油桐籽化學成分研究

毛紹名，章懷云* ，張 盛，劉仲華，王紅兵

1中南林業(yè)科技大學 林業(yè)生物技術(shù)湖南省重點實驗室，長沙410004;2國家植物功能成分利用工程技術(shù)研究中心，長沙410128;3同濟大學生命科學與技術(shù)學院，上海200092

油桐(Vernicia fordii)為大戟科油桐屬植物，落葉性喬木，全世界共3 個種，分布于亞洲東部地區(qū)，在我國有2 種，主產(chǎn)于湖南、四川、貴州等省。油桐的葉、根和種子均具有抗炎作用［1］。文獻報道目前從油桐中主要分離得到二萜、三萜及黃酮類化合物［2-5］。在從大戟科植物中尋找具有生物活性成分的研究過程中，我們對油桐的種子部位進行了系統(tǒng)的化學成分研究，從中分離得到12 個單體化合物，通過1H NMR、13C NMR、EI-MS 等現(xiàn)代波譜鑒定技術(shù)以及與文獻化合物數(shù)據(jù)對照等方法對所分到化合物進行了結(jié)構(gòu)鑒定，分別為12-去氧-13-棕櫚酸佛波酯(1)、白樺脂酸(2)、大戟醇(3)、α-香樹脂醇乙酸酯(4)、羽扇豆醇乙酸酯(5)、3-乙酰偽蒲公英甾醇(6)、芹菜素(7)、槲皮素(8)、木犀草素(9)、桂皮酸(10)、胡蘿卜苷(11)、β-谷甾醇(12)?；衔?，3～10 為首次從油桐中分離得到。

1 儀器與材料

RDCSY-I 型熔點測定儀(溫度計未經(jīng)校正);核磁共振譜用Bruker AM-400 型共振儀測定，TMS 為內(nèi)標;質(zhì)譜由MAT-711 型質(zhì)譜儀測定;Sephadex LH-20 凝膠(Pharmacia 公司)，100～200、200～300 目色譜硅膠和薄層色譜用硅膠H 均為青島海洋化工廠生產(chǎn)，顯色劑為5%濃硫酸乙醇溶液和碘蒸氣。

油桐籽于2011 年10 月采自湖南湘西自治州永順縣，經(jīng)中南林業(yè)科技大學林學院王承南教授鑒定，樣品編號2011-10-AS1，標本保存于中南林業(yè)科技大學林業(yè)生物技術(shù)湖南省重點實驗室。

2 提取與分離

油桐籽3 kg，粉碎，用95%乙醇室溫冷浸提取3次(每次4 d)，合并提取液，回收溶劑得浸膏200 g。浸膏分別用石油醚，氯仿，乙酸乙酯及正丁醇萃取，得氯仿部位浸膏50 g，乙酸乙酯部位浸膏45 g。氯仿部位浸膏以等量硅膠拌樣上硅膠柱層析，用氯仿-甲醇(30∶1～1∶1)梯度洗脫，合并相同流份，各組分再經(jīng)反復硅膠柱層析分離純化，得到化合物2 (8.0 mg)、4 (6.8 mg)、5 (4.7 mg)、6 (9.9 mg)、7 (6.5 mg)和12 (13.5 mg)。乙酸乙酯部位經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿-甲醇(30∶1～0∶1)梯度洗脫，合并成分相同組分，各組分再經(jīng)Sephadex LH-20 以及反復硅膠柱層析分離純化，得到化合物1 (4.6 mg)、3 (6.0 mg)、8 (10.0 mg)、9 (7.0 mg)、10 (7.3 mg)和11(15.0 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 無色油狀物;EI-MS m/z:586［M］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:7.55 (1H，brs，H-1)，2.43/2.53 (2H，q，J = 19.0 Hz，H-5)，5.65 (1H，d，J = 4.1 Hz，H-7)，2.99 (1H，m，H-8)，3.23 (1H，brs，H-10)，1.96 (1H，m，H-11)，1.51(1H，dd，J =14.2，11.0 Hz，H-12α)，2.03 (1H，dd，J = 14.2，6.9 Hz，H-12β)，0.80 (1H，d，J = 5.2 Hz，H-14)，1.16 (3H，s，H-16)，1.04 (3H，s，H-17)，0.86 (3H，d，J = 6.2 Hz，H-18)，1.65 (3H，d，J =1.7 Hz，H-19)，3.94/4.01 (2H，ABq，J = 12.6 Hz，H-20)，2.26 (2H，t，J = 7.5Hz，H-2')，1.58 (2H，m，H-3')，1.23 (20H，brs，H-4'-H-13')，1.62 (2H，m，H-14)，1.24 (2H，m，H-15)，0.89 (overlapping，H-16');13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:161.4 (C-1)，132.9 (C-2)，209.4 (C-3)，73.9 (C-4)，38.7(C-5)，140.0 (C-6)，130.5 (C-7)，39.3 (C-8)，76.2 (C-9)，55.9 (C-10)，36.4 (C-11)，32.0 (C-12)，63.5 (C-13)，32.7 (C-14)，22.8 (C-15)，23.4(C-16)，15.5 (C-17)，18.7 (C-18)，10.2 (C-19)，68.4 (C-20)，176.1 (C-1')，34.7 (C-2')，24.9 (C-3')，29.2-29.8 (C-4'-C-13')，32.1 (C-14')，22.9(C-15')，14.2 (C-16')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道一致［6］，故鑒定為12-Deoxyphorbol-13-hexadecanoate。

化合物 2 白色粉末;EI-MS m/z:456［M］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:0.76 (3H，s，H-24)，0.83 (3H，s，H-25)，0.94 (3H，s，H-23)，0.95 (3H，s，H-26)，0.98 (3H，s，H-27)，1.70 (3H，s，H-30)，3.21 (1H，dd，J = 11.2，5.0 Hz，H-3)，4.61 (1H，br s，H-29a)，4.72 (1H，br s，H-29b);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:38.9 (C-1)，28.1 (C-2)，79.2 (C-3)，39.0 (C-4)，55.5 (C-5)，18.4 (C-6)，34.5 (C-7)，40.9 (C-8)，50.7 (C-9)，37.4 (C-10)，21.0 (C-11)，25.6 (C-12)，38.6 (C-13)，42.6(C-14)，30.7 (C-15)，32.3 (C-16)，56.5 (C-17)，47.1 (C-18)，49.4 (C-19)，150.6 (C-20)，29.8 (C-21)，37.2 (C-22)，28.1 (C-23)，15.5 (C-24)，16.2(C-25)，16.3(C-26)，14.8 (C-27)，181.2 (C-28)，109.8 (C-29)，19.5 (C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致［7］，故鑒定化合物2 為白樺脂酸。

化合物 3 白色粉末;EI-MS m/z:426［M］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:5.08 (1H，t，J= 7.0 Hz，H-24)，3.23 (1H，dd，J = 4.8，11.6 Hz，H-3)，2.17 (2H，m，H-7)，1.69 (3H，s，H-27)，1.60(3H，s，H-26)，1.00 (3H，s，H-19)，0.95 (3H，s，H-28)，0.87 (3H，s，H-30)，0.84 (3H，d，J = 6.4 Hz，H-21)，0.80 (3H，s，H-29)，0.51 (3H，s，H-18);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:35.4 (C-1)，28.0 (C-2)，79.2 (C-3)，38.9 (C-4)，51.1 (C-5)，19.1 (C-6)，27.8 (C-7)，134.1 (C-8)，133.7 (C-9)，37.4(C-10)，21.7 (C-11)，31.0 (C-12)，44.3 (C-13)，50.2 (C-14)，29.9 (C-15)，28.3 (C-16)，49.8 (C-17)，15.7 (C-18)，20.3 (C-19)，36.0 (C-20)，18.9(C-21)，35.4 (C-22)，24.8 (C-23)，125.4 (C-24)，131.0 (C-25)，17.8 (C-26)，25.8 (C-27)，19.1 (C-28)，15.8 (C-29)，24.6 (C-30)。1H NMR 與13C NMR 波譜數(shù)據(jù)與文獻報道一致［8］，故鑒定為Euphol。

化合物 4 白色粉末;EI-MS m/z:468［M］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:2.05 (3H，s，OCCH3)，1.08 (3H，s，H-28)，1.02 (3H，s，H-23)，0.98 (3H，s，H-27)，0.93 (3H，d，J = 6.1 Hz，H-29)，0.88 (3H，s，H-26)，0.87 (3H，s，H-24)，0.80(3H，s，H-25)，0.80 (3H，d，J = 6.1 Hz，H-30)，5.13 (1H，t，J = 3.2 Hz，H-12)，4.53 (1H，dd，J =9.6，7.6 Hz，H-3);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:38.6 (C-1)，23.5 (C-2)，81.1 (C-3)，37.8 (C-4)，55.4 (C-5)，18.4 (C-6)，31.4 (C-7)，40.2 (C-8)，47.8 (C-9)，36.9 (C-10)，23.8 (C-11)，124.5 (C-12)，139.8 (C-13)，42.2 (C-14)，28.2 (C-15)，26.7 (C-16)，33.9 (C-17)，59.2 (C-18)，39.8 (C-19)，39.8 (C-20)，31.4 (C-21)，41.7 (C-22)，28.2(C-23)，17.0 (C-24)，15.9 (C-25)，16.9 (C-26)，23.4 (C-27)，28.9 (C-28)，17.6 (C-29)，21.5 (C-30)，171.2 (CH3CO)，21.4 (CH3CO)。以上數(shù)據(jù)與文獻報道的α-香樹脂醇乙酸酯一致［9］。

化合物5 無色晶體(EtOAc);mp.217～219℃;EI-MS m/z:468 ［M］+;1H NMR (CDCl3，400 MHz)δ:4.68 (1H，brs，H-29a)，4.57 (1H，brs，H-29b)，4.45 (1H，dd，J = 6.2，8.5 Hz，H-3)，2.03(3H，s，OAc)，1.68 (3H，s，H-30)，1.03 (3H，s，H-26)，0.94 (3H，s，H-27)，0.85 (3H，s，H-25)，0.84(3H，s，H-23)，0.83 (3H，s，H-24)，0.79 (3H，s，H-28);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:38.2 (C-1)，23.9 (C-2)，81.1 (C-3)，38.2 (C-4)，55.5 (C-5)，18.2 (C-6)，34.4 (C-7)，41.0 (C-8)，50.5 (C-9)，37.2 (C-10)，21.1 (C-11)，25.3 (C-12)，37.9 (C-13)，42.9 (C-14)，27.6 (C-15)，35.7 (C-16)，43.1(C-17)，48.2 (C-18)，48.4 (C-19)，151.1 (C-20)，29.9 (C-21)，40.1 (C-22)，28.1 (C-23)，16.6 (C-24)，16.3 (C-25)，16.1 (C-26)，14.7 (C-27)，18.1(C-28 )，109.5 (C-29 )，19.4 (C-30 )，21.5(CH3CO)，171.2 (CH3CO)。其理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)與文獻報道的羽扇豆醇乙酸酯一致［10］。

化合物6 白色片狀結(jié)晶(石油醚-乙酸乙酯);mp.213～215 ℃;EI-MS m/z:468 ［M］+;1H NMR(400 MHz，CDC13)δ:0.80，0.82，0，82，0.84，0.91，0.99，1.01 (each 3H，s，CH3)，2.01 (3H，s，CH3CO)，4.61 (1H，m)，5.27 (1H，m);13C NMR(100 MHz，CDC13)δ:38.6 (C-1)，23.8 (C-2)，81.1 (C-3)，37.2 (C-4)，55.5 (C-5)，18.4 (C-6)，34.3 (C-7)，41.2 (C-8)，50.5 (C-9)，37.2 (C-10)，21.7 (C-11)，27.2 (C-12)，39.4 (C-13)，42.3(C-14)，27.7 (C-15)，36.5 (C-16)，34.5 (C-17)，48.8 (C-18)，42.5 (C-19)，139.9 (C-20)，119.0(C-21)，36.8 (C-22)，28.1 (C-23)，16.5 (C-24)，16.2 (C-25)，16.7 (C-26)，14.8 (C-27)，21.7 (C-28)，17.8 (C-29)，22.7 (C-30)，21.5 (CH3CO)，171.2 (CH3CO)。以上數(shù)據(jù)與文獻報道的3-乙酰偽蒲公英甾醇基本一致［11］。

化合物7 黃色粉末;EI-MS m/z:270［M］-;1H NMR (DMSO-d6，400 MHz)δ:7.92 (2H，d，J = 8.7 Hz，H-2'，6')，6.93 (2H，d，J = 8.7 Hz，H-3'，5')，6.19 (1H，d，J = 1.8 Hz，H-6)，6.48 (1H，d，J =1.8 Hz，H-8)，6.76 (1H，s，H-3);13C NMR (DMSOd6，100 MHz)δ:164.1 (C-2)，102.8 (C-3)，181.7(C-4)，161.1 (C-5)，98.8 (C-6)，163.7 (C-7)，93.9 (C-8)，157.3 (C-9)，103.7 (C-10)，121.2 (C-1')，128.4 (C-2'，6')，115.9 (C-3'，5')，161.4 (C-4')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道一致［12］，故鑒定化合物7 為芹菜素。

化合物 8 黃色粉末;EI-MS m/z:302［M］+;1H NMR (DMSO-d6，400 MHz)δ:6.19 (1H，d，J = 1.8 Hz，H-6)，6.41 (1H，d，J = 1.8 Hz，H-8)，7.68 (1H，d，J = 2.1 Hz，H-2')，6.89 (1H，d，J= 8.5 Hz，H-5')，7.55 (1H，dd，J = 2.1，8.5 Hz，H-6');13C NMR (DMSO-d6，100 MHz)δ:145.7 (C-2)，135.7 (C-3)，175.9 (C-4)，160.7 (C-5)，98.2(C-6)，163.9 (C-7)，93.4 (C-8)，156.2 (C-9)，103.0 (C-10)，122.0 (C-1')，115.1 (C-2')，145.1(C-3')，147.7(C-4')，115.6 (C-5')，121.5 (C-6')。1H NMR 和13C NMR 數(shù)據(jù)與文獻報道一致［13］，故鑒定化合物8 為槲皮素。

化合物 9 黃色粉末;EI-MS m/z:286［M］+;1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:6.24 (1H，d，J = 2.0 Hz，H-6)，6.43 (1H，d，J = 2.0 Hz，H-8)，6.91 (1H，d，J = 8.5 Hz，H-5')，7.31-7.42 (2H，m，H-2'，6');13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:165.9(C-2)，103.8 (C-3)，183.8 (C-4)，163.1 (C-5)，100.1 (C-6)，166.2 (C-7)，94.9 (C-8)，159.3 (C-9)，105.3 (C-10)，120.3 (C-1')，114.1 (C-2')，146.9 (C-3')，150.9 (C-4')，116.7 (C-5')，123.7(C-6')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道一致［14］，故鑒定化合物9 為木犀草素。

化合物 10 白色粉末;ESI-MS m/z:256［M］+;1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:7.80 (1H，d，J = 15.9 Hz，H-2)，7.58 (2H，m，H-5，9)，7.41(3H，m，H-6，7，8)，6.49 (1H，d，J = 15.9 Hz，H-3);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:172.2 (C-1)，134.0 (C-2)，130.8 (C-3)，147.3 (C-4)，129.1 (C-5)，128.5 (C-6)，117.4 (C-7)，128.5 (C-8)，129.1(C-9)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致［15］，故鑒定化合物10 為桂皮酸。

化合物11 白色粉末(95%乙醇);mp 278～280 ℃。與對照品共薄層，Rf 值相同，混合熔點不下降。由此鑒定化合物為胡蘿卜苷。

化合物12 白色針晶(CHCl3);mp 138～139℃。與對照品共薄層，Rf值相同，混合熔點不下降。由此鑒定化合物為β-谷甾醇。

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