W/O/W 復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備水溶性藥物微球研究進(jìn)展

袁清霞，趙龍巖，程 杰，曾富華

(1．湛江師范學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，廣東 湛江 524048;2．湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南 長沙410128)

W/O/W 復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備水溶性藥物微球研究進(jìn)展

袁清霞1，2，趙龍巖1，程 杰1，2，曾富華1

(1．湛江師范學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，廣東 湛江 524048;2．湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南 長沙410128)

介紹了W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備水溶性藥物微球的基本步驟及存在問題，重點(diǎn)綜述制備工藝的關(guān)鍵影響因素，并在此基礎(chǔ)上闡述W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法技術(shù)的研究進(jìn)展，提出該法在實(shí)際應(yīng)用中存在的主要問題，并對其發(fā)展前景進(jìn)行展望。

W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法;微球;綜述

與傳統(tǒng)劑型相比，藥物微球有減少給藥次數(shù)、改善患者順從性、保持藥物活性等優(yōu)點(diǎn)。被包囊藥物中，水溶性成分占很大一部分。因此，近年來制備水溶性藥物微球得到越來越多的關(guān)注。W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法以其操作簡單、控制工藝參數(shù)方便、無需調(diào)節(jié)pH和大幅變溫，且相比單乳液體系大大提高了微球的載藥量和包囊率，具有可控釋等優(yōu)勢而常用于包囊水溶性芯材。

W/O/W復(fù)乳液又稱乳液的乳液，分散相(水相)液滴本身包含更小的分散相液滴，也就是溶有芯材的內(nèi)水相包囊在油滴中，油包水液滴再分散到外水相中，油相(連續(xù)相)將內(nèi)外水相分開，可看作薄的半透性膜［1］。該技術(shù)由Vrancken和Claeys于1970年獲得專利［2］，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域。

1 W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備水溶性藥物微球的基本步驟及存在問題

W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備水溶性藥物微球的過程可大致分為四個步驟:首先，溶有藥物的水溶液(W1，內(nèi)水相)分散在溶解囊壁材料的有機(jī)溶劑(O，油相)中，形成W1/O初乳液;隨后，將W1/O初乳液分散在水溶液(W2，外水相)中獲得W1/O/W2復(fù)乳液;第三步，去除有機(jī)溶劑，固化微球;最后，離心收集微球，洗滌、干燥［3-4］。

復(fù)合乳液系統(tǒng)制備簡單，但同樣存在自身缺點(diǎn)。相對單乳液，W/O和O/W界面過多的自由能導(dǎo)致復(fù)合乳液熱力學(xué)不穩(wěn)定;復(fù)合乳液系統(tǒng)自身組成和微結(jié)構(gòu)也會引起一系列不穩(wěn)定的破壞途徑，不穩(wěn)定的主要機(jī)制可概括為:①外部液滴聚集;②內(nèi)部液滴聚集，但外液滴界面不改變;③內(nèi)部液滴聚集，外部液滴界面也發(fā)生變化，內(nèi)部水相分散到外水相;④內(nèi)部液滴收縮或膨脹。這些變化通常同時(shí)發(fā)生，共同加速復(fù)合乳液的不穩(wěn)定［1］，復(fù)合乳液的不穩(wěn)定進(jìn)一步影響微球性質(zhì)。有些包囊物如蛋白質(zhì)趨向吸附于水-油界面，引起解折疊、失活以及不可逆的聚集;乳化過程高的剪切力還會影響包囊物結(jié)構(gòu)及生物活性，這些都與制備過程的各種因素有關(guān)?？傊⑶虻淖罱K性質(zhì)，如大小分布、形態(tài)、載藥量、包囊率、釋放等都受制備過程包括囊壁材料性質(zhì)、有機(jī)溶劑的選擇及去除、水油相體積比、乳化時(shí)間等多種因素的影響［4-5］。

2 W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備水溶性藥物微球的關(guān)鍵影響因素

2．1 囊壁材料

1988 年，Ogawa 等［6］首先以聚乳酸(PLA)，聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)為材料，通過W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備可注射利普安微囊，近20多年來，以該法制備水溶性藥物的PLA、PLGA微球得到廣泛應(yīng)用，究其原因，PLA、PLGA具無毒、生物相容性好、可生物降解等優(yōu)點(diǎn)，可制成不同載體運(yùn)載多肽、疫苗、小分子等，美國食品與藥品管理局已批準(zhǔn)上市［7］。以該法制備PLA、PLGA藥物微球也存在不可忽視的缺點(diǎn)，如聚合物降解產(chǎn)生的酸性環(huán)境可能引起包囊物變性;疏水性使一些包囊物吸附，導(dǎo)致包囊物聚集及釋放不完全等。聚乙二醇(PEG)具顯著的生物和物理化學(xué)性質(zhì)，包括獨(dú)特的立體穩(wěn)定性、高度親水性、鏈靈活性、電中性，缺乏功能團(tuán)不能與體內(nèi)生物成分反應(yīng)［8］。因此研究者在PLA、PLGA單體乙交酯、丙交酯的基礎(chǔ)上引入PEG片段，合成具不同組成及結(jié)構(gòu)的AB型二嵌段共聚物，ABA、BAB型三嵌段共聚物(A具疏水性，B具親水性)作為壁材，共聚物同時(shí)具生物相容性及兩親性可作為更好的載體。

Liu等［9］以W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備包囊腫瘤壞死因子受體阻斷肽微球，PEG-PLGA作為囊壁材料。制備的微粒近圓形，表面光滑，無聚集現(xiàn)象;平均直徑142～227 nm;包囊率大于45%;體外釋放為二相性模式，相對穩(wěn)定的釋放達(dá)12 d以上;聚合物中PEG含量增加時(shí)，釋放速度加快。結(jié)果顯示PEG-PLGA微球具有較好的運(yùn)載水溶性肽類的潛能。Xu等［10］在PLA的基礎(chǔ)上引入PEG、甲氧基聚乙二醇(Me-PEG)，合成并比較了三嵌段共聚物PLEG和二嵌段共聚物MePLEG對微球粒徑及包囊率的影響。微球粒徑在納米范圍，分散性良好。二嵌段、三嵌段共聚物在乳化過程充當(dāng)乳化劑，親水、疏水基團(tuán)分別延伸到水、油相，穩(wěn)定乳液表面。推測二嵌段共聚物自乳化能力較強(qiáng)，PLEG三嵌段共聚物由于較大的立體位阻難以穩(wěn)定乳液表面，因此MePLEG微球粒徑比PLEG微球的小;PLEG微球的包囊率幾乎都達(dá)90%以上，遠(yuǎn)大于MePLEG微球(79．54%和60．06%)，估計(jì)二嵌段共聚物結(jié)構(gòu)在制備過程易引起包囊物滲漏到外水相。牛文強(qiáng)等［11］選用具較好生物降解性和相容性的三嵌段共聚物PLA/PEG/PLA(PELA)為壁材制備包囊胰島素的微球，微球平均粒徑為180～350 nm，圓形，大小均一，共聚物中PEG含量越低、共聚物濃度越高時(shí)微球的包囊率越高。

2．2 添加物

高能乳化(超聲處理、均質(zhì)處理等)是形成穩(wěn)定乳液的常規(guī)方法，但同時(shí)也是破壞活性成分的主要原因，如處理過程活性成分與有機(jī)溶劑大面積接觸、高的剪切力、產(chǎn)生的自由基團(tuán)都會破壞活性成分。因此，實(shí)際操作中通常引入添加物作為保護(hù)性膠體幫助形成穩(wěn)定乳液。

2．2．1 表面活性劑 W/O/W乳液兩個熱力學(xué)不穩(wěn)定的W/O和O/W界面需不同的乳化劑穩(wěn)定。低親水-親脂平衡值(HLB)表面活性劑相對親油，在初乳化步驟穩(wěn)定W/O初乳液，常用司盤系列;吐溫系列是常用的外水相表面活性劑，其HLB值較高，相對親水，因此加入外水相穩(wěn)定W/O/W乳液，兩種表面活性劑對微球性質(zhì)有較大影響，在研究中通常聯(lián)合使用［12］，尋找不同系列、不同濃度的優(yōu)化組合。

Khoee等［13］制備青霉素G微球，在初乳化、復(fù)乳化階段分別使用司盤、吐溫作為表面活性劑，發(fā)現(xiàn)微球大小變化(75～638 nm)取決于表面活性劑類型及含量。吐溫對微球粒徑影響比司盤大，聯(lián)合使用司盤60和吐溫60，微球粒徑顯著小于司盤20和吐溫20的組合。司盤主要密封內(nèi)水相的青霉素G，吐溫增加外水相黏度，防止青霉素G擴(kuò)散到外水相，司盤和吐溫含量增加，微球包囊率上升，突釋下降。Zhu等［14］制備胰島素微球，也分別使用司盤及吐溫作為兩個乳化步驟的表面活性劑進(jìn)行類似研究。但較顯著影響微球粒徑的是司盤;粒徑大小與加權(quán)HLB值成正比，聯(lián)合使用司盤80和吐溫80，其加權(quán)HLB值最小，粒徑最小。吐溫對載藥率的影響大于司盤，司盤量恒定時(shí)，吐溫含量上升，載藥率快速上升;吐溫恒定時(shí)，司盤含量上升，累積釋藥率下降。相同濃度條件下，聯(lián)合使用司盤60和吐溫60，載藥量比聯(lián)合司盤80和吐溫80高，累積釋藥率比聯(lián)合司盤80和吐溫80低。

2．2．2 穩(wěn)定劑 聚乙烯醇(PVA)低毒，具良好的雙親性，能提高水相黏度并吸附在水-油界面，是很好的乳化劑和穩(wěn)定劑。通常加入到外水相作為穩(wěn)定劑，增大外水相黏度和降低包囊物擴(kuò)散速度進(jìn)而影響微球形態(tài)及最終性質(zhì)。

Liu等［15］研究了艾塞那肽PLGA微球的制備、特征及藥效。發(fā)現(xiàn)微球粒徑隨外水相PVA濃度上升顯著下降。PVA濃度1%～3%，外水相黏度增大，減少艾塞那肽由內(nèi)水相向外水相的擴(kuò)散，包囊率從76．1%上升到82．3%;PVA濃度增大到5%時(shí)，包囊率下降，推測PVA濃度升高時(shí)乳液液滴太小以至不能形成厚而致密的保護(hù)性聚合物囊壁，更多艾塞那肽擴(kuò)散到外水相。Ayoub等［16］研究多種形成參數(shù)對復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法包囊親水性藥物的影響。外水相采用0．5%PVA作為穩(wěn)定劑，復(fù)合乳液最穩(wěn)定，微球粒徑在納米范圍內(nèi)。Chaisri等［17］制備頭孢氨芐微球，評價(jià)各制備因素對微球性質(zhì)的影響以獲得適合治療奶牛乳腺炎的運(yùn)載系統(tǒng)。其中外水相PVA濃度固定為2%，體積從10 mL增加到50 mL時(shí)，分散液滴的剪切力減小，微球直徑從3．2 μm增大到4．8 μm，包囊率顯著下降，原因是外水相體積增大，更多藥物溶解其中。PVA相對分子質(zhì)量從15 000上升到100 000，外水相黏度增大，穩(wěn)定乳液液滴防止聚集，微球從4．95 μm降到3．17 μm;頭孢氨芐的包囊率在 PVA相對分子質(zhì)量為100 000時(shí)最大，但CPX的包囊率隨相對分子質(zhì)量增大上升不明顯。

2．2．3 鹽類和糖類 隨著W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法技術(shù)的發(fā)展，在聯(lián)合司盤和吐溫作為表面活性劑、PVA作為穩(wěn)定劑的基礎(chǔ)上，添加適當(dāng)濃度的鹽類、糖類等來調(diào)節(jié)滲透壓是維持乳液穩(wěn)定，改善微球性質(zhì)的有效策略。

Ito及其團(tuán)隊(duì)［18］結(jié)合SPG膜乳化技術(shù)制備藍(lán)色葡聚糖PLGA微球，先得到均一W1/O初乳液，W2中添加NaCl，微粒表面因吸附了分子而產(chǎn)生的立體位阻促進(jìn)乳液液滴的穩(wěn)定，W1/O/W2復(fù)乳液滴隨NaCl濃度增大而減小;但最后制得的微球隨NaCl濃度上升而增大，且大于未添加NaCl的，這是加入的NaCl影響微球表面電勢，微球表面雙電層擠壓的結(jié)果。因此，就制備乳液和聚合物微球而言，制備過程添加NaCl得到不同結(jié)果。NaCl抑制藥物滲漏，載藥率隨NaCl濃度上升而增大。添加NaCl可加強(qiáng)對藥物釋放的控制，添加NaCl各組釋放減慢。Jiang等［19］研究滲透壓對包囊牛血清蛋白的PLGA微球大小、形態(tài)和釋放等的影響。結(jié)果顯示，外水相添加NaCl，有機(jī)溶劑揮發(fā)、聚合物固化變慢，形成更大更致密微球，內(nèi)部小孔較少較小，與未添加NaCl相比，突釋率從78．7%降至32．9%，包囊率上升。在外水相中添加蔗糖也得到類似結(jié)果，但效果稍差。推測NaCl除增加滲透壓外，還存在不同的作用機(jī)制。NaCl能增加外水相極性，使有機(jī)溶劑在外水相中的溶解度變低，揮發(fā)變慢，形成較稠密的微球;蔗糖不存在這種電離作用，其突釋降低(78．7%降至52．4%)僅通過滲透壓的升高，因此效果不如NaCl的顯著。在Benna-Zayani等［20］的研究中，硬葡聚糖、鹿角菜膠、黃原膠及刺槐樹膠混合物的多糖水溶液作為外水相，通過阻止乳狀沉淀或最終的聚集來穩(wěn)定復(fù)乳液。結(jié)果顯示除鹿角菜膠水溶液不存在屈服應(yīng)力外，硬葡聚糖、黃原膠及刺槐樹膠混合物的水溶液都具有相對低的屈服應(yīng)力和塑性黏度，剪切后能迅速還原為原先的擬三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，該流變學(xué)性質(zhì)使復(fù)合乳液制備容易，還可通過防止油滴乳狀沉淀使其得以懸浮在外水相中。其中硬葡聚糖水溶液制備的乳液最穩(wěn)定，兩年后無沉淀現(xiàn)象，液滴粒徑最小。

2．3 溶劑的選擇

以W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備微球，通常采用蒸發(fā)法或萃取法去除有機(jī)溶劑。常使用的有機(jī)溶劑包括二氯甲烷(DCM)、乙酸乙酯(EA)和丙酮(ACE)等，通常單獨(dú)使用一種或聯(lián)合使用。

Ravi等［21］根據(jù)有機(jī)溶劑水溶性，溶解聚合物的能力分別選擇ACE、EA、DCM作為有機(jī)溶劑，其水溶性ACE＞EA＞DCM。結(jié)果顯示，微球大小顯著受有機(jī)溶劑水溶性的影響，高水溶性有機(jī)溶劑制備的微球大，原因在于高水溶性有機(jī)溶劑迅速擴(kuò)散到水相時(shí)，聚合物不規(guī)則聚集;DCM微球較小，可能是DCM對PLGA有較好的溶解性，形成致密微球。有機(jī)溶劑揮發(fā)伴隨聚合物固化，低水溶性有機(jī)溶劑促進(jìn)蛋白質(zhì)分配到水相，包囊率較高;高水溶性有機(jī)溶劑因聚合物不規(guī)則聚集，包囊率低。

ACE在單獨(dú)使用的基礎(chǔ)上，常作為DCM的共溶劑。Chaisri等［17］還探討了有機(jī)溶劑對頭孢氨芐微球性質(zhì)的影響，添加ACE到DCM中作為共溶劑，ACE溶于DCM并提高其水溶性，因此外水相可快速抽提有機(jī)溶劑，由于快速抽提，有機(jī)相和外水相之間發(fā)生界面湍動現(xiàn)象，形成小粒子，制備的微球減小。Qi等［22］在包囊過氧化氫酶時(shí)，探討不同有機(jī)溶劑對酶活性的影響。發(fā)現(xiàn)，ACE與DCM的比例為1∶1，過氧化氫酶的活性比單獨(dú)將EA和DCM作為有機(jī)溶劑時(shí)高。

2．4 內(nèi)水相與油相的體積比

內(nèi)水相與油相的體積比(Vw1/VO)也是影響微球性質(zhì)的關(guān)鍵因素。Lu等［23］發(fā)現(xiàn)，Vw1/VO是控制微球中空結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵因素之一。Vw1/VO從0．13上升至0．53，越來越多中空微球出現(xiàn)，中空率在0．53時(shí)達(dá)峰值，繼續(xù)上升，許多微球破裂。中空度及微球大小隨體積比增大先上升后下降，推測W1體積較小，形成的水滴較少較小，油相難以抓住水滴，得到小而結(jié)實(shí)的微球;W1體積增大，油相能抓住液滴，溶劑揮發(fā)后最終形成中空微球，微球較大，但W1繼續(xù)增大會引起聚合物沉淀在W1/O界面，微球結(jié)構(gòu)被破壞。Takei研究小組［24］包囊乳酸菌(LAB)，以LAB活性為指標(biāo)優(yōu)化制備工藝。發(fā)現(xiàn)，Vw1/VO低于 0．5 成功制得微球，比例升高到0．56和0．66，W1/O初乳液在W2中不穩(wěn)定，溶劑揮發(fā)過程微球聚集，LAB活性在比例為0．1時(shí)最高。蔣濤等［25］制備單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷酯PLGA微球并進(jìn)行優(yōu)化。發(fā)現(xiàn)Vw1/VO增大，可提高載藥量，但比例繼續(xù)增大，初乳微球穩(wěn)定性及載藥量降低，Vw1/VO為1∶10 較為合適。

3 結(jié)語及展望

W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備工藝依賴多種因素，除上述影響因素外，還包括乳化方法及時(shí)間、攪拌速度、外水相體積等，對這些變量綜合考慮可制備較理想的水溶性藥物微球。就文獻(xiàn)報(bào)道看來，目前該研究主要以微球大小、形態(tài)、載藥量、包囊率、體外釋放等為指標(biāo)優(yōu)化制備工藝并取得較大進(jìn)展。工藝優(yōu)化除考慮影響因素外，還可在已有研究［18，26］基礎(chǔ)上進(jìn)一步發(fā)展該法與SPG膜乳化技術(shù)相結(jié)合控制粒徑，提高包囊率;根據(jù)水溶性藥物性質(zhì)或具體應(yīng)用設(shè)計(jì)合成聚合物壁材可能更具適用性及針對性等等。本實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)仙人掌多糖具顯著的降血糖降血脂等功效［27-28］，但多糖易吸濕，其制劑有效期短，功效難以發(fā)揮。為解決以上問題，我們曾以交聯(lián)法制備包囊仙人掌多糖的明膠微球，但釋放快;現(xiàn)階段以W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備包囊仙人掌多糖的PLGA微球，得到的微球圓整性好，分布均一，包封率較好。

除制備工藝優(yōu)化的文獻(xiàn)報(bào)道，近年來大量研究以動物及體外實(shí)驗(yàn)探討藥物微球的療效及毒副作用［29-30］，但鮮見作用機(jī)理、藥動學(xué)、量效關(guān)系、最優(yōu)劑量等方面的研究，療效、毒副作用還有待更進(jìn)一步的探討。以W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備水溶性藥物微球要進(jìn)行臨床試驗(yàn)及引入市場還需更先進(jìn)的技術(shù)及深入研究。相信隨著研究的推進(jìn)，以W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法制備水溶性藥物微球?qū)⒏嗟赜糜趯?shí)際，有廣闊的發(fā)展前景。

［1］ Dickinson E．Double emulsions stabilized by food biopolymers［J］．Food Biophys，2011，6(1):1-11．

［2］ Vrancken N M，Claeys A D．method for encapsulating water and compoundsin aqueous phase by extraction:US，3526906［P］．1970-08-11．

［3］ 陳 婷，魯 瑩，林亞玲，等．包裹多烯紫杉醇PLGA-PEG納米粒的制備及體外釋放度考察［J］．第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，32(3):295-298．

［4］ Bilati U，Allémann E，Doelker E．Poly(D，L-lactide-co-glycolide)protein-loaded nanoparticles prepared by the double emulsion method-processing and formulation issues for enhanced entrapment efficiency［J］．J Microencapsul，2005，22(2):205-214．

［5］ Feczkó T，Tóth J，Dósa G，et al．Optimization of protein encapsulation in PLGA nanoparticles［J］．Chem Eng Proce，2011，50(8):757-765．

［6］ Ogawa Y，Yamamoto M，Okada H，et al．A new technique to efficiently entrap leuprolide acetate into microcapsules of polylactic acid or copoly(lactic/glycolic)acid［J］．Chem Pharm Bull，1988，36(3):1095-1103．

［7］ Klose D，Delplace C，Siepmann J．Unintended potential impact of perfect sink conditions on PLGA degradation in microparticles［J］．Int J Pharm，2011，404(1-2):75-82．

［8］ Murugesan S，Ganesan S，Averineni R K，et al．PEGylated Poly(Lactide-co-Glycolide)(PLGA)nanoparticulate delivery of docetaxel:Synthesis of diblock copolymers，optimization of preparation variables on formulation characteristics and in vitro release studies［J］．J Biomed Nanotechnol，2007，3(1):52-60．

［9］ Liu W，Yang A S，Li Z Y，et al．PEGylated PLGA nanoparticles as tumor ecrosis factor-α receptor blocking peptide carriers:preparation，characterization and release in vitro［J］．J Wuhan Univ Technol，2007，22(1):112-116．

［10］ Xu B，Dou H J，Tao K，et al．Influence of experimental parameters and the copolymer structure on the size control of nanospheres in double emulsion method［J］．J Polym Res，2011，18(1):131-137．

［11］牛文強(qiáng)，傅國旗，吳俊麗，等．PLA/PEG/PLA三嵌段共聚物載藥納米膠囊的制備及表征［J］．高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào)，2005，26(7):1369-1371．

［12］ Mora-Huertas C E，F(xiàn)essi H，Elaissari A．Polymer-based nanocapsules for drug delivery［J］．Int J Pharm，2010，385(1-2):113-142．

［13］ Khoee S，Yaghoobian M．An investigation into the role of surfactants in controlling particle size of polymeric nanocapsules containing penicillin-G in double emulsion［J］．Eur J Med Chem，2009，44(6):2392-2399．

［14］ Zhu Y Y，Zhang G Y，Yang H Q，et al．Influence of surfactants on the parameters of polylactide nanocapsules containing insulin［J］．J Surfactants Deterg，2005，8(4):353-358．

［15］ Liu B，Dong Q，Wang M，et al．Preparation，characterization，and pharmacodynamics of exenatide-loaded Poly(DL-lactic-co-glycolic acid)microspheres［J］．Chem Pharm Bull，2010，58(11):1474-1479．

［16］ Ayoub M，Ahmed N，Kalaji N，et al．Study of the effect of formulation parameters/variables to control the nanoencapsulation of hydrophilic drug via double emulsion technique［J］．J Biomed Nanotechnol，2011，7(2):255-262．

［17］ Chaisri W，Hennink W E，Okonogi S．Preparation and characterization of cephalexin loaded PLGA microspheres［J］．Curr Drug Deliv，2009，6(1):69-75．

［18］ Ito F，F(xiàn)ujimori H，Honnami H，et al．Control of drug loading efficiency and drug release behavior in preparation of hydrophilicdrug-containing monodisperse PLGA microspheres［J］．J Mater Sci Mater Med，2010，21(5):1563-1571．

［19］ Jiang G，Thanoo B C，DeLuca P P．Effect of osmotic pressure in the solvent extraction phase on bsa release profile from PLGA microspheres［J］．Pharm Dev Technol，2002，7(4):391-399．

［20］ Benna-Zayani M，Kbir-Ariguib N，Trabelsi-Ayadi M，et al．Stabilisation of W/O/W double emulsion by polysaccharides as weak gels［J］．Colloids Surf A:Physicochem Eng Aspects，2008，316(1-3):46-54．

［21］ Ravi S，Peh K K，Darwis Y，et al．Development and characterization of polymeric microspheres for controlled release protein loaded drug delivery system［J］．Indian J Pharm Sci，2008，70(3):303-309．

［22］ Qi C，Chen Y，Jing Q Z，et al．Preparation and characterization of catalase-loaded solid lipid nanoparticles protecting enzyme against proteolysis［J］．Int J Mol Sci，2011，12(7):4282-4293．

［23］ Lu R，Dou H J，Qiu Y Y，et al．Polymeric microcapsules with internal cavities for ultrasonic imaging:efficient fabrication and physical characterization［J］．Colloid Polym Sci，2009，287(6):683-693．

［24］ Takei T，Yoshida M，Hatate Y，et al．Lactic acid bacteria-enclosing poly(ε-caprolactone)microcapsules as soil bioamendment［J］．J Biosci Bioeng，2008，106(3):268-272．

［25］蔣 濤，歐陽忠，郭樹章，等．GM-1 PLGA微球的制備工藝優(yōu)化研究［J］．解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2006，22(3):190-193．

［26］ Doan T V，Couet W，Olivier J C．Formulation and in vitro characterization of inhalable rifampicin-loaded PLGA microspheres for sustained lung delivery［J］．Int J Pharm，2011，414(1-2):112-117．

［27］ Zhao L Y，Lan Q J，Huang Z C，et al．Antidiabetic effect of a newly identified component of Opuntia dillenii polysaccharides［J］．Phytomedicine，2011，18(8-9):661-668．

［28］ Zhao L Y，Huang W，Yuan Q X，et al．Hypolipidemic effects and mechanisms of the main component of Opuntia dillenii Haw．polysaccharides in high-fat emulsion-induced hyperlipidemic rats［J］．Food Chem，2012，2012，134(2):964-971．

［29］ Liu J，Qiu Z Y，Wang S Q，et al．A modified double-emulsion method for the preparation of daunorubicin-loaded polymeric nanoparticle with enhanced in vitro anti-tumor activity［J］．Biomed Mater，2010，5(6):065002．

［30］ Oh Y J，Lee J，Seo J Y，et al．Preparation of budesonide-loaded porous PLGA microparticles and their therapeutic efficacy in a murine asthma model［J］．J Controlled Release，2011，150(1):56-62．

Research progress on preparation of water-soluble drug microspheres by W/O/W multiple emulsion solvent evaporation method

YUAN Qing-xia1，2，ZHAO Long-yan1，CHENG Jie1，2，ZENG Fu-hua1
(1．School of Life Science and Technology，Zhanjiang Normal University，Zhanjiang 524048，China;2．School of Biological Science and Technology，Hunan Agricultural University，Changsha 410128，China)

R944．9;TQ460．6

A

1005-1678(2012)06-0920-04

2012-04-28

廣東高校邊緣熱帶特色植物工程技術(shù)開發(fā)中心開放基金(NO．［2012］0103); 湛江市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No．2011D032)

袁清霞，女，碩士研究生，研究方向:多糖開發(fā)利用及其劑型研究;曾富華，男，通信作者，博士生導(dǎo)師，從事植物天然產(chǎn)物的開發(fā)與利用，Tel:0759-3183140，E-mail:zengfuhua@gmail．com。