• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    補骨脂生品及炮制品體外抑菌活性研究

    2012-07-26 11:35:02李昌勤康文藝
    中成藥 2012年1期
    關(guān)鍵詞:雷公生品補骨脂

    李昌勤, 趙 琳, 康文藝

    (河南大學(xué)中藥研究所,河南開封475004)

    補骨脂為豆科植物補骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果實。其性溫,味辛、微苦,歸腎、脾經(jīng)[1]。內(nèi)服多以炮制品入藥,其炮制原理和方法始載于南北朝的《雷公炮炙論》,記載的炮制方法主要有清炒、酒浸炒、鹽炙(制)、鹽蒸、雷公法等不同方法[2]。近年來,國內(nèi)外學(xué)者對補骨脂的研究表明補骨脂具有抗菌、抗病毒、增強免疫力、抗腫瘤、治療骨質(zhì)疏松、平喘、肝藥酶誘導(dǎo)、治療白癜風(fēng)及對藥物代謝等作用[3]。

    其中,補骨脂揮發(fā)油對革蘭氏陽性菌有抑制作用[4]。補骨脂中的異補骨脂查耳酮、補骨脂二氫黃酮甲醚和erythrinin A有較強的抗金黃色葡萄球菌及表皮葡萄球菌作用,其黃酮苷3,5,3',4'-四羥基-7-甲氧基黃酮-3'-O-α-L-吡喃木糖(1→3)-O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→4)-O-β-D-吡喃半乳糖苷對金黃色葡萄球菌、菌銅綠假單胞菌及真菌尖孢鐮刀菌和指狀青霉有抑制作用[5-6]。補骨脂酚在體外有抑制金黃色葡萄球菌生長的作用,萜酚類成分psoracorylifols A~E具有抗幽門螺旋桿菌的活性[7-8]。余建清等對補骨脂不同炮制品的抗菌作用進行了比較,結(jié)果顯示,以酒浸炒品的抗菌作用最顯著[9]。

    目前對補骨脂的研究比較廣泛和深入,但其不同炮制品體外抑菌活性的系統(tǒng)研究報道較少,本實驗對補骨脂生品及不同炮制品的抑菌活性進行了系統(tǒng)的研究,從抑菌圈、MIC和IC50值對其抑菌活性進行了比較。為其進一步的抑菌機理的研究和臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。

    1 實驗材料與儀器

    1.1 藥材 補骨脂購于開封市樂仁堂總店,經(jīng)河南大學(xué)中藥研究所生藥教研室李昌勤副教授鑒定。

    1.2 菌種 金黃色葡萄球菌(Staphlococcus aureus,SA,ATCC25923,購于上海天呈生物信息有限公司),耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(Methcillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和 β-內(nèi)酰胺酶陽性金黃色葡萄球菌(ESBLs-SA)河南大學(xué)附屬淮河醫(yī)院臨床分離獲得(經(jīng)全自動微生物分析儀VITEK-AMS鑒定,99%的符合率)。小檗堿(本研究所自制,純度>95%)。

    1.3 培養(yǎng)基 Broth Medium、Nutrient Agar(北京奧博星生物技術(shù)有限公司)。

    1.4 儀器 ZWX-201A紫外線空氣消毒器;LRH-150生化培養(yǎng)箱(上海一恒科技有限公司);LDZX-30KB立式壓力蒸汽滅菌器(上海申安醫(yī)療器械廠);JJ-CJ-2FD潔凈工作臺(吳江市凈化設(shè)備總廠);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(Heidolph);電子天平(Mettler-Toledo)。

    2 實驗部分

    2.1 補骨脂炮制品的制備[10-13]

    2.1.1 凈補骨脂 取原藥材,揀去雜質(zhì),清水洗凈,撈出,曬干。用時搗碎。

    2.1.2 炒補骨脂 取補骨脂600 g置炒制容器內(nèi)炒至微鼓起有噼啪聲響。

    2.1.3 鹽炙補骨脂 取補骨脂600 g,以鹽水(粗鹽12 g→100 mL水)拌勻,悶潤4 h,置炒制容器內(nèi)炒至微鼓起有噼啪聲響。

    2.1.4 鹽蒸補骨脂 取補骨脂600 g,以鹽水(粗鹽12 g→100 mL)悶潤過夜,蒸2 h。

    2.1.5 雷公法制補骨脂 取補骨脂600 g加黃酒900 mL,浸泡過夜,濾去余液,以蒸餾水900 mL浸3 d,濾去水分后蒸6 h。

    2.1.6 酒炙補骨脂 取補骨脂600 g加黃酒900 mL,浸泡過夜,濾去余液,置炒制容器內(nèi)炒至微鼓起有噼啪聲響。

    2.2 樣品及對照品的制備 補骨脂生品及炮制品,甲醇浸泡2次,每次3 d,合并濾液,減壓回收溶劑,得生品及炮制品的甲醇總提取物。將生品及炮制品的甲醇總提取物分別分散于80%甲醇-水中,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,濾液濃縮,得到相應(yīng)生品及炮制品的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇部位浸膏。分別稱取得到的生品及炮制品的甲醇總提取物以及石油醚、乙酸乙酯和正丁醇部位的浸膏,用DMSO配成質(zhì)量濃度為50 mg/mL的溶液,即得各樣品溶液。對照品小檗堿用DMSO配成質(zhì)量濃度為2.5 mg/mL 的溶液。

    2.3 體外抗菌實驗方法

    2.3.1 K-B實驗法 按照文獻[14],在超凈工作臺上將滅菌后的瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,平皿標(biāo)記后,用無菌移液管移取已配好的菌液0.1 mL加入平皿中,用涂布器將菌液涂布均勻,制成帶菌平板,將含藥紙片等距置于含菌平板,同時用DMSO做空白對照。置37℃恒溫生化箱內(nèi)培養(yǎng)24 h,觀察菌落生長情況,測定抑菌圈直徑。每份樣品均平行重復(fù)3次,結(jié)果取平均值。

    2.3.2 最低抑菌質(zhì)量濃度(MIC)的測定 將樣品用DMSO進行倍比稀釋后,按2.3.1項操作進行,平行操作3次取平均值,用DMSO作空白對照,培養(yǎng)24 h后觀察結(jié)果。出現(xiàn)抑菌圈的最低樣品質(zhì)量濃度即為此樣品的MIC值,所有操作均在無菌條件下進行。

    2.3.3 半數(shù)抑制質(zhì)量濃度(IC50)的測定[15-16]將90 μL在肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)18 h的金黃色葡萄球菌菌液(SA,MRSA,ESBLs-SA)分別加入潔凈無菌的96孔培養(yǎng)板中,加入不同質(zhì)量濃度梯度的樣品母液10 μL,溶劑(DMSO)終質(zhì)量濃度為1/10樣品母液質(zhì)量濃度。同時設(shè)陰性對照、空白對照和溶劑對照,每個處理3個重復(fù)。將96孔板于37℃下,培養(yǎng)20 h后,用酶標(biāo)儀測定595 nm處的光吸收值,各樣品以相同條件下的上清液吸收度值作為空白對照,減去空白對照即為含菌量的吸收度,相應(yīng)上清液是在10000/6 min的條件下制備,對應(yīng)吸取100 μL。按下面公式計算出抑制率(%):

    抑制率(%)=[(溶劑對照孔OD值-相應(yīng)上清液OD值)-(藥液孔OD值-相應(yīng)上清液OD值)]/(陰性對照 OD值-相應(yīng)上清液 OD值)×100%

    以樣品濃度和抑制率作圖,求出線性回歸方程,計算抑制率為50%時的質(zhì)量濃度即為IC50值。

    3 結(jié)果

    3.1 抑菌圈的測定和最低抑菌質(zhì)量濃度(MIC)的測定 按照2.3.1和2.3.2項實驗方法進行試驗,各樣品對SA、MRSA、ESBLs-SA的的抑菌圈和 MIC值數(shù)據(jù)見表1。

    3.2 各樣品對 SA、MRSA、ESBLs-SA 的 IC50值 數(shù)據(jù)見表1。

    4 結(jié)論

    表1抑菌圈結(jié)果顯示,補骨脂甲醇總提取物和石油醚部位的活性明顯好于乙酸乙酯部位和正丁醇部位的活性。補骨脂生品及炮制品甲醇總提取物對SA的抑菌圈由大到小:鹽炙補骨脂、炒補骨脂、鹽蒸補骨脂、雷公法炙補骨脂、酒炙補骨脂(12 mm),補骨脂生品(11 mm);對MRSA的抑菌圈由大到小:炒補骨脂、雷公法炙補骨脂、酒炙補骨脂(12 mm),鹽炙補骨脂、補骨脂生品(11 mm),鹽蒸補骨脂(10 mm);對ESBLs-SA的抑菌圈由大到小:酒炙補骨脂(12 mm),雷公法炙補骨脂(11 mm),鹽炙補骨脂、炒補骨脂、鹽蒸補骨脂、補骨脂生品(10 mm)。補骨脂生品及炮制品的石油醚部位與甲醇總提取物對SA的抑菌圈結(jié)果相同。補骨脂生品及炮制品的石油醚部位對MRSA和ESBLs-SA的抑菌圈相同,結(jié)果由大到小為酒炙補骨脂(12 mm),炒補骨脂、鹽蒸補骨脂(11 mm),鹽炙補骨脂、雷公法炙補骨脂、補骨脂生品(10 mm)。

    表1 各樣品對受試菌種的抑菌圈、MIC值和IC50值Tab.1 The diameter of antibacterial rings,the MIC and IC50of the samples

    酒炙補骨脂(甲醇總提取物)和酒炙補骨脂(石油醚部位)在質(zhì)量濃度為50 mg/mL對3種菌的抑菌圈均為12 mm,活性最好;補骨脂生品(正丁醇部位)在質(zhì)量濃度為50 mg/mL對3種菌的抑菌圈最小均為8 mm。經(jīng)炮制后乙酸乙酯部位和正丁醇部位均較生品的抗菌活性增加,不同的炮制方法對活性增加的程度有不同的影響,對SA和MRSA的抑菌圈顯示,酒炙補骨脂的正丁醇部位較生品由8 mm增加到12 mm,活性增加最明顯,對ESBLs-SA的抑菌圈顯示,酒炙補骨脂的甲醇總提取物和石油醚部位較生品由10 mm增加到12 mm,活性增加最明顯。

    表1的 MIC值顯示,補骨脂生品各部位對SA的活性由高到低:石油醚部位(31.3 μg/disc),甲醇總提取物、乙酸乙酯部位(62.5 μg/disc),正丁醇部位(250 μg/disc);對MRSA活性由高到低:石油醚部位(31.3 μg/disc),甲醇總提取物(62.5 μg/disc),乙酸乙酯部位(125 μg/disc),正丁醇部位(250 μg/disc);對ESBLs-SA活性由高到低:石油醚部位、甲醇總提取物(31.3 μg/disc),乙酸乙酯部位(125 μg/disc),正丁醇部位(250 μg/disc);說明石油醚部位是補骨脂生品主要的抑菌活性部位。

    由MIC值可以看出,對SA的抑制活性,炮制后的補骨脂MIC值均小于對應(yīng)生品,其中炒補骨脂(甲醇總提取物),鹽炙、鹽蒸、雷公法炙、炒補骨脂(石油醚部位)活性最好,MIC值均為7.9 μg/disc;對MRSA,石油醚部位的活性較其它部位活性好,活性由高到低為補骨脂生品(MIC=31.3 μg/disc),鹽炙補骨脂(MIC=15.7 μg/disc),鹽炙、鹽蒸、雷公法炙、炒補骨脂(MIC=7.9 μg/disc);對 ESBLs-SA,甲醇總提取物中雷公法制補骨脂的MIC最大,為62.5 μg/disc,石油醚、乙酸乙酯、正丁醇各部位中雷公法制補骨脂的MIC也最大(MIC=31.3 μg/disc,125 μg/disc,250 μg/disc),即對于菌種 ESBLs-SA,雷公法炮制的補骨脂抑菌活性較其它炮制方法炮制的補骨脂活性低。

    對SA的抑制活性酒炙補骨脂(石油醚部位)最好,IC50是0.10 mg/mL,雷公法制補骨脂(正丁醇部位)最低,IC50是 4.24 mg/mL;對 MRSA 的抑制活性,補骨脂生品(甲醇總提取物)最好,IC50是0.16 mg/mL;鹽炙補骨脂(石油醚部位)最低,IC50是4.64 mg/mL;對ESBLs-SA的抑制活性,鹽蒸補骨脂(甲醇總提取物)活性最好,IC50是0.28 mg/mL,鹽炙補骨脂(石油醚部位)最低,IC50是4.38 mg/mL。IC50值顯示酒炙補骨脂活性較好,其中酒炙補骨脂甲醇總提取物對SA、MRSA、ESBLs-SA的抑制活性均較好,IC50分別是 0.76、0.69、0.89 mg/mL,均小于 1.00 mg/mL。

    綜上所述,補骨脂生品和炮制后的補骨脂對SA、MRSA、ESBLs-SA的抑制作用明顯,尤其是酒炙補骨脂抑菌活性增強的較顯著。補骨脂的藥用價值顯示出良好的開發(fā)前景,本實驗首次采用補骨脂生品及炮制品的甲醇總提取物及石油醚、乙酸乙酯和正丁醇不同部位的浸膏作為樣品進行研究,結(jié)果明確了其主要抗菌活性部位,使后續(xù)的研究更加有針對性,并為其進一步的抑菌機理的研究提供了科學(xué)依據(jù),對臨床上治療各種致病菌感染有重要意義。

    [1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2010年版一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:174.

    [2]姚祥珍,沈 鴻,富杭育.補骨脂古今主要炮制品藥理作用的比較[J].中國中藥雜志,1996,21(9):539-541.

    [3]羅 蘋,尚發(fā)全.補骨脂開發(fā)現(xiàn)狀與前景[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2008,17(13):2014-2015.

    [4]Bandarenko A S.Antimicrobial and antiviral activity of essential oil from Psoralea drupaeca and its activity[J].Rasit Resur,1974,10(4):583-588.

    [5]Yin S,F(xiàn)an C Q,Wang Y,et al.Antibacterial prenylflavone derivatives from Psoralea corylifolia,and their structure activity relationship study[J].Bioorg Med Chem,2004,12(16):4387-4392.

    [6]Yadava R N,Verma V.A new biologically active flavonol-glycoside from Psoralea corylifolia(Linn)[J].J Asian Nat Prod Res,2005,7(4):671-675.

    [7]Kaul R N.Kinetics of the antista-phylococcal antivity of bakuchiol in vitro[J].Arzneimittelforsch,1976,26(4):486-489.

    [8]Sheng Y,Cheng Q F,Lei D,et al.Psoracorylifols A-E,five novel compounds with activity against Helicobacter pylori from seeds of Psoralea corylifolia[J].Tetrahedron,2006,62:2569-2575.

    [9]余建清,雷嘉川,何光明,等.補骨脂不同炮制品抗菌作用的研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報,1997,9(4):28-29.

    [10]衛(wèi)生部中醫(yī)研究院中藥研究所,衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所.中藥炮炙經(jīng)驗集成[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1963:140-141.

    [11]姚三桃,楊 濱.中藥補骨脂炮制沿革的研究[J].基層中藥雜志,1996,10(1):17-19.

    [12]王淑蘭.補骨脂炮制工藝探討[J].中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥雜志,2005,12(12):45.

    [13]龔千鋒.中藥炮制學(xué)[M].中國中醫(yī)藥出版社,北京,2003,219-220.

    [14]康文藝,劉瑜新,宋艷麗,等.尼泊爾酸模α-葡萄糖苷酶抑制活性及抗菌活性研究[J].中成藥,2010,32(7):1249-1251.

    [15]唐 靜,談滿良,趙江林,等.多孔板-MTT比色法測定植物抗菌成分對細菌的抑制活性[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2008,20(6):949-952.

    [16]熊海燕,王為國,王存文,等.介紹測量菌液濃度的一種方法[J].四川食品與發(fā)酵,2003,30(4):45-46.

    猜你喜歡
    雷公生品補骨脂
    鹽補骨脂對人HK-2、人Hep-G2及豬LLC-PK1的細胞毒性比較分析
    雷公與數(shù)學(xué)家
    苦參生品及其炮制品的2種不同提取方法的抗菌藥效研究
    蛤蚧生品及不同炮制品對腺嘌呤致腎陽虛模型小鼠的改善作用比較
    中國藥房(2020年13期)2020-07-17 02:47:00
    朱砂生品和炮制品X-射線衍射Fourier指紋圖譜比較研究
    補骨脂果皮和種子中化學(xué)成分的分布規(guī)律研究*
    3種補骨脂炮制品水煎液中4種成分含量的比較
    中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:41
    雷公奇遇記
    奧秘(2014年12期)2014-12-16 21:38:36
    雷公奇遇記之兩面國
    奧秘(2014年7期)2014-09-10 07:22:44
    雷公奇遇記之方便國
    奧秘(2014年8期)2014-08-30 21:36:59
    午夜老司机福利剧场| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产成人一区二区在线| 在线观看www视频免费| 黑人欧美特级aaaaaa片| 日本色播在线视频| 看免费成人av毛片| 欧美激情国产日韩精品一区| 日韩欧美精品免费久久| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲第一区二区三区不卡| 久热这里只有精品99| 激情视频va一区二区三区| 99久国产av精品国产电影| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲在久久综合| av在线app专区| 99久久综合免费| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 日本黄色日本黄色录像| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 午夜精品国产一区二区电影| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 久久99精品国语久久久| 人妻一区二区av| 国产成人欧美| 99久久综合免费| 青春草亚洲视频在线观看| 亚洲国产av影院在线观看| 国产有黄有色有爽视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 一级黄片播放器| 丰满少妇做爰视频| 最黄视频免费看| 亚洲精品一二三| 午夜影院在线不卡| 人人澡人人妻人| 91aial.com中文字幕在线观看| 永久网站在线| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 日韩视频在线欧美| 中文字幕制服av| 少妇人妻精品综合一区二区| 欧美精品国产亚洲| 日本与韩国留学比较| 少妇的逼水好多| 九九爱精品视频在线观看| 丰满少妇做爰视频| 久久ye,这里只有精品| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲,欧美精品.| 精品人妻一区二区三区麻豆| 秋霞在线观看毛片| 一区二区三区四区激情视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 日本av免费视频播放| av.在线天堂| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲国产精品国产精品| 下体分泌物呈黄色| 人人澡人人妻人| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 久久99精品国语久久久| 国产高清不卡午夜福利| 色5月婷婷丁香| 一级毛片我不卡| 搡老乐熟女国产| 国产片内射在线| 国产国语露脸激情在线看| 99re6热这里在线精品视频| 国产日韩欧美在线精品| 一本久久精品| 亚洲成人手机| av卡一久久| 青青草视频在线视频观看| 七月丁香在线播放| 国产一区二区三区av在线| 久久国产精品大桥未久av| 久久婷婷青草| 国产乱人偷精品视频| 一二三四在线观看免费中文在 | 我的女老师完整版在线观看| 中文天堂在线官网| 少妇高潮的动态图| 午夜福利,免费看| 午夜福利乱码中文字幕| 丝袜喷水一区| 亚洲国产日韩一区二区| 熟女人妻精品中文字幕| 美女福利国产在线| 国产av精品麻豆| 熟女av电影| 久久狼人影院| 内地一区二区视频在线| 黄色视频在线播放观看不卡| 亚洲成人手机| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产片内射在线| 国产亚洲最大av| 免费人妻精品一区二区三区视频| 精品国产露脸久久av麻豆| 亚洲精品美女久久av网站| 赤兔流量卡办理| 久久久a久久爽久久v久久| 欧美成人精品欧美一级黄| 99热6这里只有精品| 99九九在线精品视频| 亚洲情色 制服丝袜| 精品久久国产蜜桃| 美女国产视频在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久99一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产精品人妻久久久久久| videos熟女内射| 人妻系列 视频| 亚洲精品国产av成人精品| av卡一久久| 久久ye,这里只有精品| 亚洲成国产人片在线观看| 最黄视频免费看| 一区二区三区精品91| 久久99精品国语久久久| 免费高清在线观看视频在线观看| 婷婷色麻豆天堂久久| 一级片免费观看大全| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲欧美成人精品一区二区| 91成人精品电影| 18禁动态无遮挡网站| 国产老妇伦熟女老妇高清| videossex国产| 91精品国产国语对白视频| 一级毛片电影观看| 亚洲内射少妇av| 少妇的丰满在线观看| 亚洲美女视频黄频| 26uuu在线亚洲综合色| 国产国语露脸激情在线看| 国产成人精品久久久久久| 免费av不卡在线播放| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 最近中文字幕2019免费版| 香蕉精品网在线| 自线自在国产av| 97精品久久久久久久久久精品| 国产精品一区www在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 欧美人与性动交α欧美软件 | 涩涩av久久男人的天堂| 国产乱人偷精品视频| 老熟女久久久| 亚洲图色成人| 国产在线一区二区三区精| 性色av一级| 欧美3d第一页| 欧美丝袜亚洲另类| 91久久精品国产一区二区三区| 久久久精品94久久精品| 精品一区在线观看国产| 国产精品欧美亚洲77777| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 色哟哟·www| 两个人看的免费小视频| 精品国产国语对白av| 亚洲精品久久午夜乱码| 天美传媒精品一区二区| 国精品久久久久久国模美| 天美传媒精品一区二区| 成人无遮挡网站| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产在视频线精品| 国产精品嫩草影院av在线观看| 最近的中文字幕免费完整| 欧美亚洲日本最大视频资源| 成年av动漫网址| 国产亚洲一区二区精品| 丰满饥渴人妻一区二区三| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲av综合色区一区| 国产成人av激情在线播放| 午夜日本视频在线| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 边亲边吃奶的免费视频| 日韩av不卡免费在线播放| 男的添女的下面高潮视频| 一级片免费观看大全| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 男人操女人黄网站| 日韩三级伦理在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 久久精品国产自在天天线| 日韩大片免费观看网站| 国产精品人妻久久久影院| 激情五月婷婷亚洲| 黄色毛片三级朝国网站| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 制服丝袜香蕉在线| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 欧美人与善性xxx| av播播在线观看一区| 久久午夜综合久久蜜桃| 人妻系列 视频| 欧美人与善性xxx| 18在线观看网站| 少妇的丰满在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲精品av麻豆狂野| 热re99久久国产66热| 亚洲四区av| 国产精品99久久99久久久不卡 | 免费观看av网站的网址| 天天操日日干夜夜撸| 22中文网久久字幕| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 免费观看a级毛片全部| 亚洲国产精品专区欧美| 一级片'在线观看视频| www.熟女人妻精品国产 | 考比视频在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲av日韩在线播放| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲伊人久久精品综合| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲美女视频黄频| 少妇人妻久久综合中文| 伦理电影免费视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲色图综合在线观看| videossex国产| 久久久久精品性色| 啦啦啦啦在线视频资源| 熟妇人妻不卡中文字幕| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 美女中出高潮动态图| 亚洲人成网站在线观看播放| 岛国毛片在线播放| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 精品少妇黑人巨大在线播放| 九九在线视频观看精品| 1024视频免费在线观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 国产亚洲最大av| av国产久精品久网站免费入址| av女优亚洲男人天堂| 97精品久久久久久久久久精品| av黄色大香蕉| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲精品自拍成人| 亚洲熟女精品中文字幕| 一本色道久久久久久精品综合| 成人影院久久| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 一级黄片播放器| 精品亚洲成国产av| 伦精品一区二区三区| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 免费看光身美女| 1024视频免费在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲国产最新在线播放| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 夜夜爽夜夜爽视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 精品人妻偷拍中文字幕| 成人国语在线视频| 成人国产av品久久久| 亚洲av免费高清在线观看| www.熟女人妻精品国产 | 久久这里有精品视频免费| 久久久久国产网址| 国产福利在线免费观看视频| 日本av免费视频播放| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 两性夫妻黄色片 | 极品人妻少妇av视频| 国产片内射在线| 婷婷色综合www| 十八禁高潮呻吟视频| 成年人免费黄色播放视频| 天天操日日干夜夜撸| 一区二区av电影网| 伦理电影免费视频| 性色avwww在线观看| a级毛色黄片| 一个人免费看片子| av有码第一页| 国产精品国产三级专区第一集| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲,一卡二卡三卡| 国产日韩欧美视频二区| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产精品.久久久| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 99香蕉大伊视频| 男女国产视频网站| 9191精品国产免费久久| 99热这里只有是精品在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 黄色配什么色好看| 母亲3免费完整高清在线观看 | 捣出白浆h1v1| 熟女电影av网| 婷婷色综合大香蕉| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲精品日本国产第一区| av在线老鸭窝| 91精品三级在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 2018国产大陆天天弄谢| 日日爽夜夜爽网站| 曰老女人黄片| videos熟女内射| 黄色一级大片看看| 久久99精品国语久久久| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产精品99久久99久久久不卡 | 日本与韩国留学比较| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 国精品久久久久久国模美| 欧美成人午夜精品| 亚洲国产看品久久| 国产高清不卡午夜福利| 69精品国产乱码久久久| 精品一区在线观看国产| 高清欧美精品videossex| 在线观看www视频免费| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产成人精品无人区| 国产男女内射视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 精品亚洲成国产av| 久久久久精品人妻al黑| 伊人亚洲综合成人网| 色吧在线观看| av卡一久久| 国产精品久久久久久久久免| 国产一区二区激情短视频 | av不卡在线播放| 99热6这里只有精品| 日韩电影二区| 亚洲av日韩在线播放| 国产男人的电影天堂91| 欧美国产精品va在线观看不卡| av线在线观看网站| 色94色欧美一区二区| 女人精品久久久久毛片| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久精品久久久久久久性| h视频一区二区三区| 精品福利永久在线观看| 久久久久久伊人网av| 精品久久久精品久久久| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 久久久久精品人妻al黑| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 多毛熟女@视频| 国产精品久久久久久精品电影小说| 在线观看人妻少妇| 亚洲人成77777在线视频| 91aial.com中文字幕在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲图色成人| 女性生殖器流出的白浆| 男女边摸边吃奶| 国产成人精品婷婷| 亚洲,一卡二卡三卡| 国产精品久久久久久久久免| 高清在线视频一区二区三区| a级片在线免费高清观看视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 成人免费观看视频高清| 成人国产麻豆网| 黄色毛片三级朝国网站| 久久人人爽人人片av| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产成人精品无人区| 亚洲av.av天堂| 美国免费a级毛片| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲人成77777在线视频| 最新中文字幕久久久久| 午夜福利视频精品| 国产免费视频播放在线视频| 久久人人爽人人片av| 国产精品不卡视频一区二区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 黑人高潮一二区| 在现免费观看毛片| 成人综合一区亚洲| 国产精品 国内视频| 国产精品免费大片| 人妻人人澡人人爽人人| 免费黄网站久久成人精品| 久久精品人人爽人人爽视色| 成人手机av| 黄色毛片三级朝国网站| 蜜桃国产av成人99| 99国产精品免费福利视频| 成人手机av| 国国产精品蜜臀av免费| 一级黄片播放器| 大香蕉久久网| 少妇的丰满在线观看| 亚洲国产色片| 免费看不卡的av| 香蕉丝袜av| 高清av免费在线| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产不卡av网站在线观看| 男女免费视频国产| 成人国语在线视频| 亚洲国产精品999| 一级黄片播放器| 九九爱精品视频在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲久久久国产精品| 美女大奶头黄色视频| 日韩伦理黄色片| 最近手机中文字幕大全| 国产乱人偷精品视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 欧美日韩亚洲高清精品| 99视频精品全部免费 在线| 香蕉国产在线看| 日日爽夜夜爽网站| 国产又爽黄色视频| 老司机影院毛片| 一级,二级,三级黄色视频| 黄色怎么调成土黄色| 久久精品夜色国产| 黄色配什么色好看| 中文天堂在线官网| 久久热在线av| 欧美成人午夜精品| 亚洲av电影在线进入| 亚洲av成人精品一二三区| 最近手机中文字幕大全| 晚上一个人看的免费电影| 精品亚洲成国产av| 日本-黄色视频高清免费观看| 日本av免费视频播放| 亚洲国产欧美在线一区| 午夜91福利影院| 国产xxxxx性猛交| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲一区二区三区欧美精品| 91在线精品国自产拍蜜月| 99热这里只有是精品在线观看| 深夜精品福利| 蜜臀久久99精品久久宅男| 国产成人免费无遮挡视频| 日韩一区二区三区影片| 国产精品.久久久| 欧美bdsm另类| 国产亚洲最大av| 高清毛片免费看| 大香蕉久久网| 777米奇影视久久| 又黄又粗又硬又大视频| 久久久精品区二区三区| 久久久久久久久久人人人人人人| 久久久久精品久久久久真实原创| 春色校园在线视频观看| 亚洲图色成人| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲精品视频女| 黄色毛片三级朝国网站| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 99香蕉大伊视频| 男男h啪啪无遮挡| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 午夜老司机福利剧场| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产午夜精品一二区理论片| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 欧美日韩精品成人综合77777| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲国产成人一精品久久久| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 精品人妻偷拍中文字幕| 欧美精品国产亚洲| 黄色 视频免费看| a级片在线免费高清观看视频| 22中文网久久字幕| 久久韩国三级中文字幕| 亚洲美女搞黄在线观看| 岛国毛片在线播放| 婷婷色综合大香蕉| xxxhd国产人妻xxx| 十八禁高潮呻吟视频| 亚洲av欧美aⅴ国产| 97在线视频观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 插逼视频在线观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 女人久久www免费人成看片| 香蕉国产在线看| 国产高清国产精品国产三级| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 在线观看人妻少妇| 制服诱惑二区| 国产精品一区www在线观看| 亚洲成色77777| 亚洲情色 制服丝袜| 少妇的逼水好多| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 国产69精品久久久久777片| 又大又黄又爽视频免费| 久久女婷五月综合色啪小说| 久久久久国产网址| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 日本爱情动作片www.在线观看| 另类精品久久| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲第一av免费看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 9热在线视频观看99| 成年人免费黄色播放视频| 日韩三级伦理在线观看| 蜜桃国产av成人99| 免费观看在线日韩| 亚洲国产精品一区三区| 另类精品久久| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 丝袜美足系列| 90打野战视频偷拍视频| 制服人妻中文乱码| 亚洲精品456在线播放app| 午夜日本视频在线| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 考比视频在线观看| 亚洲内射少妇av| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 天天影视国产精品| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 91精品国产国语对白视频| a级片在线免费高清观看视频| 欧美bdsm另类| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲av国产av综合av卡| 久久国内精品自在自线图片| 免费大片黄手机在线观看| 国产成人av激情在线播放| 国产xxxxx性猛交| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 黄色视频在线播放观看不卡| 久久女婷五月综合色啪小说| 国产精品一区二区在线不卡| 赤兔流量卡办理| 最近最新中文字幕免费大全7| 久久人人爽人人片av| 看十八女毛片水多多多| 国产av国产精品国产| 欧美激情 高清一区二区三区| √禁漫天堂资源中文www| 日日啪夜夜爽| 久久久久精品久久久久真实原创| 自线自在国产av| 久久免费观看电影| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 伊人久久国产一区二区| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲,一卡二卡三卡| 三上悠亚av全集在线观看| 国产成人精品久久久久久| 亚洲色图综合在线观看| 国产一区二区激情短视频 | 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲国产欧美在线一区| 国产一级毛片在线| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 熟女人妻精品中文字幕| 一级片免费观看大全| 精品少妇内射三级| 欧美日本中文国产一区发布| 天堂8中文在线网| 一级爰片在线观看| av免费在线看不卡| 日韩视频在线欧美| 最近最新中文字幕免费大全7| 熟妇人妻不卡中文字幕| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 久久青草综合色| 国产色爽女视频免费观看| 一级毛片 在线播放| 高清毛片免费看| av在线观看视频网站免费| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲av日韩在线播放| 国产免费一区二区三区四区乱码| 欧美人与善性xxx| 亚洲,一卡二卡三卡| 午夜福利,免费看| 久久久久久久精品精品| 中国美白少妇内射xxxbb|