副腫瘤神經(jīng)癥自身抗體檢測試劑盒初步應(yīng)用及意義

虞喜豪 姜曉華 周炳榮 丁 姍

解放軍八五醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，上海 200052

副腫瘤神經(jīng)綜合征（paraneoplastic syndrome of the nerves system，PNSNS）主要是指在某些惡性腫瘤患者中出現(xiàn)的非腫瘤轉(zhuǎn)移所致的機體神經(jīng)系統(tǒng)及相關(guān)神經(jīng)肌肉系統(tǒng)出現(xiàn)的病變及相應(yīng)綜合征，其發(fā)生率在不同腫瘤及腫瘤類型中均有不同。該癥多見于小細胞肺癌、乳腺瘤、淋巴瘤、婦科腫瘤、胰腺癌等，其中，以肺癌及卵巢癌略高。此癥雖總體發(fā)病率不高，但造成的神經(jīng)損害及出現(xiàn)的臨床表現(xiàn)往往較腫瘤本身更早。該癥發(fā)病機制尚不完全清楚，多數(shù)文獻表明可能與腫瘤相關(guān)抗原，與神經(jīng)系統(tǒng)的組織細胞抗原的交叉免疫原存在所致，與自身免疫反應(yīng)有關(guān)，其中，抗Hu、抗R1及抗CV2抗體等被認為與PNSNS發(fā)病有較確切關(guān)聯(lián)。國內(nèi)相關(guān)檢測已有較多報道[1]，但方法及所用制劑多為自制，且不統(tǒng)一，不適宜臨床簡捷常規(guī)使用。為此，筆者利用德國弗賴堡公司最新研發(fā)PNS抗體檢測試劑盒對常見腫瘤患者且未明確出現(xiàn)相關(guān)神經(jīng)癥的患者血清予以測定，初步驗證對臨床常見腫瘤患者可能潛在發(fā)生PNSNS的陽性率及該項檢測在預(yù)測及篩查PNSNS中的價值意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年12月～2011年4月常規(guī)送檢的常見腫瘤患者5例，分別為肺癌、乳腺癌、直腸癌、胰腺癌、肝癌，其中，男性2例、女性3例，平均年齡61.2歲。所有診斷均經(jīng)影像學、血液學相關(guān)檢測及病理檢查予以確認。

1.2 抗體采集

抽取患者靜脈血 3～5 mL，4 000 r/min離心15 min，取上清液、分裝置-80℃冰箱保存待檢。

1.3 檢測材料及方法

采用德國弗賴堡RAVD DIAGNOSTIKA公司提供PNSNS相關(guān)抗體檢測試劑盒，該試劑盒組成：（1）包被有重組抗原蛋白（HuD.Y0.R2 CV2，囊泡素及 Ma1.Ma2）醋酸纖維素條；（2）對照掃描樣本濃縮洗滌液、稀釋液；（3）即用型堿性磷酸酶交聯(lián)抗人 IgG及相關(guān)陽性對照液；（4）底物溶液以及若干孵育管。

1.4 方法

按常規(guī)標準醋酸纖維素膜免疫印跡法 （western blot）測定：每名患者血清稀釋度為1∶2 000，其中2例患者（為乳腺癌及肺癌）血清設(shè)復孔（雙條）（標本血清稀釋度分別為1∶200及1∶2 000）。以標準陽性對照帶為參照，其分別為抗Y0、抗Hu、抗 R2 及 CV2、囊泡素，Ma1、Ma2。

2 結(jié)果

5例患者及對照共8份血清抗體分為1～8號測試條帶，其中，1號為陽性對照（由起始線依次分別為抗Y0、抗Hu、抗R2 及 CV2、囊泡素，Ma1、Ma2 抗體顯示帶）。 2、3 號及 4、5 號條分別為兩不同患者不同稀釋度結(jié)果，6、7、8號條帶為另3名患者1∶2 000檢測結(jié)果。一患者標本（4、5號條）抗CV2抗體雙帶均顯示陽性。該患者為病理確認的小細胞肺癌患者。另各陽性對照顯示條清晰、準確。具體測試結(jié)果見圖1。

3 討論

PNSNS是一類既非腫瘤病灶直接侵襲壓迫產(chǎn)生，也非腫瘤灶造成的異位內(nèi)分泌、代謝紊亂、繼發(fā)感染，組織灌流障礙以及化放療所致、副反應(yīng)而產(chǎn)生的以中樞或外周神經(jīng)系統(tǒng)損害的疾病[1]。目前對于機體產(chǎn)生此癥的確切機制尚不完全清楚，但較一致的觀點為多類特異抗神經(jīng)元的自身免疫性抗體（specific neuronal antibody，SNA）產(chǎn)生的自身免疫反應(yīng)在其中發(fā)揮重大作用[2]。PNSNS在惡性腫瘤的發(fā)病率約1%[3]，而在小細胞肺癌、卵巢癌等更多伴發(fā)PNSNS的腫瘤中比例可能更高[4]。相關(guān)免疫性抗體在腫瘤患者中的測定，不僅對于合理、準確診斷患者PNSNS有重要意義，而且可以為盡早預(yù)防和必要干預(yù)PNSNS提供依據(jù)。國內(nèi)有學者研究報道[5]，相關(guān)特異神經(jīng)元抗體診斷PNSNS特異性可達72.5%，敏感度為95%。而采用PET-CT聯(lián)合檢測,尤其在有其他腫瘤標志物陽性者中，可進一步提高腫瘤檢出率[6]。在抗體測定陽性患者中有近1/3存在多種抗體[7]，因此，不論是在已有PNS癥狀中去預(yù)測或發(fā)現(xiàn)潛在腫瘤的可能，或抑在已知腫瘤患者中通過測定特異抗體來反映出現(xiàn)PNSNS的概率，并指導診療等方面，都應(yīng)同時檢測多類PNSNS相關(guān)抗體。本快檢試劑盒中纖維素條包被有多類免疫原蛋白，高效、完備。神經(jīng)組織細胞是高度分化、保守的細胞，由于各種原因一旦受損嚴重或持續(xù)時間較長，出現(xiàn)不可逆損害則功能將難以修復。有報道表明，在確認PNSNS患者中，雖經(jīng)必要抗腫瘤治療及免疫抑制治療，僅有約10%患者的神經(jīng)癥狀有較明好轉(zhuǎn)[8]。故PNS總體療效欠佳，其原因除機制可能尚存不清外，神經(jīng)細胞受自身免疫等因素損害已致不可逆損傷有關(guān)。所以，在腫瘤患者的診治中，除常規(guī)腫瘤的治療外，不應(yīng)忽視PNSNS及相關(guān)抗體測定，及時進行干預(yù)性治療，不僅可緩解腫瘤患者的神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀，也是提高腫瘤患者的生存質(zhì)量、延長生存期的重要舉措。

本文利用德國新近研發(fā)的PNSNS抗體檢測試劑盒，對幾種常見腫瘤患者血清進行相關(guān)抗體初步測定，是基于上述原因的有益嘗試。結(jié)果顯示，5類腫瘤中，有一小細胞肺癌患者（SCLC）檢測陽性，該患者為男性，診斷為肺癌近5年，伴有肢體乏力、麻木、陣發(fā)癲癇及腔隙性腦梗死等神經(jīng)系統(tǒng)損害病變及癥狀，測出抗體陽性（為抗CV2）。抗CV2抗體是除抗Hu等抗體外最為常見PNSNS相關(guān)抗體，其對應(yīng)抗原（66KDa的CV2蛋白）位于神經(jīng)元胞漿，多見于少竇腦質(zhì)細胞、視網(wǎng)膜及視神經(jīng)細胞周圍神經(jīng)中。比較而言，SCLC存在PNSNS及自身神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)抗體可能概率較大，與已往報道一致[3-4]。由于測試制劑有限，選取患者數(shù)量較少，尚難得出準確結(jié)論，待進一步檢測統(tǒng)計。相信今后，在腫瘤患者中開展PNSNS的診斷及相關(guān)抗體測定篩查，對腫瘤防治將是一項有價值工作。而且，使用此類專用檢測試劑盒快速、便捷、實用性好。

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[5]王剛，陳齊鳴，朱莉，等.特異性神經(jīng)元抗體對神經(jīng)系統(tǒng)副腫瘤綜合癥篩檢價值的研究[J].中國神經(jīng)精神疾病雜志，2004，30（3）：165-168.

[6]關(guān)志偉，徐白萱，王瑞民，等.18F-FDG PET-CT檢測神經(jīng)系統(tǒng)副腫瘤綜合癥疑似患者惡性腫瘤應(yīng)用價值[J].中華神經(jīng)醫(yī)學雜志，2011，10（1）：88-89.

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