馬力克·艾則孜
1.1 材料
1.1.1 檢查樣品 2010年4月至2010年11月對(duì)6個(gè)縣進(jìn)行屠宰場(chǎng)采集牛羊肝臟、肺臟,并收集犬的新鮮糞便,記錄后置于4℃冰箱中保存待檢。
1.1.2 主要試劑 細(xì)粒棘球絳蟲糞抗原抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒由新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所提供,批號(hào):20100525。
1.2 方法
1.2.1 調(diào)查對(duì)象 根據(jù)牧區(qū)、半農(nóng)半牧區(qū)等不同養(yǎng)殖方式以及疫情分布情況,選定6個(gè)縣進(jìn)行調(diào)查。每縣調(diào)查3個(gè)鄉(xiāng)每鄉(xiāng)3個(gè)村,每村調(diào)查10戶,了解犬、牛、羊的動(dòng)物養(yǎng)殖、感染狀況及防控情況等方面,問卷調(diào)查、座談、走訪等調(diào)查記錄。
1.2.2 牛羊棘球蚴病荷囊情況調(diào)查 每縣在定點(diǎn)屠宰場(chǎng)檢疫不同年齡段的屠宰牛105頭,羊105只,牛羊分為2歲以下、2~4歲、5歲以上,3個(gè)年齡組,每組分別檢查35頭(只)牛羊,檢查肝、肺棘球蚴病荷囊數(shù),棘球蚴病荷囊數(shù)的多少表明其感染強(qiáng)度的強(qiáng)弱。
1.2.3 犬新鮮糞便采集 每縣選3個(gè)有代表性鄉(xiāng),每鄉(xiāng)選3個(gè)有代表性村,每村對(duì)20條1歲以上當(dāng)?shù)爻赡耆ㄐ櫸锶猓杉迈r糞便2 g/條,置帶蓋15 m L離心管中,清楚標(biāo)記,-20℃保存,送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。
1.2.4 犬的糞便檢查 將采集的糞樣置于干烤箱中進(jìn)行無害化處理,70℃、12 h。稱取干烤后糞樣3~5 g,與1%福爾馬林按1∶4的比例混合,取出內(nèi)含0.5 g糞樣的混合液,加入含0.3%Tween-20的1%福爾馬林至15 m L,8 000 r/min離心5 min、收集上清即為抗原。
采用細(xì)粒棘球絳蟲抗原抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法檢測(cè)[4],具體步驟參照試劑盒說明書:ELISA板 A1-F1加入保護(hù)液,100μL/孔;向 G1-H1加入標(biāo)準(zhǔn)陽性樣品,100μL/孔;加標(biāo)準(zhǔn)陰性樣品 N1-N30和待檢樣品,每樣雙孔,100μL/孔,37℃濕盒孵育1 h;將酶標(biāo)板拍干,再用洗滌工作液洗滌酶標(biāo)板,300μL/孔,洗滌3次,拍干。A1-B1加入保護(hù)液,100μL/孔;其余孔加羊抗Eg的IgG液,100μL/孔,37℃濕盒孵育1 h;酶標(biāo)板拍干,再用洗滌工作液洗滌酶標(biāo)板,300μL/孔,洗滌3次,拍干。A1-B1加入保護(hù)液,100μL/孔;其余孔加酶結(jié)合物,100μL/孔,37℃濕盒孵育1 h;酶標(biāo)板拍干,再用洗滌工作液洗滌酶標(biāo)板,300μL/孔,洗滌5次,拍干;加入顯色液,100μL/孔,37℃濕盒孵育30 min,用酶標(biāo)儀測(cè)定在405 nm波長的OD值。
陽性臨界值=所有標(biāo)準(zhǔn)陰性樣品的平均OD值+3×SD(標(biāo)準(zhǔn)陰性樣品OD值的標(biāo)準(zhǔn)差)
陽性:待檢樣品的平均OD值≥陽性臨界值陰性:待檢樣品的平均OD值<陽性臨界值
2.1 羊的感染情況 在6個(gè)縣共抽查羊604只,檢查結(jié)果見表1。烏魯木齊市華菱屠宰場(chǎng)共檢查綿羊110只,肝臟感染率為44%、肺臟感染率為14%;昭蘇縣檢查綿羊67只,肝臟感染率為75%、肺臟感染率37%;特克斯縣檢查綿羊105只,肝臟陽性率為76%、肺臟感染率38%;溫宿縣共檢查綿羊112只,肝臟感染率為26.78%、肺臟感染率14%;烏恰縣檢查綿羊105只,肝臟感染為25.71%、肺臟感染率25%。肝臟棘球蚴平均感染率為45.58% ,包囊數(shù)1~80,包囊大小為0.5~50 mm;肺臟棘球蚴平均感染率為23%,包囊數(shù)1~50,包囊大小為0.5~65 mm;棘球蚴病感染率超過60%的有昭蘇縣、特克斯縣。
表1 6縣綿羊棘球蚴病調(diào)查統(tǒng)計(jì)表Tab.1 Infection of echinococcosis in sheep in 6 counties of Xinjiang
2.2 牛的感染情況 在6個(gè)縣共抽查牛582頭,檢查結(jié)果見表2。烏魯木齊市華菱屠宰場(chǎng)共檢查牛105頭,肝臟感染為4%、肺臟感染率0%;昭蘇縣檢查牛57頭,肝臟感染率為22%、肺臟感染率16%;特克斯縣檢查105頭牛,肝臟陽性率為32%、肺臟感染率18%;溫宿縣檢查的牛共105頭,肝臟感染為0%、肺臟感染率0%;烏恰縣檢查牛105頭,肝臟感染為50%、肺臟感染率29%;巴里坤縣檢查牛105頭,肝臟感染為17%、肺臟感染率8%。肝臟棘球蚴平均感染率為20.83% ,包囊數(shù)1~15,包囊大小為0.5~8 mm;肺臟棘球蚴平均感染率為11.83%,包囊數(shù)1~8,包囊大小為0.5~8 mm;棘球蚴病感染率50%的有烏恰縣。
2.3 犬的感染情況 在6個(gè)縣共抽查犬1 080條,烏魯木齊縣檢測(cè)180條犬,陽性數(shù)45條,感染率為25%;昭蘇縣檢測(cè)180條犬,陽性數(shù)31條,感染率為17.22%;特克斯縣檢測(cè)180條犬,陽性數(shù)41條,感染率為23%;溫宿縣檢測(cè)180條犬,感染數(shù)18,感染率為10%;烏恰縣檢測(cè)180條,感染數(shù)16,感染率為16.16%;巴里坤縣檢測(cè)犬180條,感染數(shù)22,感染率為12%。帶蟲率17%,感染強(qiáng)度為1~100以上。(表3)
2.4 人感染情況 在2010年6縣棘球蚴病發(fā)生情況,各縣當(dāng)?shù)胤酪哒咎峁┑臄?shù)據(jù)。(表4)
表2 6縣牛棘球蚴病調(diào)查統(tǒng)計(jì)表Tab.2 Infection of echinococcosis in cattle in 6 counties of Xinjiang
表3 犬棘球絳蟲監(jiān)測(cè)調(diào)查統(tǒng)計(jì)表Tab.3 Infection of echinococcosis in dog in Xinjiang
表4 2010年6縣棘球蚴病發(fā)生情況調(diào)查表Tab.4 Investigation of Echinococcus infection in 6 countries of Xinjiang,2010
棘球蚴病在中國主要分布于新疆維吾爾自治區(qū)、西藏自治區(qū)、青海省、甘肅省、寧夏回族自治區(qū)、內(nèi)蒙古自治區(qū)和四川省西部等7省區(qū)[5-6],新疆屬家畜棘球蚴病重災(zāi)區(qū)。
棘球蚴病為地方流行性的寄生蟲病,本病發(fā)生無明顯的季節(jié)性,南疆一些地區(qū)由于地理隔離和自然環(huán)境及社會(huì)因素的影響,其感染率和感染強(qiáng)度均很低,屬于散發(fā)性。北疆準(zhǔn)葛爾盆地周沿的盆地綠洲區(qū)家畜棘球蚴的感染率和感染強(qiáng)度高于南疆塔里木盆地周沿的盆地綠洲區(qū)。另外,飼養(yǎng)方式、文化素質(zhì)及生活習(xí)慣對(duì)棘球絳蟲蟲卵的散播有很大影響,且今年來我區(qū)對(duì)棘球蚴病的防治工作有所放松,如牧區(qū)犬隨羊群放牧,晚間犬看守羊群。犬、人、家畜接觸密切,病犬排除的蟲卵易傳播給家畜和人,而且患有棘球蚴的家畜臟器不進(jìn)行處理,犬易吃到,造成循環(huán)鏈較短,發(fā)病周期快,成為一些地區(qū)棘球蚴病發(fā)病率明顯回升和高發(fā)的主要原因。
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