惡性腫瘤患者化療前后免疫學(xué)指標(biāo)的變化及臨床應(yīng)用探討

黃晶

惡性腫瘤患者常伴有機(jī)體免疫功能異常，在抗腫瘤免疫效應(yīng)中細(xì)胞免疫比體液免疫起更為重要的作用。為了解惡性腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能及化療藥對(duì)惡性腫瘤患者免疫功能的影響，筆者采用流式細(xì)胞儀對(duì)100例惡性腫瘤患者化療前后的T淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行檢測(cè)和分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 100例患者均為經(jīng)病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診為惡性腫瘤，男63例，女37例，年齡21～79歲，平均53歲。其中惡性淋巴瘤19例，肺癌35例，乳腺癌25例，腸癌13例，胃癌8例。對(duì)照組選擇本院職工、健康體檢者，共60例，男25例，女35例，年齡19 ～76歲，平均52.3歲。

1.2 治療方法 所有患者治療前血常規(guī)、肝腎功能、心電圖均正常，均無(wú)免疫系統(tǒng)疾病，在接受本次治療前1個(gè)月未接受化療、放療及使用其他影響免疫功能的藥物。依據(jù)腫瘤不同類型接受不同的化療方案。藥物主要有表阿霉素、5－氟尿嘧啶、長(zhǎng)春新堿、順鉑、紫杉類等，化療前后做CT或MRI判定療效。

1.3 檢測(cè)方法 化療開始前1周及化療2周期結(jié)束后1周分別檢測(cè)患者外周血 T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+)，B淋巴細(xì)胞(CD19+)及 NK細(xì)胞(CD3－/CD16+56+)。

所有患者均于清晨抽空腹血1.5 ml，EDTA－2K抗凝，用型號(hào)為FACSCalibur(美國(guó)BD公司生產(chǎn))流式細(xì)胞儀測(cè)定，試劑均采用美國(guó)BD公司產(chǎn)品，包括熒光標(biāo)記單克隆抗體試劑盒，溶血素(FACSLying)等。嚴(yán)格按照說(shuō)明書處理標(biāo)本，通過(guò)四色熒光微球校準(zhǔn)流式細(xì)胞儀后，用MultiSET軟件獲取并分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用PEMS 3.1統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料采用均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

惡性腫瘤患者化療前CD3+、CD4+、CD8+均顯著低于對(duì)照組。CD4+/CD8+較對(duì)照組高，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，B細(xì)胞高于對(duì)照組，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)?；熀驝D3+、CD4+細(xì)胞升高，CD4+/CD8+比值增高，與治療前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);CD8+表達(dá)治療前后差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);CD3－/CD16+56+表達(dá)較化療前降低，較對(duì)照組亦降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);CD19+表達(dá)治療前后差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 兩組化療前后免疫指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果(x ± s，%)

3 討論

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及腫瘤的消退與機(jī)體自身的免疫功能狀態(tài)密切相關(guān)，T淋巴細(xì)胞在抗腫瘤免疫中引起到了重要作用［1］。T淋巴細(xì)胞由不同的亞群組成，不同亞群的T細(xì)胞具有不同的白細(xì)胞分化抗原(cluster of differentiation CD)，其細(xì)胞表面不同的白細(xì)胞分化抗原是反映其功能的重要標(biāo)志，并隨著疾病的轉(zhuǎn)歸發(fā)生變化［2］。體液免疫通常僅在某些情況下起協(xié)同作用。近年來(lái)，隨著免疫學(xué)的深入研究，腫瘤與免疫的關(guān)系越來(lái)越引起臨床重視。檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞活性是臨床觀察機(jī)體細(xì)胞免疫功能的重要方法之一。在外周血中，CD3抗原分子通常分布在成熟T細(xì)胞表面，故CD3+T細(xì)胞數(shù)量可代表機(jī)體總T細(xì)胞數(shù)量，CD4+T細(xì)胞通常代表T輔助細(xì)胞，CD8+T細(xì)胞通常代表具有抑制作用的抑制細(xì)胞，CD4+/CD8+比值反映了機(jī)體免疫功能狀態(tài)是否穩(wěn)定，只有兩者在適當(dāng)?shù)谋壤拍馨l(fā)揮正常的抗腫瘤作用［3，4］。CD4+/CD8+比例降低說(shuō)明細(xì)胞免疫功能降低，機(jī)體存在免疫抑制和免疫調(diào)節(jié)功能紊亂。惡性腫瘤多存在不同程度的免疫功能低下。國(guó)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤患者免疫功能的下降與腫瘤細(xì)胞分泌的免疫抑制因子(TDSF)有關(guān)，TDSF可廣泛抑制NK等免疫細(xì)胞的活性，是惡性腫瘤患者免疫功能障礙的主要原因之一［5］。

化療是腫瘤治療的主要手段之一?；熕幬锞鶠榧?xì)胞毒性藥物，它不僅殺傷腫瘤細(xì)胞，對(duì)人體正常增殖和分化細(xì)胞也有殺傷作用，能夠?qū)е铝馨图?xì)胞減少。因此，以往人們認(rèn)為腫瘤患者在化療的同時(shí)機(jī)體的免疫功能進(jìn)一步降低［6］。

本組結(jié)果顯示，惡性腫瘤患者CD3+、CD4+、CD8+低于對(duì)照組，CD4+/CD8+也高于對(duì)照組，說(shuō)明腫瘤患者的細(xì)胞免疫處于抑制狀態(tài)。CD4+/CD8+比值的高低，可提示惡性腫瘤患者預(yù)后的好壞，化療藥物有效與對(duì)照組結(jié)果相一致?；熀驝D3+、CD4+均明顯增高，可見化療可以提高腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能，但比值＞2.0，仍然提示化療可致免疫調(diào)節(jié)功能紊亂。

NK細(xì)胞具有非特異地直接殺傷靶細(xì)胞的功能，是抗腫瘤免疫的第一道防線［7］。本組化療后NK細(xì)胞繼續(xù)減少，NK細(xì)胞顯著低于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，可能與化療后檢測(cè)時(shí)間較早，骨髓抑制尚未完全恢復(fù)有關(guān)。B細(xì)胞參與體液免疫，本組腫瘤患者B細(xì)胞的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明化療可能對(duì)患者的體液免疫功能無(wú)明顯影響。

綜上所述，腫瘤患者免疫功能低下，以細(xì)胞免疫損害為主，有效的化療可使免疫功能得到一定程度的改善，但免疫調(diào)節(jié)紊亂尚不能得到糾正。這可能會(huì)改變以往認(rèn)為化療可使免疫功能完全損害的觀點(diǎn)。

［1］楊鎮(zhèn)．腫瘤免疫學(xué)［M］．武漢:湖北科學(xué)技術(shù)出版社，1998:31－36．

［2］劉莉，丁乾，曹如波，等．惡性腫瘤患者外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)T細(xì)胞的檢測(cè)及其臨床意義［J］．臨床腫瘤學(xué)雜志，2005，10(4):342．

［3］付尚志．腫瘤的免疫功能研究現(xiàn)狀［J］．臨床軍醫(yī)雜志，2002，30(5):95．

［4］Yasutomo K．The cellular and molecular mechanism of CD4+/CD8+Lineage commitmeht［J］．J Med Invest，2002，49(1 ～2):1．

［5］Illing R O，Kennedy J E，Wu F．The safety and feasibility of extracorporeal high－imtensity focused ultrasound(HIFU)for the treatment of liver and kidney tumours in a western population［J］．Br J cancer，2005，17:890．

［6］黎建軍，徐國(guó)良，羅廣裕，等．高強(qiáng)度聚焦超聲治療肝左葉癌的臨床研究［J］．中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)雜志，2006，22;156．

［7］孫燕．內(nèi)科腫瘤學(xué)［M］．北京:人民衛(wèi)生出版社，2001:134－137．