其是一類內(nèi)源性蛋白水解酶家族，依賴于鋅、鈣離子，MMPs合成和分泌主要來源于成纖維、內(nèi)皮、平滑肌等細(xì)胞。ECM的合成和降解存在MMPs的參與，使其在諸多的心血管疾病中發(fā)揮著重要作用[7]。其中MMP-9屬于明膠酶，可降解Ⅳ、Ⅴ型膠原及明膠，參與血管壁細(xì)胞的損傷、退化及其重塑等一系列病理過程[8-9]，與心肌病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、腹主動(dòng)脈瘤、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病的病理過程也有著緊密聯(lián)系。近年來的多項(xiàng)研究表明[10-11]，在KD合并CAL中，外周血中MMP-9水平明顯升高。

本研究結(jié)果顯示，KD急性期CAL組患兒血清MMP-9水平較NCAL組及對照組明顯增高，提示這一時(shí)期血清MMP-9水平越高，KD冠狀動(dòng)脈病變程度越重，其血管壁破壞越嚴(yán)重，血管進(jìn)而重建，發(fā)生CAL的可能性也越大。在經(jīng)過丙種球蛋白及阿司匹林等正規(guī)治療后，KD患兒NCAL組血清MMP-9水平在恢復(fù)期明顯下降，與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而冠狀動(dòng)脈病變組經(jīng)治療后，其恢復(fù)期血清MMP-9水平較急性期降低，但仍顯著高于非冠狀動(dòng)脈病變組患兒恢復(fù)期及對照組，早有研究顯示早期丙種球蛋白及阿司匹林治療可有效降低冠狀動(dòng)脈瘤的發(fā)生率，本研究也提示了丙種球蛋白等可有效下調(diào)血清MMP-9水平，進(jìn)一步證實(shí)了此論點(diǎn)，但提示雖然恢復(fù)期患兒臨床癥狀有所改善，但KD對于心血管的炎性病理損傷仍持續(xù)存在，MMP-9水平的持續(xù)的高表達(dá)，可加劇KD冠狀動(dòng)脈的炎性反應(yīng)，在CAL的發(fā)生過程中起重要作用。血清MMP-9水平增高是CAL的危險(xiǎn)因素之一。

心功能不全的患者的MMP-9水平也會(huì)增高。孫云鵬等[12]觀察了80例心力衰竭患者，結(jié)果心力衰竭組MMP-9水平明顯高于正常對照組，兩者呈正相關(guān)，與心功能紐約分級（NYHA）程度呈正相關(guān),與LVEF呈負(fù)相關(guān)，MMP-9水平能較好地反映心功能不全的嚴(yán)重程度和左心室的功能。本研究結(jié)果同時(shí)顯示，急性期與恢復(fù)期KD患兒，二者LVEF差異存在明顯，而KD患兒血清MMP-9水平與LVEF呈負(fù)相關(guān)，提示KD患兒可能存在心功能的下降，而且血清MMP-9水平越高，LVEF水平越低，二者結(jié)合對于KD患兒的病情及預(yù)后的評估及臨床治療的指導(dǎo)有較高的應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，MM P-9在KD CA L的形成中起重要作用，對于早期診斷KD及預(yù)測CAL的發(fā)生發(fā)展有一定的臨床意義，對于KD早期MMP-9異常增高而彩超顯示尚無CAL發(fā)生的患兒，應(yīng)盡早給予丙球及阿司匹林等正規(guī)治療，以防止CA L的發(fā)生或減輕冠狀動(dòng)脈的損害程度，可提高患兒生存率和生活質(zhì)量。MMP-9水平與LVEF呈負(fù)相關(guān)，二者結(jié)合可評估患兒病情嚴(yán)重程度及轉(zhuǎn)歸，指導(dǎo)臨床治療。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2012.26.056

266034 山東省青島市婦女兒童醫(yī)院內(nèi)一科 （張?jiān)P 馬少春喬凌燕）