血清Ⅰ類MHC鏈相關(guān)蛋白A、C-反應(yīng)蛋白、α1-酸性糖蛋白對(duì)惡性婦科腫瘤診斷的臨床檢測(cè)

楊 春

兗礦集團(tuán)公司總醫(yī)院，山東鄒城 273500

婦科腫瘤主要包括外陰腫瘤、陰道腫瘤、子宮腫瘤、卵巢腫瘤和輸卵管腫瘤。其中子宮及卵巢腫瘤多見(jiàn)，外陰及輸卵管腫瘤少見(jiàn)。隨著分子生物學(xué)的進(jìn)展，當(dāng)前血清Ⅰ類MHC鏈相關(guān)蛋白A、C-反應(yīng)蛋白、α1-酸性糖蛋白是用于婦科腫瘤診斷的可行方法。Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體鏈相關(guān)蛋白A(MICA)，具有編碼、表達(dá)和轉(zhuǎn)錄蛋白質(zhì)功能。MICA蛋白的表達(dá)在正常組織較少，但在腸道上皮組織表達(dá)量稍高，但在多種腫瘤細(xì)胞，尤其是上皮源性的腫瘤均有不同程度的表達(dá)，并很可能與婦科腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。C-反應(yīng)蛋白（CRP）是一種急性時(shí)相蛋白，它由肝細(xì)胞產(chǎn)生，但其產(chǎn)生機(jī)制尚不清楚，可能與白細(xì)胞介素和前列腺素有關(guān)。正常人血清中C-反應(yīng)蛋白含量極微，當(dāng)機(jī)體處于驗(yàn)證或組織損傷狀態(tài)時(shí)則C-反應(yīng)蛋白會(huì)出現(xiàn)增高，而惡性腫瘤組織損傷嚴(yán)重，故會(huì)出現(xiàn)CRP升高的現(xiàn)象。α1-酸性糖蛋白（α1-AG）也是一種急性時(shí)相蛋白,在多種病理狀態(tài)下該蛋白將會(huì)發(fā)生特征性變化,在急性感染、損傷以及癌癥患者中,血清α1-AG含量呈不同程度升高。

本研究將構(gòu)建受試者工作特征ROC曲線模型，綜合評(píng)價(jià)血清Ⅰ類 MHC 鏈相關(guān)蛋白 A（MICA）、C-反應(yīng)蛋白（CRP）、α1-酸性糖蛋白（α1-AG）三種方法診斷惡性婦科腫瘤的效果并進(jìn)行對(duì)比分析，以期為我國(guó)惡性婦科腫瘤尋找最佳的實(shí)驗(yàn)診斷方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選用我院2010年2月～2011年10月47例惡性婦科腫瘤患者，年齡54～85歲，平均年齡（62.85±5.97）歲。同時(shí)選擇同期的健康體檢者20例作為健康對(duì)照組，年齡49～81歲，平均年齡（61.13±4.84）歲。實(shí)驗(yàn)組均經(jīng)病理診斷確診為惡性婦科腫瘤患者。排除標(biāo)準(zhǔn)①意識(shí)障礙、生命體征不穩(wěn)定；②房顫等其他疾病；③嚴(yán)重精神疾病癥狀，臨床不能配合的患者；④嚴(yán)重肝腎疾病患者及嚴(yán)重全身消耗性疾病患者；⑤入院1周前有重大手術(shù)史；⑥異型蛋白血癥。所有入選者均簽署知情同意書。

1.2 檢測(cè)方法、儀器及試劑

ELISA法檢測(cè)血清MICA水平，人類MICA-ELISA試劑盒，牛血清清蛋白(BSA)，NaCl，KCl，Tween-20、Na2HPO4、KH2PO4、H2SO4等均購(gòu)自Sigma公司，全波長(zhǎng)酶聯(lián)儀購(gòu)自美國(guó)Sunrise公司；采用免疫單純擴(kuò)散法檢測(cè)血清CRP水平，抗CRP血清、單擴(kuò)板、標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自南京大學(xué)武進(jìn)生化實(shí)驗(yàn)工廠；采用透射混濁法測(cè)定血清α1-AG水平,寶靈曼試劑盒,奧林巴斯640型全自動(dòng)生化分析儀。以上檢測(cè)均按操作說(shuō)明進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 檢驗(yàn)結(jié)果的描述性統(tǒng)計(jì)

實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的MICA、CRP、α1-AG的描述性統(tǒng)計(jì)結(jié)果。見(jiàn)表1。

表1 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的MICA、CRP、α1-AG描述性統(tǒng)計(jì)（±s）

表1 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的MICA、CRP、α1-AG描述性統(tǒng)計(jì)（±s）

MICA（ng/mL）CRP（mg/L） α1-AG（mg/L）實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組0.79±0.27 0.32±0.14 42.16+2.32 1.04±0.14 2130.13±650.24 625.91±180.72

2.2 對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組的平均值的顯著性t檢驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的MICA、CRP、α1-AG的平均值的顯著性t檢驗(yàn)結(jié)果。見(jiàn)表2。

表2 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的MICA、CRP、α1-AG的顯著性t檢驗(yàn)

通過(guò)平均值的顯著性t檢驗(yàn)，可以看出在1%的顯著性水平下，惡性婦科腫瘤患者的MICA、CRP、α1-AG指標(biāo)均顯著大于對(duì)照組的數(shù)值。

2.3 不同檢測(cè)方法間的相關(guān)性

對(duì)MICA、CRP、α1-AG這些方法進(jìn)行相關(guān)性檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，這些方法間有一定的相關(guān)性。

表3 不同檢測(cè)方法間的相關(guān)性

2.4 應(yīng)用ROC曲線評(píng)價(jià)3種診斷方法的預(yù)測(cè)價(jià)值

根據(jù)ROC曲線法診斷切點(diǎn)的靈敏度和特異度，可以以靈敏度與特異度之和的最高值為診斷最優(yōu)切點(diǎn)，不同檢測(cè)方法診斷AR準(zhǔn)確性以ROC曲線下面積（AUROC）表示：MICA監(jiān)測(cè)AR靈敏度、特異度和AUROC為97.8%、76.2%、0.810；CRP為97.8%、57.1%、0.918；α1-AG 為 93.5%、95.2%、0.835（具體內(nèi)容見(jiàn)表 4，表5，ROC曲線及 AUC見(jiàn)圖 1）。

表4 ROC曲線的分析結(jié)果

表5 3種檢測(cè)方法不同診斷界值篩查效果分析

圖1 ROC分析結(jié)果

3 討論

惡性婦科腫瘤的實(shí)驗(yàn)診斷尚缺乏“金標(biāo)準(zhǔn)”。理想的檢測(cè)方法應(yīng)具有良好的靈敏度和特異度。因此本研究選用MICA、CRP、α1-AG三種標(biāo)志物作為觀察指標(biāo)，并利用ROC曲線法對(duì)診斷閾值的設(shè)定，對(duì)AR進(jìn)行篩查，并對(duì)各種篩查方法進(jìn)行靈敏度、特異度和準(zhǔn)確性評(píng)價(jià)，進(jìn)一步提高診斷效能。ROC曲線指受試者工作特征曲線 (receiver operating characteristic curve),是反映敏感性和特異性連續(xù)變量的綜合指標(biāo),是用構(gòu)圖法揭示敏感性和特異性的相互關(guān)系，它通過(guò)將連續(xù)變量設(shè)定出多個(gè)不同的臨界值，從而計(jì)算出一系列敏感性和特異性，再以敏感性為縱坐標(biāo)、（1-特異性）為橫坐標(biāo)繪制成曲線，曲線下面積越大，診斷準(zhǔn)確性越高。在ROC曲線上，最靠近坐標(biāo)圖左上方的點(diǎn)為敏感性和特異性均較高的臨界值。本研究的結(jié)果顯示：MICA>0.3338(ng/mL)、CRP>3.0254(mg/mL)或 α1-AG>428(mg/mL)的患者可認(rèn)為存在AR。ROC曲線下面積反映診斷試驗(yàn)的準(zhǔn)確性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示AUROC：CRP>α1-AG>MICA?？梢哉J(rèn)為，相比于其他兩種監(jiān)測(cè)方法，CRP的診斷準(zhǔn)確性最好，更有助于指導(dǎo)臨床的惡性婦科腫瘤的診斷。

C-反應(yīng)蛋白是1930年學(xué)者Tillett等在急性大葉性肺炎患者的血清中發(fā)現(xiàn)的。CRP是人類重要的急性期反應(yīng)蛋白，在急性期其濃度可升高上千倍，循環(huán)中的CRP半衰期為19h，它作為一種急性時(shí)相蛋白已經(jīng)廣泛用于炎癥疾病的診斷。CRP陽(yáng)性，可見(jiàn)于多種疾病如：腎炎、肺炎、各類惡性腫瘤及各種急性感染、體外傷以及組織壞死、心肌梗死、心功能不全、多發(fā)性骨髓瘤、白血病、膽石癥、肝炎、痢疾、風(fēng)濕熱等疾病。近年來(lái)國(guó)際上已經(jīng)有較多文獻(xiàn)報(bào)道建議把CRP作為診斷惡性腫瘤疾病的一個(gè)重要指標(biāo)。此外據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，CRP的臨床測(cè)定值隨著臨床分期的增加而升高，因此在產(chǎn)科臨床上可以通過(guò)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CRP水平來(lái)了解患者病情的嚴(yán)重程度并作為判斷疾病的預(yù)后情況，以達(dá)到婦科惡性腫瘤“早診斷、早治療”原則的目的，并有望根據(jù)標(biāo)志物檢驗(yàn)值的改變，調(diào)整臨床的治療方案，提高惡性婦科腫瘤患者的存活率。

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