龔英峰
(唐山市灤縣人民醫(yī)院,063700)
電泳技術(shù)是根據(jù)蛋白質(zhì)的物理特性對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分離的方法。將血清或其他體液放在特殊的載體中,根據(jù)其所帶電荷進(jìn)行分離。根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷的多少和蛋白質(zhì)分子的大小及形狀分離出不同的蛋白成分。血清蛋白電泳可以用于評(píng)價(jià)、診斷和檢測(cè)不同的疾病。傳統(tǒng)的電泳方法是以醋酸纖維素薄膜作為介質(zhì),但是由于醋酸纖維素薄膜雜質(zhì)多,含有大量的纖維和金屬離子,造成電泳速度慢,分離不良,并有嚴(yán)重的電滲現(xiàn)象,而瓊脂糖凝膠則具有微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),所以隨著電泳技術(shù)的不斷發(fā)展,瓊脂糖凝膠電泳已經(jīng)逐步替代醋酸纖維素薄膜電泳并實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化,且操作簡(jiǎn)單;另外它的最大優(yōu)點(diǎn)是幾乎不吸附蛋白質(zhì),因此電泳無(wú)拖尾現(xiàn)象,分離清晰、分辨率高,更適用于對(duì)大量標(biāo)本的常規(guī)分析,易于在臨床實(shí)驗(yàn)室普及,所以血清蛋白電泳技術(shù)已經(jīng)在各個(gè)醫(yī)院普遍開展用于疾病的診斷和預(yù)后的判斷。我們利用法國(guó)Sebia公司生產(chǎn)的半自動(dòng)瓊脂糖凝膠電泳儀對(duì)本地區(qū)65例腎病患者和75例健康人的血清蛋白電泳圖譜進(jìn)行比較和分析,為臨床診治腎病提供一定的理論依據(jù)。
1.1 對(duì)象 選擇2011-01—05在我院住院確診為腎病的患者65例,年齡20~84歲,平均年齡(55.1±15.6)歲。選擇同期門診健康人(血常規(guī)、肝腎功正常,無(wú)黃疸,無(wú)高脂血癥)75例作為健康組,年齡27~83歲,平均年齡 (49.9±16.5)歲。
1.2 儀器和試劑 法國(guó)Sebia公司HYDRASYS半自動(dòng)電泳儀、掃描儀和配套試劑盒。
1.3 方法 收集腎病患者及健康組空腹血液標(biāo)本進(jìn)行蛋白電泳分析:取10 μL血清加樣、電泳、干燥以及染色、脫色、干燥,最后取出凝膠板用掃描儀進(jìn)行掃描定量。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 15.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。計(jì)量資料比較采用分組樣本資料t檢驗(yàn)。
通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究我們發(fā)現(xiàn)腎病患者電泳圖譜中白蛋白百分比顯著低于健康組,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);腎病患者α1、α2、β球蛋白百分比顯著高于健康組 (尤以α2球蛋白增高最顯著),差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);腎病患者γ球蛋白百分比與健康組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,表1)。
表1 腎病患者與健康組血清蛋白電泳結(jié)果比較(±s)
表1 腎病患者與健康組血清蛋白電泳結(jié)果比較(±s)
組別 例數(shù) ALB(%) α1(%) α2(%) β(%) γ(%)腎病患者 6550.2±9.63.7±0.818.2±6.914.6±3.413.3±5.5健康組 7564.4±3.12.6±0.39.1±1.210.3±1.313.6±1.7
腎病患者由于感染、病毒、血管病變、免疫損傷等原因而使腎小球和腎小管都有一定程度的損害,所以腎臟對(duì)蛋白質(zhì)的通透性增高而重吸收能力下降,導(dǎo)致血清蛋白質(zhì)的丟失,特別是小分子量的蛋白質(zhì)(如白蛋白)[1],而α2球蛋白主要含有α2巨球蛋白[2],不易丟失,導(dǎo)致腎病患者電泳圖譜中α2球蛋白增高最顯著;α2球蛋白增高的另一個(gè)原因是由于低密度脂蛋白相對(duì)增加所致。α1球蛋白增加主要是為了補(bǔ)償由于白蛋白降低引起的低滲透壓,而使體內(nèi)的α1糖蛋白增加所致,雖然α1糖蛋白也大量丟失于尿中,但體內(nèi)合成量超過(guò)排泄量,故仍可增加。由于小分子量的轉(zhuǎn)鐵蛋白也排泄于尿中,所以慢性腎炎患者有時(shí)β球蛋白可降低。分子量較小的IgG在腎病時(shí)可大量丟失于尿中從而導(dǎo)致γ球蛋白可以降低,但是在慢性腎炎、狼瘡性腎炎時(shí)由于免疫刺激使IgG合成增加而致使γ球蛋白增加。
綜合以上資料,血清蛋白電泳在腎臟疾病的診斷及療效觀察方面有重要的意義。雖然現(xiàn)在我們可以采用生化或免疫方法單獨(dú)檢測(cè)多種不同的蛋白質(zhì),但是血清蛋白電泳仍然是我們了解人體內(nèi)蛋白質(zhì)全貌的最有價(jià)值的方法,可為多種疾病的診斷特別是腎臟疾病的診斷提供較全面的信息。相信隨著電泳技術(shù)的不斷發(fā)展其必將越來(lái)越受到同道們的青睞[3]。
[1]周新,涂植光.臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:272-273.
[2]葉應(yīng)嫵,莫培生.新編臨床檢驗(yàn)法:上冊(cè)[M].泰安:山東省出版總社泰安分社,1986:99.
[3]沈霞.電泳技術(shù)的現(xiàn)狀和發(fā)展[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2001,25(5):263-265.