藥物脫絨對遼寧絨山羊血清激素及酶水平的影響

欒新紅，郭英振，姜懷志，張世偉，郭 丹，于立輝，趙 鵬

（1．沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧 沈陽110866；2．吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，吉林 長春130118；3．遼寧省畜牧科學(xué)研究院，遼寧 遼陽111000；4．甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，甘肅 蘭州730070）

遼寧絨山羊具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值，尤其是山羊絨，因其纖維細(xì)而柔軟、輕而保暖，廣受人們歡迎。但山羊絨的生長呈季節(jié)性，產(chǎn)量較低，遠(yuǎn)不能滿足市場需要，而且人工剪羊毛也消耗了大量的勞動力。為提高山羊絨的產(chǎn)量和品質(zhì)、解決人工剪羊毛所帶來的勞動量繁重等缺點(diǎn)，國內(nèi)外學(xué)者研究用生物或化學(xué)脫毛劑來進(jìn)行脫毛，目前這方面的藥物有小鼠表皮生長因子（mEGF）、含羞草氨酸（Mimosine）、乙硫氨酸（Ethionine）、環(huán)磷酰胺（Cyclophosphamide）等［1］。環(huán)磷酰胺作為一種比較理想的脫毛用藥，從20世紀(jì)70年代開始，國、內(nèi)外就有專家對其進(jìn)行了研究，并已獲得成效［2－3］。但是，藥物脫毛后羊絨的再生長是這類藥物脫毛劑在生產(chǎn)應(yīng)用過程中面臨的一個(gè)實(shí)際問題。有研究［4－5］表明，梳絨后于動物頸部皮下埋植褪黑素可以誘導(dǎo)當(dāng)年絨毛再生長，從而增加羊絨產(chǎn)量。但目前尚未見環(huán)磷酰胺和裉黑志聯(lián)合使用以實(shí)現(xiàn)有效脫毛及增產(chǎn)效果的報(bào)道，為此，本研究著重探討這兩種藥物組合應(yīng)用對遼寧絨山羊血清激素及酶水平的影響，旨為實(shí)踐應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 試驗(yàn)動物及分組 4歲雌性健康遼寧絨山羊12只 （吉林省絨山羊種羊繁育中心提供），隨機(jī)分為4組，即對照組和試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組，每組3只。其中試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組埋植褪黑素（每只60mg）；試驗(yàn)Ⅱ和Ⅲ組于試驗(yàn)開始后第30天肌肉注射環(huán)磷酰胺（26mg·kg－1［2］）。所有試驗(yàn)羊均維持自然光照，采取舍飼和放牧相結(jié)合，以放牧為主的飼養(yǎng)模式。

1．2 指標(biāo)測定及數(shù)據(jù)處理 分別于試驗(yàn)開始后0、30和50d采集血樣，制備血清，采用全自動生化分析儀及酶標(biāo)儀檢測血清中酶和激素水平。其中血清酶測定試劑盒選自中生北控生物科技股份有限公司，酶免法試劑盒選自上海勁馬生物科技有限公司。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 13．0軟件進(jìn)行方差分析，運(yùn)用LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2．1 遼寧絨山羊血清酶水平的檢測 肌酸磷酸激酶（CPK）含量，對照組加入或注射藥后不同采樣時(shí)間之間差異顯著（P＜0．05）（表1）；試驗(yàn)Ⅱ組50d時(shí)與0和30d比較均差異顯著（P＜0．05）；試驗(yàn)Ⅲ組30d與0和50d比較均差異顯著（P＜0．05）。α－淀粉酶（A－AMY）含量，對照組、試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組組內(nèi)3次采樣所得值之間均差異顯著（P＜0．05）；試驗(yàn)Ⅲ組50d與0和30d間均差異顯著（P＜0．05）；試驗(yàn)全期各組均值呈隨時(shí)間增加而上升的趨勢。堿性磷酸酶（ALP）含量，對照組3次采樣所得值之間均差異顯著（P＜0．05）；30d時(shí)對照組與試驗(yàn)Ⅲ組差異顯著（P＜0．05）；其余各組內(nèi)及組間差異不顯著（P＞0．05）；對照組、試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組呈隨時(shí)間而升高的趨勢，試驗(yàn)Ⅲ組呈先升高后降低趨勢。

2．2 遼寧絨山羊血清激素水平的檢測 血清中促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）水平，試驗(yàn)全期各組間及組內(nèi)差異均不顯著（P＞0．05）（表2）；各試驗(yàn)組50d時(shí)均降低，尤其是試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅱ更為明顯。皮質(zhì)醇（Cor）及EGF水平，試驗(yàn)全期各組間及組內(nèi)差異不顯著（P＞0．05）。試驗(yàn)全期各組褪黑素（MT）含量均呈隨時(shí)間而降低的趨勢，各處理組組間差異均不顯著（P＞0．05）；對照組、試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ組組內(nèi)差異也均不顯著（P＞0．05），試驗(yàn)Ⅱ組50d與0和30 d比較均差異顯著（P＜0．05）。

表1 藥物脫絨對血清酶含量的影響Table 1 Effects of depilation by drugs on serum enzyme content U·L－1

表2 藥物脫絨對血清激素含量的影響Table 2 Effects of depilation by drugs on serum hormone levels U·L－1

3 討論

3．1 藥物脫絨對遼寧絨山羊血清酶水平的影響 肌酸激酶與細(xì)胞內(nèi)能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮、腺嘌呤核苷三磷酸再生有著直接的關(guān)系。結(jié)果顯示，30和50d時(shí)，試驗(yàn)Ⅰ組肌酸磷酸激酶含量水平降低，試驗(yàn)Ⅲ組肌酸磷酸激酶含量升高，說明環(huán)磷酰胺可能具有提升肌酸磷酸激酶含量的作用，而褪黑素則具有降低其含量的作用。有研究［2］表明，長期給予環(huán)磷酰胺可能導(dǎo)致出血性膀胱炎，骨髓抑制進(jìn)而發(fā)展為造血功能降低，而這兩種疾病的重要指標(biāo)之一即為肌酸磷酸激酶含量。本研究顯示，試驗(yàn)Ⅱ組50 d時(shí)肌酸磷酸激酶含量升高，但最終含量低于試驗(yàn)Ⅲ組，這說明褪黑素可能通過調(diào)節(jié)體內(nèi)各系統(tǒng)的生理功能對機(jī)體起保護(hù)作用，降低環(huán)磷酰胺的副作用。

埋植褪黑素或注射環(huán)磷酰胺都有提高血清α－淀粉酶含量的作用。30和50d時(shí)，試驗(yàn)Ⅲ組與其他各組差異顯著（P＜0．05），說明環(huán)磷酰胺對血清α－淀粉酶含量有顯著的增強(qiáng)作用。α－淀粉酶能催化水解直鏈淀粉，生成α－麥芽糖和葡萄糖［6－7］，其含量的提高有利于機(jī)體更加充分地吸收營養(yǎng)物質(zhì)。

堿性磷酸酶催化磷酸酯類化合物水解釋放磷酸，與骨骼的代謝密切相關(guān)［8－9］。本研究中除試驗(yàn)Ⅲ組堿性磷酸酶含量先升高后降低外，其余各組均呈升高趨勢，這說明褪黑素具有升高堿性磷酸酶含量的作用，而環(huán)磷酰胺具有降低堿性磷酸酶含量的作用，二者共同作用時(shí)褪黑素的升高作用強(qiáng)于環(huán)磷酰胺的降低作用。

3．2 藥物脫絨對遼寧絨山羊血清激素水平的影響 促腎上腺皮質(zhì)激素和皮質(zhì)醇均屬應(yīng)激激素，其水平高低反映機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)強(qiáng)度，過強(qiáng)的應(yīng)激反應(yīng)會對機(jī)體造成一定程度的損傷。50d時(shí)（脫毛時(shí)）的結(jié)果可以看出，埋植褪黑素試驗(yàn)組Ⅰ和Ⅱ的促腎上腺皮質(zhì)激素含量明顯降低，均低于對照組，尤其是試驗(yàn)I組。表2中對照組皮質(zhì)醇含量在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)表現(xiàn)為先降低后升高的趨勢，而試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組均表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢，試驗(yàn)Ⅲ組則始終表現(xiàn)為升高的趨勢。綜上分析，埋植褪黑素可以在一定程度上緩解應(yīng)激反應(yīng)，包括采樣和脫毛過程的刺激所引起的應(yīng)激。試驗(yàn)Ⅲ組第3次采樣時(shí)，皮質(zhì)醇濃度均較其他試驗(yàn)組偏高，說明單純注射環(huán)磷酰胺可能會導(dǎo)致動物應(yīng)激、刺激動物皮質(zhì)醇的分泌，從而使其血清皮質(zhì)醇濃度升高。因此，利用環(huán)磷酰胺作為脫毛劑，埋植褪黑素可以在一定程度上保護(hù)機(jī)體，降低應(yīng)激反應(yīng)帶來的損害。

表皮生長因子對皮膚的發(fā)生，結(jié)構(gòu)功能的維持以及皮膚衍生物的發(fā)育與功能具有重要作用［10－11］。其對羊毛生長具有抑制作用，表現(xiàn)為低劑量時(shí)毛球稍微變小，纖維表皮層形成暫時(shí)性障礙；大劑量時(shí)毛囊退化，羊毛纖維根端扭曲變形，最后呈錐形脫落［12－13］。本研究中，試驗(yàn)全期各組組間及組內(nèi)差異不顯著，試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組（埋植褪黑素）呈降低趨勢，說明褪黑素具有降低表皮生長因子濃度的作用。試驗(yàn)Ⅲ組略有升高，但變化不顯著，這可能是因?yàn)榄h(huán)磷酰胺具有脫毛作用，而高濃度的表皮生長因子對羊毛生長具有抑制作用，表現(xiàn)為羊毛纖維根端扭曲變形，最后呈錐形脫落［10－11］。

長日照時(shí)血液褪黑素濃度相對較低，短日照期間褪黑素升高［14－16］。本研究結(jié)果表明，遼寧絨山羊血液中褪黑素濃度受季節(jié)影響，從短日照向長日照過渡中，血液褪黑素濃度逐漸降低，埋植褪黑素可能會干擾此規(guī)律，試驗(yàn)Ⅰ和Ⅱ組血清褪黑素濃度先維持在較高水平，然后略微降低但仍高于對照組，這是由于動物機(jī)體為維持體內(nèi)激素系統(tǒng)平衡啟動了負(fù)反饋調(diào)控機(jī)制，使?jié)舛染S持在正常生理范圍之內(nèi)，這與岳春旺等［17］的試驗(yàn)結(jié)果一致。本研究中對照組與各試驗(yàn)組褪黑素濃度呈下降趨勢，且各組組間差異不顯著，兩種藥物共同處理的試驗(yàn)Ⅱ組的褪黑素含量下降程度高于褪黑素單獨(dú)處理的試驗(yàn)Ⅰ組，這說明環(huán)磷酰胺具有降低血清褪黑素量的作用。

4 結(jié)論

褪黑素、環(huán)磷酰胺單獨(dú)或者共同作用于遼寧絨山羊，可對絨山羊血清激素及酶產(chǎn)生一定的影響。埋植褪黑素可以在一定程度上降低利用環(huán)磷酰胺脫毛帶來的應(yīng)激反應(yīng)。

［1］ 陳衛(wèi)，郭曉慧，李維琪．環(huán)磷酰胺脫毛劑對羊毛生長和毛囊發(fā)育影響的超微結(jié)構(gòu)觀察［J］．畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，1998，29（5）：385－391．

［2］ 盧文．環(huán)磷酰胺的作用及其在綿羊脫毛生產(chǎn)中的應(yīng)用［J］．獸醫(yī)導(dǎo)刊，2007（4）：42－47．

［3］ 黃長超，谷振全．國產(chǎn)環(huán)磷酸胺脫毛的初步試驗(yàn)［J］．黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào)，1981（2）：77－79．

［4］ 柳建昌，尹協(xié)鎮(zhèn)，方天祺．褪黑素對中國絨山羊在非生絨期促絨生長與絨產(chǎn)量的影響［J］．動物學(xué)雜志，1998，33（3）：8－12．

［5］ Kloren W R L，Norton B W．Melatonin and fleece growth in Australian cashmere goats［J］．Small Ruminant Research，1995，17：179－185．

［6］ 張才駿．青海細(xì)毛羊血清淀粉酶的多態(tài)性的研究［J］．中國養(yǎng)羊，1994（4）：22－25．

［7］ 劉圈煒，王成章，嚴(yán)學(xué)兵，等．苜蓿青飼對波爾山羊屠宰性狀 及 肉 品 質(zhì) 的 影 響 ［J］．草 業(yè) 學(xué) 報(bào)，2010，19（1）：158－165．

［8］ 胡蘭，胡銳，劉瑩．大骨雞血液生化遺傳標(biāo)記測定［J］．四川畜牧獸醫(yī)，2004，31（2）：29－30．

［9］ 王文靜，李曉東，史瑩華，等．苜蓿青干草對肉牛生產(chǎn)性能及膽固醇代謝的影響［J］．草業(yè)科學(xué)，2010，27（10）：135－141．

［10］ Akiyama M，Smith L T，Holbrook K A．Growth factor and growth factor receptor location in the hair follicle bulge and associated tissue in human fetus［J］．Journal of Investigative Dermatology，1996，106（3）：391－396．

［11］ Saga K．Structure and function of human sweat glands studied with histochemistry and cytochemistry［J］．Progress in Histochemistry and Cytochemisty，2002，37（4）：323－386．

［12］ 姚玉園，劉海英，袁纓．IGF－1和EGF對遼寧絨山羊初級毛囊體外培養(yǎng)的影響［J］．沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，4（2）：165－169．

［13］ 趙宗勝．IGF－1和EGF對羊毛囊體外培養(yǎng)的影響［J］．南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，29（2）：138－141．

［14］ 岳春旺．褪黑激素調(diào)控絨山羊絨毛生長機(jī)理的研究［D］．北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007：4－6．

［15］ 程建波，張子軍，章孝榮．褪黑激素對絨山羊絨毛生長的影響及其作用機(jī)理研究進(jìn)展［J］．貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（3）：166－168．

［16］ 宮旭胤，吳建平，張利平，等．飼養(yǎng)模式對綿羊冷季生產(chǎn)效益的影響［J］．草業(yè)科學(xué)，2011，28（1）：141－145．

［17］ 岳春旺，張微，孔祥浩，等．褪黑激素對內(nèi)蒙古白絨山羊產(chǎn)絨性能的影響［J］．反芻動物營養(yǎng)，2007，7（43）：218－220．