注射用卡絡磺鈉與注射用頭孢他啶配伍穩(wěn)定性考察

黃麟杰，莊魯江，李 鵬，朱 軍* ，鄭 芳

卡絡磺鈉是臨床上常用的止血藥，具有四氫吲哚結構，臨床上用于治療上呼吸道、泌尿系統(tǒng)等由于毛細管通透性增加引起的出血性疾?。?-2］。頭孢他啶屬于半合成的第三代頭孢菌素，具有抗菌譜廣、抗菌活性強的特性。臨床聯(lián)用兩藥預防和治療出血性感染的情況較為常見，但缺乏有關兩者聯(lián)用的穩(wěn)定性報道，因此，筆者參照臨床用藥濃度，應用RP-HPLC 方法測定卡絡磺鈉與頭孢他啶配伍后在6 h 聯(lián)用的含量變化，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與藥品

1.1 儀器 日本島津AEU-210 電子天平，pHS-3D型酸度計(上海雷磁精密科學儀器有限公司);戴安UltiMate 3000 高效液相色譜儀(四元低壓梯度系統(tǒng)，DAD 檢測器，變色龍色譜信息管理軟件)，KQ-100DB 型超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)。

1.2 藥品與試劑 注射用卡絡磺鈉(重慶余慶堂制藥有限公司，批號:111201，規(guī)格:40 mg/支);注射用頭孢他啶(商品名:賽之訊，海南海靈化學有限公司，批號:1110134，規(guī)格:1 g/支);注射用頭孢他啶(商品名:金石，汕頭金石粉針劑有限公司，批號:1108201，規(guī)格:1 g/支);卡絡磺鈉對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:100366-200702，規(guī)格:100 mg);頭孢他啶對照品(上海將來試劑公司，批號:1098173，規(guī)格:100 mg，含量99%);0.9%氯化鈉注射液(四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號:11120101-1);磷酸二氫鉀(上海市浦東化學試劑廠，分析純);磷酸氫二鈉(武漢市江北化學試劑有限責任公司，分析純);乙腈(天津市科密歐化學試劑有限責任公司，色譜純);水為單位自制純化。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱:phenomenex Prodigy 5u ODS3 C18(150 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:乙腈-磷酸緩沖鹽(8∶92，磷酸緩沖鹽的配制:無水磷酸二氫鉀27.22 g，磷酸氫二鈉42.59 g，溶于1 000 mL蒸餾水)［3］;流速:1.0 mL/min;檢測波長:254 nm(頭孢他啶)，363 nm(卡絡磺鈉);柱溫:25 ℃;進樣量:20 μL。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液 精密稱取頭孢他啶對照品與卡絡磺鈉對照品各適量，分別用流動相制成濃度為2.031 mg/mL 頭孢他啶對照品溶液、0.802 mg/mL卡絡磺鈉對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液 取兩個不同廠家的注射用頭孢他啶各1 支，分別溶解于100 mL 0.9%氯化鈉注射液中，混勻，即得;另取注射用卡絡磺鈉1支，溶解于100 mL 0.9%氯化鈉注射液中，混勻，即得。

2.2.3 配伍溶液 取兩個廠家同批號的注射用頭孢他啶各1 支，分別與同批號的注射用卡絡磺鈉平行注入兩個同批號的100 mL 0.9%氯化鈉溶液中，混勻，即得。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗 取“2.2.1”項下對照品溶液，用流動相稀釋20 倍，按“2.1”項色譜條件下進樣，記錄色譜圖。在此條件下，頭孢他啶、卡絡磺鈉保留時間分別為3.87、5.26 min，其色譜峰理論塔板數(shù)均＞2 000，分離度＞1.5，主峰DAD 匹配度均不低于999.91，說明專屬性良好(見圖1)。

圖1 色譜圖

2.4 標準曲線的繪制 精密量取“2.2.1”項下卡絡磺鈉、頭孢他啶對照品溶液各1、2、5、8、10 mL，分別置于100 mL 容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。在“2.1”項下進樣，記錄色譜圖，以峰面積(Y)為縱坐標、進樣量(X)為橫坐標，繪制標準曲線，得卡絡磺鈉的標準曲線:Y卡= 1.57X卡+1.29 (r = 0.999 3，n = 5)，線性范圍:8 ～80 μg/mL;同法測得頭孢他啶的標準曲線:Y頭=1.21X頭+8.88 (r =0.999 3，n =5)，線性范圍:20.3 ～203 μg/mL。卡絡磺鈉與頭孢他啶均處于線性范圍內。

2.5 精密度試驗 精密吸取“2.2.1”項下對照品溶液，分別用流動相稀釋20 倍，得到101.5 μg/mL頭孢他啶對照品溶液、40.0 μg/mL 卡絡磺鈉對照品溶液。在“2.1”項下，重復進樣6 次，測定峰面積，結果頭孢他啶與卡絡磺鈉峰面積的RSD 分別為0.53%、0.64%。

2.6 重復性試驗 取同一批樣品，按“2.2.2”項供試液配制方法，平行制備6 份，分別用流動相稀釋100、10 倍進樣，記錄峰面積，結果測得頭孢他啶含量的RSD 分別為0.56%、1.84%;卡絡磺鈉含量的RSD 為0.92%。

2.7 穩(wěn)定性試驗 配制兩個廠家的100 μg/mL頭孢他啶樣品溶液與40.0 μg/mL 卡絡磺鈉樣品溶液，置于25 ℃下，分別于0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 h 在“2.1”項下色譜條件進樣，測定峰面積。結果頭孢他啶與卡絡磺鈉峰面積RSD 分別為1.63%、1.79%、1.27%。說明頭孢他啶與卡絡磺鈉樣品溶液在4 h 內保持穩(wěn)定(n=6)。

2.8 加樣回收率試驗 取已知含量的注射用頭孢他啶與注射用卡絡磺鈉配伍液適量，精密加入高、中、低3 種不同濃度的頭孢他啶與卡絡磺鈉對照品溶液適量，混勻，用流動相分別稀釋10 倍，在“2.1”項色譜條件下進樣測定，記錄峰面積，并計算回收率，結果頭孢他啶與卡絡磺鈉的回收率分別為99.56%、99.61%，見表1。

2.9 配伍穩(wěn)定性試驗

2.9.1 配伍液的制備 按“2.2.3”項操作，置于室溫條件下保存。

2.9.2 外觀與pH 值變化 取上述配伍溶液適量，室溫條件下，在0、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0 h，用納氏比色管觀察顏色變化，測定溶液的pH 值。見表2。

2.9.3 相對百分含量變化 在上述時間間隔，取上述配伍液適量，用純化水分別稀釋100、10 倍，在“2.1”項色譜條件下測定，計算配伍液中不同廠家的頭孢他啶與卡絡磺鈉含量，以0 h 藥物含量為100%，計算各時間點相對百分含量，結果見表2、表3。

3 討論

頭孢他啶具有很強的親水性，屬于強極性物質，在色譜柱保留時間短，易被流動相洗脫;而卡絡磺鈉屬于中等極性物質，與色譜柱固定相親和力較強，在柱中保留時間長，之后被洗脫。筆者在等度洗脫條件下同時測定兩者的含量，考慮兩者的極性以及與固定相親和力的大小，參考相關文獻［4-5］，使用不同比例、乙腈-磷酸緩沖鹽液進行了方法學考察，最終確定在“2.1”項下色譜條件下，頭孢他啶與卡絡磺鈉峰形較好，理論塔板數(shù)較高，兩色譜峰獲得較好的分離，符合含量測定要求。

表1 回收率試驗結果(n=6)

表2 注射用頭孢他啶(賽之迅)與注射用卡絡磺鈉配伍后外觀、pH 值及含量變化

表3 注射用頭孢他啶(金石)與注射用卡絡磺鈉配伍后外觀、pH 值及含量變化

由于頭孢他啶(1 mg/mL)與卡絡磺鈉(0.4 mg/mL)的臨床配伍濃度差別大，兩種藥物各自在254 nm、363 nm 有最大吸收，且于最大吸收波長處相互無干擾，所以，筆者采用分別用純化水稀釋100、10 倍，并在其最大吸收處測定各自含量，同時平行比較不同廠家的頭孢他啶與同一卡絡磺鈉配伍時的含量變化。

注射用頭孢他啶與注射用卡絡磺鈉在0.9%氯化鈉注射液中配伍后，在25 ℃下，6 h 內混合液黃色澄明，未見任何顏色改變、氣泡生成及肉眼可見的沉淀產(chǎn)生，pH 值變化范圍小，不明顯。采用HPLC 法同時測定配伍液中兩組分的含量，在6 h內，卡絡磺鈉與頭孢他啶均無明顯變化。結果表明，注射用頭孢他啶與注射用卡絡磺鈉在0.9%氯化鈉注射液中配伍后，配伍溶液6 h 內保持穩(wěn)定。

［1］ 耿書軍，劉建玲，馮玉英. 肺結核咯血內科治療對比分析［J］.中國美容醫(yī)學，2011，20(2):29.

［2］ 周水根，劉放.反相高效液相色譜法測定注射用卡絡磺鈉注射液的含量和有關物質［J］.海峽藥學，2007，19(10):34-36.

［3］ 國家藥典委員會.中國藥典(二部)［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2011.

［4］ 黃順旺，許龍，曹明成.HPLC 法測定卡絡磺鈉葡萄糖注射液中卡絡磺鈉的含量［J］.安徽醫(yī)藥，2008，12(2):120-121.

［5］ 姜紅梅，鄭芳，朱雪松.卡絡磺鈉注射液與注射用頭孢西丁鈉配伍的穩(wěn)定性［J］.醫(yī)藥導報，2010，29(9):1227-1229.