白細胞介素IL-4、IL-17在潰瘍性結腸炎中的表達

林巧嫦 廖博賢 黃飛娜

廣東省清新縣人民醫(yī)院消化內科，廣東清新 511800

白細胞介素是一龐大家族，到1994年已發(fā)現(xiàn)了15種，隨著深入研究，其數(shù)目還在不斷增加。近年來，對白細胞介素（IL）在潰瘍性結腸炎（UC）腸道炎性反應的主要作用有了較為深入地研究，腸黏膜免疫功能異常被公認為在UC發(fā)病中具有極為重要的作用，多種細胞因子參與免疫反應和炎癥過程[1]。本研究旨在探討白細胞介素-4（IL-4）和白細胞介素-17（IL-17）在潰瘍性結腸炎發(fā)生發(fā)展過程中的作用，現(xiàn)將研究材料總結如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集筆者所在醫(yī)院2008年4月～2011年2月收治的潰瘍性結腸炎患者50例作為 UC組，所有患者均符合2000年10月成都全國炎癥性腸病研討會制訂的《對炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的建議》中的診斷標準[2]。其中男22例，女28例；平均年齡（38±6）歲，平均病程（3.5±0.6）年。50例UC患者中輕度14例、中度22例、重度14例。另選擇筆者所在醫(yī)院同期健康體檢正常且2年內無胃腸道及其他炎癥性腸疾病的健康志愿者50例作為對照組，其中男25例，女25例；平均年齡（37±5）歲，兩組在年齡、性別構成間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 標本收集 早晨空腹靜脈采血（UC靜止期和活動期均采血，病態(tài)分期判斷標準為活動期：正常黏膜結構消失，腸壁僵硬，腸腔狹窄呈管狀，有炎性息肉或潰瘍。黏膜分泌增多，有充血、水腫或滲血。靜止期：腸壁僵硬，腸腔狹窄呈管狀，有多數(shù)假息肉形成。黏膜炎癥輕，蒼白，出血少，正常結構消失顯得干燥），收集患者外周血3 mL，以2% EDTA-Na 20.7%NaCl抗凝，1 500 r/min離心，立即分離血漿，并于-70℃保存待檢。

1.2.2 IL-4、IL-7的測定 采用ELISA法檢測IL-4、IL-7，試劑盒由深圳賽爾生物技術有限公司提供，批號20070721、20061026。使用BIO-TCK/USA公司的ELX800酶標儀，并嚴格按照使用說明書進行檢測操作過程。首先酶標生物素抗體并加入酶的底物使其發(fā)生顯色反應。應用酶標儀在450 nm處測定OD值，轉化為濃度。

1.3 統(tǒng)計學處理

2 結果

2.1 潰瘍性結腸炎患者IL-17、IL-4濃度與對照組比較

對照組IL-4濃度明顯高于UC組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；UC組患者的IL-17濃度明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表1。

表1 兩組細胞因子檢測結果比較（± s，pg/mL）

表1 兩組細胞因子檢測結果比較（± s，pg/mL）

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2.2 潰瘍性結腸炎患者活動期、靜止期的IL-4、IL-17濃度與對照組比較

潰瘍性結腸炎患者活動期、靜止期的IL-4濃度均明顯低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；潰瘍性結腸炎患者活動期IL-17濃度明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；潰瘍性結腸炎患者靜止期IL-17濃度與健康對照組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 潰瘍性結腸炎患者各期與對照組IL-17、IL-4濃度結果比較（± s，pg/mL）

表2 潰瘍性結腸炎患者各期與對照組IL-17、IL-4濃度結果比較（± s，pg/mL）

注：與對照組比較，*P＜0.01

組別 n IL-4 IL-17 UC組 活動期 37 9.41±1.79* 33.12±2.99*靜止期 13 12.13±3.98* 19.17±2.36對照組 50 18.28±4.23 19.45±2.09

2.3 潰瘍性結腸炎患者不同病情程度IL-17、IL-4濃度比較

中、重度的潰瘍性結腸炎患者IL-4濃度明顯低于輕度患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；中、重度的潰瘍性結腸炎患者IL-17濃度明顯高于輕度患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；重度潰瘍性結腸炎患者IL-4濃度明顯低于中度患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；重度潰瘍性結腸炎患者IL-17濃度明顯高于中度患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。見表 3。

表3 50例潰瘍性結腸炎患者不同病情程度IL-17、IL-4濃度結果比較（± s，pg/mL）

表3 50例潰瘍性結腸炎患者不同病情程度IL-17、IL-4濃度結果比較（± s，pg/mL）

注：與輕度比較，*P＜0.01；與中度比較，#P＜0.01

病情程度 n IL-4 IL-17輕度 14 13.42±3.01 13.29±1.24中度 22 8.22±1.34* 19.44±1.85*重度 14 4.30±1.03*# 33.54±3.60*#

3 討論

潰瘍性結腸炎的特征之一是炎癥細胞浸潤，炎癥細胞的持續(xù)存在導致炎癥反應的持續(xù)。還有研究表明，一些細胞因子水平增高，與腸道炎癥的發(fā)病及活動有密切關系，如缺乏白細胞介素2（IL-2）可誘導T細胞凋亡，促進潰瘍性結腸炎的發(fā)生[3]。IL-4由T淋巴細胞產生，分子質量20 kU，是B細胞生長因子，促進B細胞的生長，促使IgG的分泌，與其他細胞因子一起協(xié)同地促進粒細胞及紅細胞系祖細胞的集落生長，并刺激肥大細胞的增殖[4-5]。IL-4對巨噬細胞所產生的IL-1，TNF和PGE2起負調節(jié)作用，提示它具有抗炎作用。IL-4 活化B細胞；誘導胸腺細胞增殖；刺激T細胞增殖；增強CTL細胞毒活性；增強巨噬細胞的細胞毒；增加巨噬細胞表達MHCⅡ；加強EPO，G-CSF、M-CSF和IL-3的促克隆形成作用。白介素17是近年來發(fā)現(xiàn)的一種促炎癥性細胞因子，主要由活化的記憶性CD4+T淋巴細胞分泌，是含有一個N-末端信號肽的155個氨基酸的糖蛋白[6]。它與單純皰疹病毒的開放閱讀框架基因13（HSVS13）編碼的蛋白質有57%的同源性，與小鼠的細胞毒性T淋巴細胞相關抗原-8（CTLA-8）有63%的同源性[7]。IL-17通過與受體特異性結合，發(fā)揮著促進炎癥發(fā)展、免疫應答、造血等多種功能[8]。IL-17在UC的發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用；IL-23免疫通路調控異常是導致UC發(fā)生的關鍵因素。

本研究中IL-4、IL-17的測定顯示，UC患者IL-4濃度明顯低于健康對照組，UC組患者的IL-17濃度明顯高于健康對照組，潰瘍性結腸炎患者活動期、靜止期的IL-4濃度均明顯低于健康對照組，潰瘍性結腸炎患者活動期IL-17濃度明顯高于健康對照組，中、重度的潰瘍性結腸炎患者IL-4濃度明顯低于輕度患者，中、重度潰瘍性結腸炎患者IL-17濃度明顯高于輕度患者，重度潰瘍性結腸炎患者IL-4濃度明顯低于中度患者，重度潰瘍性結腸炎患者IL-17濃度明顯高于中度患者，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。說明白細胞介素-4和白細胞介素-17參與UC的炎癥發(fā)生發(fā)展，并與UC的炎癥的啟動和慢性化相關。

[1]李睿，羅時兵，潘威進，等.白細胞介素-10在潰瘍性結腸炎結腸黏膜中表達的研究 [J].中國醫(yī)師雜志，2006，8（5）：694-695.

[2]王婷，鄭長青.細胞因子在炎癥性腸病發(fā)病機制中的作用[J].世界華人消化雜志，2005，13（1）：72-75.

[3]Ken S，Atsuhiro O，Emiko M，et al.IL-22 ameliorates intestinal inflammation in mouse model of ulcerative colitis[J].J Clin Invest，2008，118（2）：534-544.

[4]劉占舉，楊麗，崔軼.白細胞介素-23在炎癥性腸病的表達升高并誘導促炎細胞因子分泌[J].中華消化雜志，2009，29（6）：370-373.

[5]鄒陽，王興友，吳凱，等.潰瘍性結腸炎大鼠IL-2、CD44、CD54的實驗研究 [J].江西醫(yī)學檢驗，2002，9：19-21.

[6]賈百靈，侯曉華.白細胞介素-6與潰瘍性結腸炎的關系[J].胃腸病學和肝病學雜志， 2004，13（3）：217-221.

[7]周宇，葉文桃，麥海妍，等.白介素13和一氧化氮在潰瘍性結腸炎的作用及意義[J].胃腸病學和肝病學雜志，2004，14：1124-1127.

[8]張炳勇，呂愈敏，洪天配，等.炎癥性腸病患者腸黏膜白細胞介素18的表達及意義[J].北京大學學報（醫(yī)學版），2003，35（2）：150-153.