云南不同產(chǎn)地茯苓總三萜含量測定*

劉鴻高，王元忠

（1.云南農(nóng)業(yè)大學，云南 昆明 650201；2.云南省農(nóng)業(yè)科學院藥用植物研究所，云南 昆明 650223）

茯苓為多孔菌科、臥孔菌屬真菌 （Wolfiporia cocos）的菌核，是我國傳統(tǒng)中藥。史載于 《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品。茯苓性味甘淡平，入心、肺、脾、腎經(jīng)，具有滲濕利水，健脾和胃，寧心安神，強精益髓的功效，用于治療小便不利、水腫脹滿、痰飲咳逆、泄瀉、遺精、嘔穢、驚悸，健忘等病癥[1]。主產(chǎn)于云南、安微、河南、湖北、四川等地。產(chǎn)云南者稱 “云茯”，質較優(yōu)[2]。

茯苓中的主要化學成分為茯苓多糖、三萜、脂肪酸、甾醇等。近年來，研究較多的是其有效成分茯苓多糖和三萜類物質。張思訪等[3]總結發(fā)現(xiàn)從茯苓中分離出的三萜類化合物有39種，這些三萜具有抗腫瘤、抗炎、止吐、利尿，增強免疫功能的作用。近幾年來，又有一些新的三萜成分從茯苓中分離出來[4]。沈思等[5]對茯苓皮中的三萜類成分進行了含量測定及其抑菌活性研究，結果表明茯苓皮三萜含量為1.58%，并且對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌都有較好的抑制作用。汪電雷等[6]研究發(fā)現(xiàn)，茯苓總三萜對急性、慢性炎癥有良好的抗炎作用。張琴琴等[7]證明茯苓總三萜具有明顯的抗驚厥作用，它可延長青霉素誘發(fā)大鼠癇性發(fā)作的潛伏期，減輕發(fā)作程度。作為質優(yōu)的“云茯苓”，其中的總三萜含量及其分布情況卻鮮有報道。本文以乙酸乙酯為溶劑，分別提取茯苓皮和茯苓肉中的三萜，用香草醛-冰乙酸-高氯酸顯色法[8]測定其中的三萜含量并分析其分布式樣，為茯苓藥材的質量評價及開發(fā)利用提供基礎依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 材料來源

茯苓樣品采集自云南省鳳慶縣、武定縣和騰沖縣境內(nèi)，并將樣品分成茯苓皮和茯苓肉兩部分。除來自騰沖的樣品測新鮮樣之外，其他樣品均干燥粉碎后再進行測定。

1.1.2 主要試劑

高氯酸、冰乙酸、香草醛、乙酸乙酯、無水乙醇均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 總三萜的提取

取茯苓樣品粉末0.50 g，溶于乙酸乙酯后，在索氏提取器中回流4 h，用旋轉蒸發(fā)儀蒸干溶劑后，無水乙醇將樣品溶液定容至50.00 mL。

1.2.2 總三萜含量的測定

吸取0.60 mL樣品溶液，先后加入0.50 mL新鮮配制的5%香草醛-冰乙酸溶液和0.80 mL高氯酸，60℃水浴加熱15 min后，移至冰水浴中冷卻，再加入5.00 mL冰乙酸，搖勻后靜置室溫。15 min后用紫外分光光度計在548 nm波長處測定樣品溶液的吸光度。

2 結果與分析

所測茯苓樣品及不同部位中總三萜含量測定結果見表1、 表 2。

表1 所測茯苓樣品中的總三萜含量

表2 茯苓樣品不同部位總三萜含量

由表1可知，武定、騰沖、鳳慶3個地區(qū)的干燥樣品茯苓皮中總三萜含量最高，分別達14.57 mg·g-1、13.93 mg·g-1、 12.59 mg·g-1，差異不顯著（p＞0.05），而茯苓肉中總三萜含量顯著低于茯苓皮（p＜0.01）。通過對比來自騰沖的樣品，發(fā)現(xiàn)茯苓皮中，新鮮樣品的總三萜含量顯著低于干燥樣品；而茯苓肉中，新鮮樣品的總三萜含量則與干燥樣品中相比無顯著差異。茯苓新鮮樣品和干燥樣品中的總三萜平均含量分別為5.96 mg·g-1和8.53 mg·g-1，新鮮樣品中的總三萜含量低于干燥樣品。3個地區(qū)的所有樣品中（新鮮和干燥）所含三萜的含量平均值在5.96 mg·g-1～9.26 mg·g-1，它們之間無顯著差異（p＞0.05）。

表2中可以看出，所測樣品茯苓皮中總三萜含量（13.44 mg·g-1） 顯著大于茯苓肉中 （3.37 mg·g-1） 含量（p＜0.01）。

3 討論

依據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論，茯苓菌核外側部分稱為 “茯苓皮”，具有消腫利尿的作用；削去外皮后的淡紅色部分，稱為 “赤茯苓”，功能滲利濕熱；切去赤茯苓后的白色部分，稱為 “白茯苓”，可滲濕健脾；帶有松樹根的菌核中心，稱為 “茯神”，具有寧心安神的作用[5]。

所測茯苓樣品中，茯苓皮中的總三萜含量均高于茯苓肉。沈思等[5]用甲醇提取茯苓皮中的三萜，測得三萜百分含量1.58%，與本文所測值較相近（1.344%）。徐榕、許津利用紫外分光光度法測定來自安徽、貴州、南京、廣西、福建和江西六個省的茯苓中三萜含量，結果表明福建茯苓中三萜含量最高，為9.67 mg·g-1，南京最低，為5.48 mg·g-1；而本次所測干燥的云南茯苓平均三萜含量在7.58 mg·g-1～9.26 mg·g-1，相比云南茯苓三萜含量稍高。 孫明珍等[9]研究發(fā)現(xiàn)茯苓皮中的茯苓酸含量要高于赤茯苓和白茯苓，但低于茯神部位。張怡莎等[10]研究了不同地區(qū)茯苓及茯苓皮中茯苓多糖成分的含量，發(fā)現(xiàn)茯苓皮中的茯苓多糖含量明顯比茯苓中的含量低。上述研究證明茯苓多糖和茯苓三萜在茯苓不同藥用部位的分布模式不同，為茯苓的用藥提供科學的指導。

騰沖新鮮樣品中的總三萜平均含量低于干燥樣品，證明了傳統(tǒng)茯苓用藥采用其干燥菌核的科學性。

另外，張思訪等[3]報道3,4-開環(huán)-羊毛甾-7,9(11)-二烯型三萜類化合物僅存在于茯苓皮中，有待于進一步分離鑒定茯苓皮與茯苓肉中的三萜類化合物。

基于以上結果可知，云南鳳慶、武定和騰沖3個縣的茯苓總三萜平均含量差異不顯著，各地的茯苓皮中總三萜含量均高于茯苓肉中，且新鮮茯苓中總三萜含量低于干燥茯苓。

[1]付玲，于淼.茯苓研究的新進展 [J].新疆中醫(yī)藥，2005，23 (3)：79-83.

[2]衛(wèi)華，趙聲蘭，趙榮華，等.云南不同產(chǎn)地茯苓中多糖的含量測定[J].云南中醫(yī)學院學報，2009，32 (4)：25-27，36.

[3]張思訪，劉靜涵，蔣建勤，等.茯苓的化學成分和藥理作用及開發(fā)利用[J].中華實用中西醫(yī)雜志，2005，18 (2)：227-230.

[4]Akihisa T,Nakamura Y,Tokuda H,et al.Triterpene acids from Poria cocos and their anti-tumor-promoting effects[J].Journal of Natural Products,2007,70 (6):948-953.

[5]沈思，李孚杰，梅光明，等.茯苓皮三萜類物質含量的測定及其抑菌活性的研究[J].食品科學，2009，30 (1)：95-98.

[6]汪電雷，陳衛(wèi)東，徐先祥.茯苓總三萜的抗炎作用研究[J].安徽醫(yī)藥，2009，13(9)： 1021-1023.

[7]張琴琴，王明正，王華坤，等.茯苓總三萜對青霉素誘發(fā)驚厥模型海馬氨基酸含量的影響[J].中國藥理學通報，2009，25 (2)：279-280.

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[9]孫明珍，楊中林，張中朋，等.不同產(chǎn)地及不同藥用部位茯苓的比較研究[J].中成藥，2004，26 (5)：379-381.

[10]張怡莎，陳華國，周欣，等.不同產(chǎn)地茯苓及茯苓皮中多糖成分的研究[J].貴州師范大學學報：自然科學版，2010，28 (3)：101-103.