IL-23與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究

王乃志，楊麗麗，張寧

（中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，沈陽(yáng) 110004）

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種發(fā)病機(jī)制尚不明確的自身免疫性疾病，以關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞增值的慢性炎癥為病理特征。細(xì)胞因子在慢性炎癥過(guò)程中起到重要的作用，研究發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞介素（interleukin，IL）23是一種重要的促炎因子，在RA的發(fā)病和骨破壞方面發(fā)揮重要作用［1］。IL-23可促進(jìn)Th17細(xì)胞產(chǎn)生多種與自身免疫炎癥反應(yīng)相關(guān)的細(xì)胞因子，如 IL-17，IL-6，IL-22，TNF-，GM-CSF 等［2］。本研究通過(guò)檢測(cè)RA患者和健康對(duì)照者的血清IL-23水平，以研究RA患者IL-23水平的臨床意義。

1 材料和方法

1.1 臨床資料

選取2010-2011年就診于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院風(fēng)濕免疫科的59例住院患者，所有患者符合ACR/EULAR 2009年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)。隨機(jī)選取沒(méi)有任何慢性炎癥疾病的健康者作為對(duì)照。在獲得研究對(duì)象同意的情況下采取其血清，同時(shí)記錄RA患者相關(guān)臨床數(shù)據(jù)。

1.2 IL-23的測(cè)定

采用酶聯(lián)免疫吸附方法（ELISA）測(cè)定（R&D Systems Inc.，Minneapolis，MN，USA），按照說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.3 RF、CRP定量測(cè)定

使用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司Immage特種蛋白分析儀，試劑為專用試劑。

1.4 關(guān)節(jié)X線片分期［3］

由放射科醫(yī)生閱片并診斷受累關(guān)節(jié)的X線片。記錄相應(yīng)X線分期的例數(shù)：Ⅰ期為正?；蜿P(guān)節(jié)面下的骨質(zhì)疏松；Ⅱ期有骨質(zhì)疏松，關(guān)節(jié)周圍軟組織腫脹，關(guān)節(jié)間隙正?；蛴休p微的關(guān)節(jié)面骨質(zhì)侵蝕或破壞，無(wú)關(guān)節(jié)畸形；Ⅲ期為關(guān)節(jié)面下明顯的骨質(zhì)侵蝕和破壞，關(guān)節(jié)間隙變窄或消失，無(wú)纖維性或骨性強(qiáng)直，及關(guān)節(jié)半脫位畸形；IV期為除以上兩期的表現(xiàn)外，合并有關(guān)節(jié)纖維性或骨性強(qiáng)直。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 17統(tǒng)計(jì)軟件；各項(xiàng)檢測(cè)數(shù)據(jù)均以±s；RA患者與健康對(duì)照者血清IL-23水平比較用t檢驗(yàn)；RA患者血清IL-23水平與患者DAS28評(píng)分、CRP、RF相關(guān)性用 Pearson's相關(guān)分析；RA患者不同X線分期與血清L-23水平采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床數(shù)據(jù)

59例RA患者的年齡為26～79歲，平均（49.56±15.3）歲，由39名女性和20名男性組成；病程為2～360個(gè)月，平均（68.2±50.2）個(gè)月；晨僵時(shí)間為 0.3～2 h，平均（0.9±0.5）h 關(guān)節(jié)疼痛數(shù)平均為 6.52±2.4；晨僵關(guān)節(jié)數(shù)為 4.37±2.0；DAS28評(píng)分平均 4.3±0.13；RF 平均水平為（28.5±12.3）IU/mL；CRP 平均水平為（43.6±23.6）mg/L；X線分期患者例數(shù)分別為：Ⅰ期9例、Ⅱ期21例、Ⅲ期26例、IV期13例。

2.2 RA患者組血清IL-23水平與健康對(duì)照組比較

其中 RA 患者組（370.7±25.7）ng/mL，健康對(duì)照組（248.5±20.1）ng/mL，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

2.3 RA患者組血清IL-23水平與臨床指標(biāo)相關(guān)分析

通過(guò)Pearson's相關(guān)分析，RA患者組血清IL-23水平與 CRP （r=0.481，P=0.006）（圖 1）、DAS28（r=0.461，P=0.007）（圖 2）比較有顯著相關(guān)性，與 RF（r=-0.073，P=0.585）比較無(wú)顯著相關(guān)性。

2.5 RA患者組血清IL-23水平與不同X線分期關(guān)系

采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者的IL-23水平呈遞增趨勢(shì)，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表1）。

表1 I L-23水平與不同X線分期關(guān)系Tab.1 Relationship of IL-23 levels to X-ray classi fication

3 討論

RA是一種累及周身關(guān)節(jié)為主的多系統(tǒng)性炎癥性自身免疫病，以慢性滑膜炎為病理特征，可侵及下層的軟骨和骨組織，造成關(guān)節(jié)破壞，臨床常表現(xiàn)為受累關(guān)疼痛、腫脹、功能受限。

目前RA發(fā)病機(jī)制尚不明確，IL-23在RA發(fā)病機(jī)制中所起到得重要作用正逐漸被人們所認(rèn)識(shí)。研究發(fā)現(xiàn)，IL-23可誘發(fā)Th17細(xì)胞通過(guò)激活間質(zhì)細(xì)胞上的核因子kB受體活化因子配基（receptor or activator of NF-kB ligand，RANKL）刺激滑膜成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生炎癥因子IL-6、IL-8和PGE2，使滑膜處于慢性炎癥狀態(tài)［4］，RANKL不僅可參與慢性炎癥的發(fā)生過(guò)程，也可以導(dǎo)致骨破壞的發(fā)生［3］。Hue等［5］發(fā)現(xiàn)IL-23與IL-17的相互作用在RA病理過(guò)程中起到重要作用，IL-23可誘導(dǎo)Th17細(xì)胞產(chǎn)生 IL-17，IL-17再促進(jìn) IL-1、TNF-α 和 RANKL 的生成，最終導(dǎo)致滑膜炎癥和誘發(fā)破骨細(xì)胞的分化引起骨侵蝕和關(guān)節(jié)破壞［6］。另外，IL-17可通過(guò)正反饋誘導(dǎo)關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞產(chǎn)生IL-23，進(jìn)一步加重關(guān)節(jié)滑膜炎癥［7］。我們的檢測(cè)結(jié)果顯示RA患者血清IL-23水平顯著高于健康對(duì)照者，符合相關(guān)文獻(xiàn)關(guān)于IL-23參與RA的發(fā)病過(guò)程的報(bào)道，提示IL-23可能對(duì)RA的診斷具有一定的臨床價(jià)值。本研究發(fā)現(xiàn)IL-23水平與RA疾病活動(dòng)相關(guān)指標(biāo)CRP、DAS28呈正相關(guān)，提示IL-23不僅參與RA的炎癥過(guò)程，而且還反映疾病的活動(dòng)狀態(tài)，可作為RA活動(dòng)性參考指標(biāo)。另外，我們對(duì)不同X線分期RA患者血清IL-23水平作進(jìn)一步分層分析發(fā)現(xiàn)，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期呈遞增趨勢(shì)，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，進(jìn)一步證明IL-23參與RA骨破壞過(guò)程，提示IL-23可能是預(yù)測(cè)RA骨破壞程度的重要指標(biāo)。

Sato等［3］提出在RA患者骨髓細(xì)胞中IL-23可促進(jìn)核因子Kappa B受體活化因子（receptor or activator of NF-κB，RANK）mRNA 和蛋白質(zhì)的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在RA患者關(guān)節(jié)滑膜中IL-23水平與RANKmRNA的表達(dá)水平呈正相關(guān)性。提示IL-23可通過(guò)基因調(diào)節(jié)參與RA發(fā)病過(guò)程，可進(jìn)一步完善基因相關(guān)性研究，以探索IL-23參與RA疾病活動(dòng)的具體機(jī)制。

Koenders等［8］發(fā)現(xiàn)阻止關(guān)節(jié)炎反應(yīng)中IL-17的生成可減少關(guān)節(jié)的腫脹以及骨破壞。在RA動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭校?］，通過(guò)基因靶向技術(shù)敲除IL-23相關(guān)基因的小鼠完全沒(méi)有發(fā)展成關(guān)節(jié)炎的征象，表明IL-23在RA的發(fā)病過(guò)程中起到重要作用，提示IL-23可能是未來(lái)治療RA的一個(gè)重要靶點(diǎn)。

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