2006-2010年我院臨床分離大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐藥性監(jiān)測(cè)

吳彪，符娟，符健，蔡篤運(yùn)，黃春新，林鋒，賈杰

（海南省人民醫(yī)院，海南?？?70311）

2006-2010年我院臨床分離大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐藥性監(jiān)測(cè)

吳彪，符娟，符健，蔡篤運(yùn)，黃春新，林鋒，賈杰

（海南省人民醫(yī)院，海南海口570311）

目的分析2006-2010年我院臨床分離的大腸埃希菌1 722株和肺炎克雷伯菌872株對(duì)常用抗菌藥物耐藥性的變遷情況。方法采用VITEK-32全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)對(duì)大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌鑒定并行藥敏試驗(yàn)，應(yīng)用WHONET5.4軟件對(duì)藥敏結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。結(jié)果2006-2010年從臨床送檢的標(biāo)本中共分離出大腸埃希菌1 722株和肺炎克雷伯菌872株，兩種細(xì)菌對(duì)常用的多種抗菌藥物，特別是3代頭孢菌素產(chǎn)生相當(dāng)程度的耐藥性，僅對(duì)美洛培南敏感性較好。結(jié)論臨床應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，合理選用抗菌藥物，防止醫(yī)院感染。

大腸埃希菌；肺炎克雷伯菌；耐藥性；監(jiān)測(cè)；超廣譜β-內(nèi)酰氨酶

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是臨床常見菌，又是重要的院內(nèi)獲得性感染的重要病原菌，其耐藥性的變遷和現(xiàn)狀倍受人們的關(guān)注。為了解我院產(chǎn)ESBLs菌的發(fā)生率和耐藥性特點(diǎn)，以控制產(chǎn)ESBLs菌的傳播和流行，我們對(duì)2006-2010年從臨床各標(biāo)本中分離出的大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌進(jìn)行了ESBLs檢測(cè)，并分析其耐藥性變遷狀態(tài)，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 材料與方法

1.1 菌株來源2006-2010年我院臨床各類臨床標(biāo)本（包括痰、尿、血、膽汁、膿液、腹水、糞便等）分離出大腸埃希菌1 722株和肺炎克雷伯菌872株（剔除同一患者相同部位的重復(fù)菌株）。標(biāo)準(zhǔn)菌株為大腸埃希菌ATCC 25922、ATCC 35218(ESBLs產(chǎn)生株)和肺炎克雷伯菌ATCC 700603(ESBLs產(chǎn)生株)。

1.2 藥物敏感試驗(yàn)遵循2001年NCCLS標(biāo)準(zhǔn)[1]，采用VITEK-32型全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定、藥敏分析及ESBLs檢測(cè)，VITEK-32型全自動(dòng)微生物分析儀及藥敏試劑均為法國BioMerieux公司產(chǎn)品。ESBLs菌株的確證采用雙紙片法，抗菌藥物紙片為頭孢噻肟/克拉維酸(30/10 μg)和頭孢他啶/克拉維酸(30/10 μg)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用WHONET5.4軟件對(duì)患者首次分離的大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌進(jìn)行耐藥性分析及統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果

2.1 2006-2010年大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的分離率2006-2010年我院大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌總的分離率相對(duì)穩(wěn)定，大腸埃希菌的分離率波動(dòng)于10%～12%之間，肺炎克雷伯菌的分離率波動(dòng)于3%～7%之間，在2009年、2010年后者的分離率有上升趨勢(shì)，見表1。

2.2 2006-2010年大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs產(chǎn)酶率2006-2010年我院分離的1 722株大腸埃希菌和872株肺炎克雷伯菌中，產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的檢出率分別為44.4%和29.0%，近3年來（2008年、2009年、2010年）ESBLs的檢出率較2006年、2007年有下降趨勢(shì)，見表2。

表1 2006-2010年大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分離率

表2 2006-2010年大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs產(chǎn)酶率

2.3 大腸埃希菌2006-2010年的耐藥性變遷大腸埃希氏菌2006-2010年對(duì)3代頭孢菌素及左氧氟沙星等藥物的耐藥率大多都在50%以上，已失去臨床應(yīng)用價(jià)值，3代頭孢菌素/β內(nèi)酰胺酶抑制劑的復(fù)合劑及阿米卡星耐藥性也逐年增加，但穩(wěn)定于20%以下，臨床尚可應(yīng)用，唯碳青霉烯類美洛培南敏感性仍高，見表3。

表3 大腸埃希菌對(duì)18種抗菌藥物的耐藥率

2.4 肺炎克雷伯菌2006-2010年的耐藥性變遷肺炎克雷伯菌2006-2010年對(duì)3代頭孢菌素及左氧氟沙星的耐藥率均較高，已失去臨床應(yīng)用價(jià)值，對(duì)3代頭孢菌素/β內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑及阿米卡星有一定的敏感性，對(duì)碳青霉烯類美洛培南尚屬敏感，見表4。

表4 肺炎克雷伯菌對(duì)18種抗菌藥物的耐藥率

3 討論

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是引起社區(qū)和院內(nèi)感染的重要細(xì)菌，本研究顯示大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的分離率在5年內(nèi)保持相對(duì)穩(wěn)定，分離率分別為11.1%和5.6%。

本調(diào)查表明大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南等藥物耐藥率較高，可能與細(xì)菌產(chǎn)生ESBLs有關(guān)。ESBLs是絲氨酸蛋白酶的衍生物，存在于細(xì)菌中，是細(xì)菌染色體外的蛋白質(zhì)，主要由大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌屬產(chǎn)生[2]。ESBLs不僅能分解頭孢菌素類和青霉素類抗生素，而且能分解單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素，使這些抗菌藥物失去抗菌活性，但它能被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑所抑制，故應(yīng)用3代頭孢菌素/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑尚有一定療效。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌耐藥質(zhì)粒不僅攜帶ESBLs耐藥基因，同時(shí)具有氨基糖苷類、氟喹諾酮類藥物的耐藥基因，不但可導(dǎo)致ESBLs在細(xì)菌間的傳播，還可導(dǎo)致氨基糖苷類、氟喹諾酮類和磺胺類藥物在細(xì)菌間的交叉耐藥[3-4]，產(chǎn)生多重耐藥菌株，成為醫(yī)院感染的重要病原菌，給感染的臨床治療帶來更大困難。

我院近5年來在分離出大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中，產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分別為44.4%和29.0%，與陳梅莉等[5]的報(bào)道（47.6%和20.1%）相近，明顯高于姚興偉等[6]的檢測(cè)結(jié)果（15.6%和8.5%），低于Mohnarin 2009年度報(bào)告：中南地區(qū)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)[7]的報(bào)道（60.9%和46.8%）。出現(xiàn)地區(qū)差異的主要原因可能與各地抗菌藥物使用的品種數(shù)量及用藥習(xí)慣不同有關(guān)。ESBLs菌株的產(chǎn)生和流行與臨床上大量使用廣譜β-內(nèi)酰胺抗菌藥物特別是3、4代頭孢菌素密切相關(guān)，同時(shí)住院患者間的交叉感染、長期住院也是獲得ESBLs感染的危險(xiǎn)因素。

既往臨床上治療腸桿菌科細(xì)菌感染多用氟喹諾酮類藥物，近年來其耐藥率有增高趨勢(shì)。本調(diào)查表明我院大腸埃希菌對(duì)左氧氟沙星的耐藥率已維持在40%～60%，肺炎克雷伯菌對(duì)左氧氟沙星的耐藥率自2006年的19.1%增至2010年的34.0%，耐藥率上升尤為明顯。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)左氧氟沙星耐藥性嚴(yán)重，歸結(jié)于20多年來，廣泛使用該抗菌藥物的結(jié)果。其次，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中存在氟喹諾酮類耐藥基因的質(zhì)粒傳播，導(dǎo)致耐藥菌株的增多。現(xiàn)在氟喹諾酮類對(duì)治療產(chǎn)ESBLs的腸桿菌科細(xì)菌感染已失去價(jià)值。

氨基糖苷類抗菌藥物屬高效、廣譜抗菌藥物，被認(rèn)為適用于治療大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌感染。本調(diào)查中，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)慶大霉素高度耐藥；而對(duì)阿米卡星的耐藥率較低。形成這種敏感性差異的主要原因可能是這些菌株攜帶了不同的氨基糖苷類修飾酶基因，其中，阿米卡星經(jīng)過結(jié)構(gòu)改造、對(duì)修飾酶具有一定穩(wěn)定性有關(guān)，因此其耐藥率遠(yuǎn)低于慶大霉素[8]。

目前碳青霉烯類抗菌藥物是治療產(chǎn)ESBLs菌感染的首選藥物，目前已成為臨床上治療產(chǎn)ESBLs菌感染的最后一道防線，我院大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)美羅培南仍保持著較高的敏感性，但耐藥率分別由2006年的1.3%和0.0%上升至2010年的3.2%和0.6%，這可能由于碳青霉烯類抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，造成其耐藥菌株逐漸產(chǎn)生，其主要的耐藥機(jī)制是產(chǎn)生了碳青霉烯酶；而臨床常規(guī)藥敏試驗(yàn)方法，無法將其檢測(cè)出來[9]。臨床應(yīng)引起足夠重視，并有待于進(jìn)一步研究。

綜上所述，臨床不適當(dāng)?shù)厥褂玫?代頭孢菌素和氟喹諾酮類藥物是導(dǎo)致大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌高耐藥率的主要原因。因此，臨床醫(yī)師應(yīng)嚴(yán)格掌握抗菌藥物的適應(yīng)證，盡可能依據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用藥物。同時(shí)，應(yīng)該積極采取有效防范措施，避免或減少醫(yī)院感染的發(fā)生，對(duì)已經(jīng)發(fā)生的醫(yī)院感染，做好細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測(cè)，合理用藥，以減少ESBLs陽性菌和多重耐藥菌株的產(chǎn)生和播散。

[1]National Committee for Clinical Laboratory standards.Performance standards for antimicrobial susceptibility tests[J].NCCLS,2001,21 (1)：40-45.

[2]張玲,黃留玉.革蘭陰性桿菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶研究進(jìn)展[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2008,18(6)：897-900.

[3]王忠永,李響新,呂美艷,等.革蘭陰性桿菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶基因分型及耐藥相關(guān)性研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2010,20 (16)：2361-2364.

[4]Jacoby GA,Han P.Detection of extended-spectrum beta-lactamases in clinical isolates ofKlebsiella pneumoniaeandEscherichia coli[J]. J Cli Microbiol,1996,34(4)：908-911.

[5]陳梅莉,馬友正.臨床分離主要革蘭陰性桿菌分布及耐藥性監(jiān)測(cè)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2011,21(5)：986-987.

[6]姚興偉,李慧萍,楊曦明.153株大腸埃希菌和84株肺炎克雷伯菌耐藥性分析[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2010,28(4)：318.

[7]李麗,田磊,張蓓,等.Mohnarin 2009年度報(bào)告：中南地區(qū)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)[J].中國臨床藥理學(xué)雜志,2011,27(7)：533-539.

[8]張淑清.產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對(duì)氨基糖苷類藥物耐藥基因研究[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2012,2(16)：299-301.

[9]孫景勇,倪語星.Mohnarin 2008年度報(bào)告：華東地區(qū)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J].中國抗生素雜志,2010,35(7)：503-507.

Drug resistance of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae isolated in our hospital from 2006 to 2010.

WU Biao,FU Juan,FU Jian,CAI Du-yun,HUANG Chun-xin,LIN Feng,JIA Jie.People's Hospital of Hainan Province, Haikou 570311,Hainan,CHINA

ObjectiveTo monitor the drug resistance of 1 722 stains ofEscherichia coli(E.coli)and 872 stains ofKlebsiella pneumoniaeisolated in our hospital from 2006 to 2010.MethodsStrains ofE.coliandKlebsiella pneumoniaewere identified by VITEK-32 Automatic Microbial Identification and analyzed by drug-susceptibility testing.Then the results were analyzed using WHONET5.4 software.ResultsFrom 2006 to 2010,the 1 722 stains ofE.coliand 872 stains ofKlebsiella pneumoniaeisolated were highly resistant to most commonly used antimicrobial drugs,especially the third generation of cephalosporin drugs.They were found to be highly susceptible to meropenem.ConclusionThe drug resistance ofE.coliandKlebsiella pneumoniaefrom hospital infection is very serious.We should strengthen the monitoring of the antibiotic resistance of pathogens.The antimicrobial agents should be used reasonably based on the results of susceptibility tests.

Escherichia coli;Klebsiella pneumoniae;Drug resistance;Monitoring;Extended-spectrum beta-lactamase

R378

A

1003—6350（2012）18—012—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.18.005

2011-04-11）

海南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào)：310123)

吳彪（1976—），海南省海口市人，主治醫(yī)師，碩士，研究方向：感染性疾病。E-mail:wubiaohk@qq.com