不同方法檢測肌酐清除率的對比研究

吳 寧

云南省老年病醫(yī)院檢驗科，云南昆明 650011

肌酐是一種肌酸代謝的終末產(chǎn)物，其是由磷酸肌酸通過脫磷酸基，并閉合成環(huán)從而形成的一種內(nèi)脫水物。血中肌酐的濃度主要是與腎小球濾過率有關(guān)，因而血清肌酐濃度的測定是評價臨床腎功能的重要指標(biāo)[1]。目前實驗室血清肌酐的常規(guī)檢測方法主要有兩種：堿性苦味酸法和酶法[2]。本研究對本單位采用的酶法和堿性苦味酸法檢測肌酐的差異進(jìn)行了比較，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 檢測儀器

采用日立7020和美國貝克曼DXC600全自動的生化分析檢測儀。

1.2 檢測和分析的方法

（1）酶法X于日立7020的 儀器進(jìn)行檢測；堿性苦味酸法Y于貝克曼DXC600 儀器上進(jìn)行檢測。（2）每天隨機(jī)抽取8 份臨床樣本，分別用兩種方法進(jìn)行重復(fù)檢測，一共檢測5 d。（3）對檢測的結(jié)果進(jìn)行記錄（Xij 和Yij），對每個檢測樣本的結(jié)果的均數(shù)（Xi 和Yi） 進(jìn)行計算、樣本經(jīng)重復(fù)檢測后的值間差值的絕對值（Dxi 和Dyi）和這兩種不同的檢測方法檢測的結(jié)果的均數(shù)之間的差值（Yi-Xi）。對進(jìn)行重復(fù)檢測樣本得到的檢測值間的差值（Dxi 和Dyi）的均值進(jìn)行計算。對兩種不同檢測方法檢測結(jié)果均值間差值（Yi-Xi）的均值進(jìn)行計算。如果判斷大于平均數(shù)的4倍時，為無效的檢驗結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。采用Kappa常數(shù)（k）來評價兩者結(jié)果的一致性。Kappa值的判定標(biāo)準(zhǔn)：K＜0弱；0～0.2 差；0.21～0.40尚好；0.41～0.60中度；0.61～0.80高度；0.81～1最強(qiáng)。

2 結(jié)果

部分患者樣本檢驗結(jié)果見表1。所有樣本重復(fù)測定值間的差值均未超過兩種方法測定結(jié)果均值間差值的平均數(shù)，所有結(jié)果均有效。計算兩種方法測定患者血清樣本肌酐濃度結(jié)果，經(jīng)Kappa檢驗，K=0.9237，一致性較好。

利用直線相關(guān)方程對兩法在不同肌酐濃度作預(yù)期偏倚和相對偏差。兩種方法的回歸線性方程是：Y=0.9987X+15.953，（相關(guān)系數(shù)r =0.997 9），以1/4 CLIA'88= 3. 75% 為判斷方法間的偏差臨床是否可接受的允許值， 結(jié)果顯示在低值和高值時苦味酸法與酶法的偏差不能接受。見表2。

表1 患者樣本檢驗結(jié)果

表2 兩種方法測定血肌酐預(yù)期偏倚、相對偏差及臨床可接受性

3 討論

目前肌酐測定方法主要包括化學(xué)法（堿性苦味酸法）、酶法、電極法、毛細(xì)管電泳法及高效液相層析法等。堿性苦味酸法的成本較低，操作較簡便，是一種測定肌酐的經(jīng)典方法，但存在一定的缺陷，其受維生素C、乙酰乙酸、丙酮酸以及青霉素G、頭孢唑啉等能與苦味酸起反應(yīng)的假肌酐物質(zhì)的干擾，因而結(jié)果特異性不高[3]。

雖然酶法的實驗試劑價格較貴，但是基質(zhì)效應(yīng)對肌酐酶法的影響較小，測試結(jié)果穩(wěn)定，有很好的重復(fù)性，特異性高，越來越受到實驗室的歡迎。同時肌酐酶法的線性范圍寬，是目前一種比較理想的肌酐檢測方法。而當(dāng)血腫肌酐的濃度超出一定范圍時苦味酸法就比較難準(zhǔn)確的進(jìn)行測定了。相關(guān)研究表明堿性苦味酸測定方法的線性上限是2 210μmmol/L，而肌酐酶法的線性上限則可高達(dá)8 840μmmol/L[1]。本研究對分別采用肌酐酶法和堿性苦味酸法兩種不同的方法測定血清中肌酐含量的結(jié)果作了比較和偏倚的評估。肌酐酶法作為對照的方法，評估了Jaffe's 速率法，經(jīng)Kappa檢驗，兩種不同方法檢測的結(jié)果一致性較好。隨著血中肌酐濃度的不斷增大，相對預(yù)期偏倚隨之減小?？梢杂弥本€回歸方程評估方法間的系統(tǒng)偏倚。兩種方法的回歸線性方程是：Y=0.998 7X+15.953 （相關(guān)系數(shù)r =0.997 9），以1/4 CLIA'88= 3.75% 為判斷方法間的偏差臨床是否可接受的允許值， 由結(jié)果得知低值和高值時苦味酸法與酶法的偏差不能接受，當(dāng)血清肌酐濃度為100.00 μmmol/L、500.00 μmmol/L和900.00 μmmol/L時，Jaffe's 速率法的偏倚分別為11.78%、2.64%、6.51%，與徐國賓等[4]、陳雪梅等[5]的研究結(jié)果相同。

苦味酸法的測定結(jié)果與真值之間存在偏差， 當(dāng)SCr＜100 μmmol/L， 實驗結(jié)果假性偏高，大約偏高5%～10%，但 SCr＞200 μmmol/L 時，測 試 結(jié) 果 則 假 性 偏 低，約10%～15%。亦有相關(guān)文獻(xiàn)報道當(dāng)血清Cr ＜ 80 μmol/ L 時，兩種方法的測定值差異有統(tǒng)計學(xué)意義（ P＜0. 05） ，同時酶法的測定值普遍較苦味酸法低，甚至比正常參考值的低限低：當(dāng)血清Cr＜200 μmol/ L 時，兩種方法的測定結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05） ：但當(dāng)血清Cr＞200 μmol/L 時，兩者檢測結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異，酶法的測定值均較苦味酸法的的高[6]。因此可以看出，酶法的靈敏度高，是一種理想的血清肌酐測定方法。回收試驗中酶法的平均回收率均高于苦味酸法的平均回收率[6]。

以上研究結(jié)果提示，當(dāng)用不同的方法檢測同一份標(biāo)本的血肌酐濃度水平時，不同的檢測的方法，檢測的結(jié)果并不相同[7]。因此在測定中，因為根據(jù)測定方法的不同建立不同的參考范圍，對比校正不同的檢測方法，才能給臨床準(zhǔn)確一致的檢測結(jié)果。

[1]張東玲.肌酐測定的方法學(xué)進(jìn)展[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志， 2006，27（6）：521-523.

[2]張建平，王治國.肌酐檢測的準(zhǔn)確性問題研究[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2008，29（6）：501-503.

[3]武強(qiáng)，王龍武，申春梅.肌氨酸氧化酶法測定健康成人血清肌酐參考值的建立 [J].檢驗醫(yī)學(xué)， 2009，24（1）：69-70.

[4]徐國賓，李志艷.應(yīng)重視實驗室檢查在慢性腎病早期診斷中的應(yīng)用[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2006，29（11）：961-965.

[5]陳雪梅，王亞平，王芳. 兩種測定血清肌酐方法偏倚的比較[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2010，28（5）：512-513.

[6]屈引婷， 王鴻. 兩種不同方法檢測血清肌酐結(jié)果的比較[J]. 現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志， 2005 ，20 （4） ： 82.

[7]張建平，王治國.肌酐檢測的準(zhǔn)確性問題研究[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2008，29（6）：501-503.