指血預(yù)稀釋模式與靜脈血抗凝全血模式測定自行車運(yùn)動員9項血細(xì)胞參數(shù)的比較實驗研究①

李鵬飛 馮葆欣 宗丕芳 尚文元 張衛(wèi)英 宋國強(qiáng)

(1.國家體育總局體育科學(xué)研究所 北京 100061; 2.北京市蘆城體育運(yùn)動技術(shù)學(xué)校 北京 102612)

臨床血常規(guī)檢驗以提倡取靜脈血用EDTAK2抗凝的全血模式測定為佳。但在我所生化實驗室日常為運(yùn)動員檢測血常規(guī)時存在著末梢指血預(yù)稀釋與靜脈血抗凝全血的2種不同模式。本實驗比較的目的是為了了解這2種模式的測定結(jié)果是否存在差異及其大小,并做出相關(guān)回歸分析。

1 研究方法

1.1 儀器和試劑

1.2 抗凝劑

15%EDTAK2溶液,取5uL置于1.5mL離心管中。

1.3 樣本

同時采集運(yùn)動員靜脈血及末梢指血標(biāo)本各57例/次。男21人,年齡(17±1.20)歲,身高(176±4.28)cm,體重(71±5.10)kg,專項訓(xùn)練年限(3±1.19)年。女19人,年齡(18±2.40)歲,身高(166.5±2.69)cm,體重(61.4±4.98)kg,專項訓(xùn)練年限(2.4±1.25)年。

表1 57例/次末梢指血和靜脈血9項血細(xì)胞參數(shù)測定結(jié)果的比較(±s)Table1 The comparison of nine hematological parameters between fingertip and venous blood from cycling athletes(±s)

表1 57例/次末梢指血和靜脈血9項血細(xì)胞參數(shù)測定結(jié)果的比較(±s)Table1 The comparison of nine hematological parameters between fingertip and venous blood from cycling athletes(±s)

注:WBC,白細(xì)胞;RBC,紅細(xì)胞;HGB,血紅蛋白;HCT,紅細(xì)胞壓積;MCV,紅細(xì)胞平均體積;MCH,紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量;MCHC,紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度;RDW,紅細(xì)胞體積分布寬度;PLT,血小板

配對t檢驗靜脈血 末梢指血 t P W BC(×109/L) 5.8±1.9 5.7±1.8 0.83 ＞0.05 R B C(×1012/L) 4.69±0.51 4.44±0.46 9.3 ＜0.01 H G B(g/L) 142±17 137±17 8.97 ＜0.01 H C T(%) 41.9±5 39.5±5 9.79 ＜0.01 M C V(fl) 88.8±5.16 89.4±5.12 3.12 ＜0.01 M C H(pg) 30.5±1.9 30.7±2.5 0.64 ＞0.05 M C H C(g/L) 344±9 344±18 0.446 ＞0.05 R D W(%) 12.6±1.1 12.8±1.0 2.657 ＜0.05 PLT(×109/L) 259±46 258±48 0.133 ＞0.05

1.4 方法

按操作規(guī)程推薦方法,準(zhǔn)確取末梢指血20uL置于裝有1580uL稀釋液的塑料試管內(nèi),混勻。另取靜脈血0.5mL置于裝有抗凝劑的離心管內(nèi),混勻。在取血后0.5～2h內(nèi)分別以預(yù)稀釋模式和全血模式完成測試。

1.5 考慮到盡量拓展線性范圍,在運(yùn)動員不同訓(xùn)練階段進(jìn)行了重復(fù)抽樣,本比較實驗的統(tǒng)計樣本量大于采血人數(shù),為57例/次。統(tǒng)計學(xué)處理采用配對t檢驗,并進(jìn)行相關(guān)與回歸分析。

2 結(jié)果

(1)57例/次末梢指血和靜脈血測定血常規(guī)的9項主要參數(shù)分別進(jìn)行配對t檢驗,結(jié)果見表1。表1顯示,通過配對t檢驗,二者的WBC、MCH、MCHC、PLT沒有顯著性的差異,而RBC、HGB、HCT、MCV、RDW有顯著性的差異。且末梢指血的RBC、HGB、HCT、MCV、RDW均低于靜脈血。

(2)對57例/次末梢指血、靜脈血上述5項血細(xì)胞參數(shù)(RBC、HGB、HCT、MCV、RDW)進(jìn)行相關(guān)與回歸分析,結(jié)果見表2。

表2 57例/次末梢指血與靜脈血5項血細(xì)胞參數(shù)的直線回歸方程和相關(guān)系數(shù)Table2 The regression equation and correlation coefficient of five hematological parameters between fingertip and venous blood from cycling athletes

4 討論

血常規(guī),不僅是最常用的臨床檢查指標(biāo),也是體育科研中最常用的評定運(yùn)動員身體機(jī)能狀況的指標(biāo)。簡言之,RBC、HGB、HCT反映機(jī)體是否存在貧血;WBC反映機(jī)體是否有感染或免疫狀況;PLT反映機(jī)體凝血功能;根據(jù)MCV、MCH、MCHC值可將貧血分為以紅細(xì)胞生成減少為主的貧血、以紅細(xì)胞破壞過多為主的貧血及以失血為主的貧血等多類貧血;RDW主要用于篩選缺鐵性貧血。因此,上述血細(xì)胞參數(shù)具有十分重要的臨床價值和身體機(jī)能評定意義。血常規(guī)檢查中有末梢指血和靜脈血不同樣本,1995年全國血液學(xué)自動化分析質(zhì)量控制研討會紀(jì)要中指出:末梢血影響因素較多,不能得出準(zhǔn)確結(jié)果,其重復(fù)性、穩(wěn)定性都不及靜脈血標(biāo)本,應(yīng)提倡靜脈血。目前,關(guān)于末梢指血和靜脈血各項血細(xì)胞參數(shù)比較的差異,有非常多的文獻(xiàn)報道。但可能由于實驗樣本年齡、實驗樣本量、地區(qū)差異、采血方法、采用試劑、實驗儀器型號等多種因素的不同,文獻(xiàn)報道的血細(xì)胞每一種參數(shù)比較結(jié)果不盡相同,甚至有截然相反的結(jié)論。雖有這些不同,但一般認(rèn)為,靜脈血具有受采血技術(shù)操作影響小、無組織液混入、抗凝效果好,便于復(fù)查等優(yōu)點(diǎn),而指血末梢循環(huán)易受到外界環(huán)境變化、情緒變化、應(yīng)激反應(yīng)、疾病、局部瘢痕等情況影響,造成末梢循環(huán)障礙,在采集末梢血時血流不暢,常擠壓局部使組織液滲入,導(dǎo)致血液稀釋。因此,綜合文獻(xiàn)建議,血細(xì)胞計數(shù)儀宜采用靜脈血樣本,并且也更符合血細(xì)胞計數(shù)儀的設(shè)計要求。

隨著世界科技的發(fā)展,臨床檢驗技術(shù)的更新十分迅速。以臨床血液細(xì)胞常規(guī)檢驗而論,50年代電子血球計數(shù)儀問世,發(fā)展至今,全自動18參數(shù)的血細(xì)胞分析儀已經(jīng)進(jìn)入我國。本實驗中使用的diff2三分類血細(xì)胞計數(shù)儀為美國Beckman Coulter公司生產(chǎn),在臨床檢測中有較高聲譽(yù)也應(yīng)用較廣泛。它自動化程度較高、計數(shù)精確,可以重復(fù)計數(shù)(3次)、具有識別系統(tǒng)、監(jiān)控系統(tǒng)、自動清洗保養(yǎng)控制系統(tǒng)和全自動校正程序。采用液晶觸摸屏幕,操作簡易,使用抗凝血在儀器內(nèi)自動稀釋,不但減少實驗誤差也提高了結(jié)果精確性,故障發(fā)生率低,采血量少,是一臺性能優(yōu)良的血液分析儀。因此,使用這種全自動化儀器,必須保證標(biāo)本采集的質(zhì)量,才能得到高精度的檢驗結(jié)果。否則,由于標(biāo)本采集不當(dāng),帶來很高的誤差,就失去了使用這種高精密度儀器的意義。由于自身末梢指血與靜脈血確實存在著差異,為了保證檢測質(zhì)量,使測定值更接近真值,即使全自動血細(xì)胞分析儀一般都設(shè)有末梢指血和靜脈血2種測定模式(其目的是為了方便不同人群的需要),行業(yè)公認(rèn)在使用全自動血球分析儀時,應(yīng)盡量使用靜脈血檢測。

我所生化實驗室在實際工作中,根據(jù)運(yùn)動員或運(yùn)動隊的可接受程度,測定血細(xì)胞參數(shù)也同時存在末梢指血預(yù)稀釋和靜脈血抗凝全血兩種測定模式。我們上述實驗也證實自身末梢指血與靜脈血確實存在差異,57例/次末梢指血和靜脈血9項血細(xì)胞參數(shù)測定結(jié)果顯示:末梢指血的RBC、HGB、HCT、MCV、RDW均顯著低于靜脈血,而WBC、MCH、MCHC、PLT沒有顯著性的差異?？蒲泄ぷ魅藛T對于實驗室不同模式下的測定結(jié)果,要充分考慮上述差異后再進(jìn)行評定,必要時可適當(dāng)參考文獻(xiàn)報道和上述各參數(shù)的相關(guān)回歸方程進(jìn)行統(tǒng)一性判斷。

[1]馮連世,馮美云,馮煒權(quán).運(yùn)動訓(xùn)練的生理生化監(jiān)控方法[M].北京:人民體育出版社,2006.

[2]馮連世,李開剛.運(yùn)動員機(jī)能評定常用生理生化指標(biāo)測試方法及應(yīng)用[M].北京:人民體育出版社,2002.

[3]宗丕芳.采用定值新鮮血校準(zhǔn)CISF-820血細(xì)胞分析儀[J].中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志,2006,25(6):703～705.

[4]馮勝強(qiáng),劉德軍,靳迪,等.不同采血方法在ACT5diff血細(xì)胞分析儀對白細(xì)胞計數(shù)及其分類的準(zhǔn)確性探討[J].Jiangxi J.Med Lab Sci,2007,25(4):406.