急性冠脈綜合征患者外周血淋巴細(xì)胞亞群測定的臨床意義

黃鶴飛 陳愛民 劉春霞 錢安斌 俞子?xùn)| 浙江省新昌縣人民醫(yī)院心內(nèi)科 新昌 312500

急性冠脈綜合征（acute coronary syndrome，ACS）是以冠狀動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定、破裂并繼發(fā)血栓形成導(dǎo)致的臨床綜合征，包括不穩(wěn)定心絞痛（unstable angina，UA）、非 ST 段抬高心肌梗死（NSTEMI）和 ST段抬高心肌梗死（STEMI）。最近研究表明，免疫機(jī)制在斑塊的破裂和血栓形成中發(fā)揮重要作用，淋巴細(xì)胞通過抗原-抗體反應(yīng)以及細(xì)胞免疫等機(jī)制參與了動脈粥樣斑塊的形成、破裂和繼發(fā)血小板聚集等。筆者通過不同ACS類型之間以及與非冠心病患者的外周血淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行比較，探討淋巴細(xì)胞在ACS中的作用，并評價淋巴細(xì)胞亞群改變對ACS預(yù)后的影響，現(xiàn)報道如下。

1 臨床資料

選取2010年1月—2011年5月在我院住院的急性冠脈綜合征患者30例，均符合WHO關(guān)于急性冠脈綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn)。30例中不穩(wěn)定性心絞痛（UA）12例，男 8例，女 4例，平均年齡（70±6.6）歲；非ST段抬高心肌梗死（NSTEMI）8例，男4例，女4例，平均年齡（68±5.9）歲；ST段抬高心肌梗死（STEMI）10 例，男 8 例，女 2 例，平均年齡（69±7.1）歲。選擇同期因非冠心病入住我科的30例患者為對照組，其中男 20例，女 10例，平均年齡（68±5.1）歲。排除嚴(yán)重肝腎功能不全、合并有感染、心力衰竭、自身免疫性疾病、風(fēng)濕活動、腫瘤性疾病、近期手術(shù)和創(chuàng)傷、腦卒中等疾病。

2 方 法

2.1 淋巴細(xì)胞亞群檢測方法 兩組患者均于住院次日空腹采集靜脈血2mL，6 h之內(nèi)作染色處理，使用美國BD公司生產(chǎn)FACSCalibur流式細(xì)胞儀，報告CD3+、CD4+、CD8+、B 淋巴細(xì)胞 （CD19+）、NK 細(xì)胞占總T淋巴細(xì)胞的百分比、CD4+/CD8+比值。上述操作所用試劑均由美國BD公司生產(chǎn)。

2.2 HsCRP和cTnI檢測 采用定量酶聯(lián)免疫測定法，按照試劑使用說明書進(jìn)行試劑的配制和操作。

2.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計量資料以（±s）表示，兩組間比較用t檢驗，多樣本均數(shù)比較采用方差分析,兩兩比較采用LSD及Dunnetts t檢驗，如果資料服從雙變量正態(tài)分布,采用直線相關(guān)分析,如果資料不服從雙變量正態(tài)分布,采用Spearman秩和相關(guān)分析。

3 結(jié)果

3.1 兩組T淋巴細(xì)胞亞群測定及血清cTnI、HsCRP濃度比較 ACS組患者外周血CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+值、NK 細(xì)胞比例較對照組明顯降低（P＜0.05，P＜0.01）；而CD8+T細(xì)胞、CD19+B淋巴細(xì)胞比例及cT－nI、HsCRP 濃度明顯升高（P＜0.05，P＜0.01），見表1。

表1 兩組間淋巴細(xì)胞亞群、TnI及HsCRP比較（±s）

表1 兩組間淋巴細(xì)胞亞群、TnI及HsCRP比較（±s）

注：與對照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.05

組 別ACS組對照組n/例30 30 CD3+/%54.1±2.9 55.7±3.5 CD4+/%26.7±3.3△△30.3±4.2 CD8+/%27.9±4.7△25.7±3.1 CD19+/%13.9±2.5△△10.7±2.0 NK/%16.9±3.6△18.7±2.3 CD4+/CD8+1.9±1.1△2.6±1.5 TnI/(ng/mL)10.6±4.9△△0 HsCRP/（mg/L）23.0±7.3△△2.6±1.5

3.2 ACS各亞組間淋巴細(xì)胞亞群及血清TnI、HsCRP濃度比較 NSTEMI及STEMI組患者外周血CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+值、NK細(xì)胞比例較UA組明顯降低（P＜0.05）；而CD8+T細(xì)胞，CD19+B淋巴細(xì)胞比例及cTnI、HsCRP 濃度明顯升高（P＜0.05），見表2。

表2 急性冠脈綜合征各亞組間淋巴細(xì)胞亞群、TnI及HsCRP比較（±s）

表2 急性冠脈綜合征各亞組間淋巴細(xì)胞亞群、TnI及HsCRP比較（±s）

注：與 UA組比較，△P＜0.05；與 NSTEMI組比較，*P＜0.05

組 別UA組NSTEMI組STEMI組n/例12 8 10 CD3+/%55.2±4.8 54.8±5.9 55.6±5.6 CD4+/%30.0±4.1 23.5±3.9△18.8±2.2△*CD8+/%22.2±4.5 26.5±3.6△31.1±3.7△*CD19+/%9.7±3.1 14.0±3.4△18.2±5.2△*NK/%19.4±4.5 14.7±3.6△9.9±4.9*△CD4+/CD8+2.0±1.4 1.2±0.6△0.6±1.0*△TnI/(ng/mL)0 9.0±2.8△13.3±5.2△*HsCRP/（mg/L）1.8±1.2 12.9±4.5△26.8±6.7△*

3.3 血清TnI濃度與淋巴細(xì)胞亞群相關(guān)性分析TnI值與CD4+T細(xì)胞、CD4+/CD8+值比例負(fù)相關(guān)，與CD8+T細(xì)胞比例正相關(guān)，見表3。

表3 TnI與淋巴細(xì)胞亞群的相關(guān)性

4 討論

研究表明，炎癥和免疫機(jī)制在急性冠脈綜合征的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要作用，臨床研究發(fā)現(xiàn)，動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)淋巴細(xì)胞占有核細(xì)胞數(shù)的10%～20%[1]。人類淋巴細(xì)胞分為T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞，其中T淋巴細(xì)胞（CD3+）按照免疫表型主要分為兩群：T 輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞（CD4+）和 T 抑制/細(xì)胞毒細(xì)胞（CD8+），通常情況下兩者相互影響制約使機(jī)體免疫處于平衡狀態(tài)，兩者比例失調(diào)可導(dǎo)致免疫功能紊亂。研究表明[2]，動脈粥樣硬化斑塊發(fā)展過程中，T淋巴細(xì)胞增強(qiáng)局部的免疫應(yīng)答，促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，并分泌細(xì)胞因子及生長因子，同時促進(jìn)血管中層平滑肌細(xì)胞的增生、遷移及吞噬?；罨腃D4+T細(xì)胞產(chǎn)生大量的干擾素γ（INF-γ）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等促炎癥細(xì)胞因子,最終影響細(xì)胞外基質(zhì)的代謝和內(nèi)皮細(xì)胞的功能[3]。其中CD4+CD28-T細(xì)胞具有細(xì)胞毒作用，能夠在體內(nèi)殺傷內(nèi)皮細(xì)胞，也可通過表達(dá)腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（TRAIL）與病變中表達(dá)CCR5的血管平滑肌細(xì)胞結(jié)合誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞凋亡[4]；而CD4+CD25+T細(xì)胞則可以抑制該類細(xì)胞活性，抑制動脈粥樣硬化的發(fā)生，斑塊越不穩(wěn)定，其CD4+CD25+T細(xì)胞含量越低[5]。Terashima等[6]研究顯示，T淋巴細(xì)胞特別是CD8+細(xì)胞的激活可能與冠狀動脈痙攣的發(fā)生機(jī)制有關(guān)。并發(fā)現(xiàn)心肌梗死后隨著梗死面積的增大，CD8+被進(jìn)一步激活，并可識別和殺死心肌細(xì)胞。本研究中，ACS組CD4+T細(xì)胞比例和CD4+/CD8+比值較對照組明顯降低（P＜0.01）。進(jìn)一步亞組分析，STEMI組較NSTEMI和UAP組下降更明顯（P＜0.05），推測與CD4+CD25+T細(xì)胞含量低，CD8+被進(jìn)一步激活有關(guān)。同時Dimitrijevic和Che研究發(fā)現(xiàn)，心肌梗死患者發(fā)病后血B淋巴細(xì)胞比例明顯高于對照組，并認(rèn)為其原因為壞死的心肌組織釋放分離抗原，導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞升高[7-8]。而Jonasson等[9]研究發(fā)現(xiàn),穩(wěn)定和不穩(wěn)定的冠心病患者的外周血CD56dim NK細(xì)胞大大減少,并伴隨NK細(xì)胞功能損失，如 INF-γ、TNF-β、IL-10、IL-13 和 GM2-CSF 等相關(guān)的免疫調(diào)節(jié)功能受損,其發(fā)展及后果包括增加冠心病的危險,與冠心病關(guān)聯(lián)的炎癥可能會進(jìn)一步降低NK細(xì)胞的功能[10]。本文結(jié)果與文獻(xiàn)相符，ACS癥狀越重，血B淋巴胞比例越高，而NK細(xì)胞比例越低。

已有大量研究證實，血清cTnI、HsCRP水平與ACS患者預(yù)后密切相關(guān)，Syrjala等[11]研究表明，急性心肌梗死患者CD4+/CD8+比值持續(xù)降低者多提示預(yù)后較差，故通過檢測CD4+/CD8+值可以評價心肌梗死患者預(yù)后。Randa S等[12]研究發(fā)現(xiàn)，急性心肌梗死患者血清cTnI水平與CD4+T細(xì)胞比例、CD4+/CD8+值顯著負(fù)相關(guān)，同時進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，cTnI升高明顯者更易發(fā)生心房顫動、完全性左束支傳導(dǎo)阻滯、肺水腫和再梗死或者死亡。故筆者推測，CD4+T細(xì)胞比例、CD4+/CD8+值可以作為判斷心肌梗死患者預(yù)后的一個標(biāo)志物。本組資料血清cTnI水平與CD4+T細(xì)胞比例、CD4+/CD8+值顯著負(fù)相關(guān)，與文獻(xiàn)報道相符，但由于未對ACS患者出院后進(jìn)行有效隨訪，故尚不能說明CD4+T細(xì)胞比例、CD4+/CD8+值低者預(yù)后較差。

總之，免疫反應(yīng)在急性冠脈綜合征的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，進(jìn)行有效的免疫干預(yù)治療能否成為冠心病的治療方法之一，仍需進(jìn)一步大規(guī)模的臨床試驗證實和分析。

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