辣椒基質(zhì)幼苗病害鑒定及生防菌劑防效試驗(yàn)

祁紅英，李師默，宋超

（1.江蘇淮安柴米河農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司，223007；2.江蘇淮陰師范學(xué)院生科院）

穴盤(pán)基質(zhì)育苗的優(yōu)點(diǎn)較多，推廣速度較快，使用基質(zhì)穴盤(pán)進(jìn)行育苗已成為蔬菜育苗的主要方式。然而在蔬菜工廠化育苗過(guò)程中，苗期常會(huì)發(fā)生黑莖病，尤期是在溫度較高的季節(jié)辣椒苗黑莖病表現(xiàn)較為嚴(yán)重，即使苗期不表現(xiàn)癥狀，定植后也會(huì)發(fā)病。為此我們對(duì)此病害進(jìn)行鑒定，并采用生防菌劑進(jìn)行了防效試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

參試?yán)苯菲贩N為綠園3號(hào)。

1.2 病害鑒定

對(duì)辣椒穴盤(pán)育苗中常發(fā)生的莖基部黑腐病進(jìn)行病原物鑒定。取辣椒幼苗中典型的發(fā)病植株，依照《植病研究方法》（方中達(dá)）中病害標(biāo)本病原物分離的方法對(duì)辣椒發(fā)病莖稈樣本進(jìn)行分離。在分離過(guò)程中，為了進(jìn)一步鑒別病原物，分別按照真菌和細(xì)菌的分離方法進(jìn)行樣本分離，選取病健交接處的辣椒組織進(jìn)行分離。

①組織的表面消毒 用70%乙醇液浸泡樣本1 min，將樣本置于滅菌水中漂洗3～4次，接著放于5.25%的NaClO溶液中浸泡10～15 min，然后用無(wú)菌水清洗3～4次，自然風(fēng)干。

②組織分離 （真菌分離）取表面消毒徹底的病部組織，切成2 cm×2 cm的小塊，培養(yǎng)于含鏈霉素的PDA平板上，25℃培養(yǎng)2 d后觀察，設(shè)5個(gè)重復(fù)。2 d后組織周?chē)L(zhǎng)出菌絲，且每個(gè)重復(fù)內(nèi)生長(zhǎng)出來(lái)的真菌菌絲形態(tài)基本一致，同時(shí)鏡檢的菌絲形態(tài)也相同。挑取生長(zhǎng)旺盛的真菌菌絲，進(jìn)行純化，并將分離得到的真菌進(jìn)行回接，以確定基質(zhì)育苗上病害的病原物。

1.3 微生物菌劑

生防菌 AR156、AR156-1、AR156-2 由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病理學(xué)系細(xì)菌研究室提供，每種菌劑設(shè)1×106、1×107、1×108cfu/mL 3 個(gè)濃度梯度，共 9 個(gè)處理；化學(xué)農(nóng)藥為安克（烯酰嗎啉），由德國(guó)巴斯夫公司生產(chǎn)；清水處理作為對(duì)照（CK）。

1.4 育苗基質(zhì)

采用柴米河蔬菜育苗基質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)成分為N 0.5%，P2O51.7%，總鉀含量4.6%，電導(dǎo)率2.0 mS/cm，有機(jī)質(zhì)含量32%、pH值6.8、含水量35%。

1.5 試驗(yàn)方法

播 種 前 12 h， 分 別 將 AR156、AR156-1、AR156-2菌劑的3個(gè)濃度梯度的菌液噴灑到12 L育苗基質(zhì)中；化學(xué)藥劑安克播種前以600倍液均勻噴灑到12 L育苗基質(zhì)中；另設(shè)清水對(duì)照處理，以上各處理3次重復(fù)。于2010年5月31日,將辣椒種子播于72孔重型穴盤(pán)。試驗(yàn)在淮安蔬菜科技示范園育苗溫室內(nèi)進(jìn)行。

圖1 辣椒疫病基質(zhì)育苗苗盤(pán)發(fā)病癥狀

圖2 辣椒幼苗疫病田間發(fā)病癥狀

1.6 調(diào)查內(nèi)容與測(cè)定方法

辣椒出苗后30 d調(diào)查疫病發(fā)病率及防效情況；辣椒出苗后35 d隨機(jī)取樣30株測(cè)定地上部鮮質(zhì)量、地下部鮮質(zhì)量，計(jì)算植株綜合鮮質(zhì)量。

發(fā)病率（%）=發(fā)病株數(shù)/總株數(shù)×100%；防治效果（%）=[（總對(duì)照組病指-總處理組病指）/總對(duì)照組病指]×100%；促生效果（%）＝[（處理平均產(chǎn)量－對(duì)照平均產(chǎn)量）/對(duì)照平均產(chǎn)量]×100%。

1.7 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 13.0分析軟件進(jìn)行平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、單因素方差分析。

圖3 辣椒坐果期疫病田間發(fā)病癥狀

圖4 辣椒疫病游動(dòng)孢子囊（10X）

表1 出苗后30 d生防菌劑處理對(duì)辣椒疫病的防治效果

表2 生防菌劑處理播種后35 d對(duì)辣椒基質(zhì)穴盤(pán)幼苗促生作用

圖5 生防菌劑對(duì)基質(zhì)穴盤(pán)辣椒幼苗的促生效果

2 結(jié)果與分析

2.1 病原物鑒定

對(duì)病組織進(jìn)行分離鑒定，純化得到病原真菌。經(jīng)鏡檢，并結(jié)合《真菌鑒定手冊(cè)》確定該病害由鞭毛菌亞門(mén)的辣（甜）椒疫霉真菌（Phytophthora capsici Leonian）侵染所致。其田間癥狀及病原物孢子形態(tài)如圖 1～4。

2.2 生防菌劑對(duì)辣椒疫病的防治效果

如表1所示，南京農(nóng)大植病系提供的各生防菌劑對(duì)辣椒穴盤(pán)育苗中出現(xiàn)的疫病均有一定的防治效果，其中AR156-2表現(xiàn)突出，其1×108cfu/mL濃度處理防效接近80%，比安克防效好。

2.3 生防菌劑對(duì)基質(zhì)穴盤(pán)辣椒幼苗的促生效果

由表 2所示，AR156-2菌劑 的 1×108cfu/mL濃度處理促生效果也顯著高于其他處理，達(dá)35.27%，AR156菌劑 的1×108cfu/mL濃度處理促生效果表現(xiàn)也較好，說(shuō)明生防菌劑能明顯增加辣椒地上部與地下部鮮質(zhì)量，而安克促生效果最差（圖5）。

3 小結(jié)與討論

經(jīng)鑒定，辣椒基質(zhì)穴盤(pán)育苗中幼苗發(fā)生的病害為疫病，其病原菌為Phytophthora capcisi。當(dāng)溫度高且濕度大時(shí)病原菌容易繁殖，而且病原菌擴(kuò)展病害很難控制。由于常規(guī)甲霜靈類(lèi)藥劑大量使用，導(dǎo)致病原菌對(duì)其耐藥性增強(qiáng)，防效降低；進(jìn)口藥劑安克作為甲霜靈類(lèi)農(nóng)藥的替代物，對(duì)辣椒疫病有一定的防治效果，但田間試驗(yàn)中其防治效果表現(xiàn)并不突出，且其價(jià)格較高。

本試驗(yàn)將生防菌劑接種在蔬菜育苗基質(zhì)里，利用基質(zhì)里豐富的營(yíng)養(yǎng)，使生防菌劑進(jìn)行大量擴(kuò)繁，達(dá)到抑制有害病菌繁殖的作用。試驗(yàn)中生防菌劑AR156-2（BBS合劑）表現(xiàn)出良好的防病效果和促生效果，對(duì)辣椒疫病防效達(dá)79.5%，且促生效果也十分明顯，達(dá)到35.27%，顯示出良好的應(yīng)用前景。