酸柏梔油軟膠囊對(duì)去勢(shì)大鼠血液流變性的影響及其降血脂作用

李寶莉，谷秀娟，陳雅慧，張正祥

（1.延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，陜西 延安 716000；2.延安大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 延安 716000；3.延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，陜西 延安 716000）

酸柏梔油軟膠囊對(duì)去勢(shì)大鼠血液流變性的影響及其降血脂作用

李寶莉1，谷秀娟2，陳雅慧3，張正祥1

（1.延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，陜西 延安 716000；2.延安大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 延安 716000；3.延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，陜西 延安 716000）

目的：觀察酸柏梔油軟膠囊（COJAG）對(duì)雌性去勢(shì)大鼠血液流變性和血脂的作用，以及對(duì)雌性激素、體質(zhì)量和臟器指數(shù)的影響。方法：45只已行雙側(cè)卵巢切除術(shù)的雌性大鼠，分為COJAG高、中、低劑量組，雌激素組，模型組；另取10只大鼠作為假手術(shù)組，均進(jìn)行雌二醇（E2）、卵泡雌激素（FSH）、黃體生成素（LH）、血脂、血液流變性、體質(zhì)量及臟器指數(shù)的測(cè)定。結(jié)果：與模型組比較，COJAG組大鼠血清E2水平顯著增高（P＜0.01），F(xiàn)SH和LH水平降低（P＜0.05或P＜0.01）；血清TG、TC、LDL－C及TC／HDL－C水平降低（P＜0.05），HDL－C水平增高（P＜0.05）；體質(zhì)量顯著降低，胸腺、垂體、子宮和腎上腺等臟器指數(shù)顯著增加（P＜0.05或P＜0.01）；高、中、低切變率下的全血黏度（ηb）和血漿黏度（ηp）降低（P＜0.05），血沉（ESR）加快（P＜0.05），紅細(xì)胞壓積（Hct）、纖維蛋白原（Fib）減少（P＜0.05）。結(jié)論：COJAG可降低血脂，改善血液流變性，減輕體質(zhì)量，增加臟器指數(shù)，作用可能與其增加雌激素水平和／或富含多不飽和脂肪酸有關(guān)。

酸柏梔油軟膠囊；雌二醇；卵泡雌激素；黃體生成素；血脂；體質(zhì)量；臟器指數(shù)；血液流變性

圍絕經(jīng)期婦女由于卵巢功能減退，體內(nèi)雌激素水平下降，致神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)機(jī)制失衡，出現(xiàn)體質(zhì)量增加、血脂異常等一系列癥狀，臨床上常用激素替代治療，由此卻引發(fā)了許多毒副作用。天然藥物在預(yù)防和治療圍絕經(jīng)期綜合癥方面是安全有效的方法之一。酸柏梔油軟膠囊是由酸棗仁油、梔子油、柏子油以3︰3︰1壓制而成，酸棗仁乃鼠李科（rhamnaceae）植物酸棗［Ziziphus jujuba Mill.var.Spinosa（Bunge）Hu ex H.F.Chow］的干燥成熟種子，柏子仁為柏科綠喬木植物側(cè)柏［Plat ycladusorientalis（L.）Franco］的干燥成熟種仁，梔子系茜草科植物梔子（gardenia jasminoides ellis）的干燥成熟果實(shí)。已知酸柏梔油軟膠囊有鎮(zhèn)靜、催眠、促學(xué)習(xí)記憶作用［1］，本課題通過觀察酸柏梔油軟膠囊對(duì)雌性去勢(shì)大鼠血液流變性和血脂的作用，以及對(duì)雌性激素、體質(zhì)量和臟器指數(shù)的影響，初步探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 3月齡SPF級(jí)健康雌性SD大鼠55只，體質(zhì)量（280±20）g，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，陜醫(yī)動(dòng)字08－005，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 酸柏梔油軟膠囊是由西安東盛醫(yī)藥研究所制備，0.5g／粒，批號(hào)081120。乙烯雌酚（diethylstilbestrol，石家莊市協(xié)和藥業(yè)有限公司，批號(hào)H13021146）。血脂所需試劑均選用中生北控生物科技股份有限公司產(chǎn)品。雌二醇（estradiol，E2）、 卵 泡 刺 激 素 （follicle－stimulating hormone，F(xiàn)SH）、黃體生成素（luteinizing hormone，LH）采用電化學(xué)免疫發(fā)光法測(cè)定，所用診斷試劑、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品均由瑞士羅氏公司提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)器材 KDC－160HR高速冷凍離心機(jī)（科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司），普利生LBY－N6B型全功能自清洗血流變儀和全自動(dòng)生化分析 儀 （HOSPITEM DIAGNOSTICS EOS－bravo Plus公司），羅氏COBASE411全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀和－80℃電冰箱（SANYO公司）。

1.4 實(shí)驗(yàn)分組 ①卵巢去勢(shì)組：45只健康雌性SD大鼠，采用3%戊巴比妥鈉溶液1mL·kg－1腹腔注射麻醉，將大鼠置于俯臥位，用2%碘酒和75%酒精消毒后行雙側(cè)卵巢切除手術(shù)。在腹背部肋緣下1.0cm，脊柱兩側(cè)各1.5cm交界處，分別切1.0cm左右的切口，進(jìn)入腹腔，結(jié)扎并切除雙側(cè)卵巢。隨機(jī)分為酸柏梔油軟膠囊高、中、低劑量組及雌激素組、模型組。②假手術(shù)組：另取10只大鼠，與卵巢去勢(shì)組處理相同，但不切除雙側(cè)卵巢，僅切除卵巢周圍等體積脂肪。手術(shù)后均立即肌注40萬U青霉素預(yù)防感染。術(shù)后4周開始給藥，高劑量組給予酸柏梔油軟膠囊4.50g·kg－1，中劑量 組 給 予 1.80g·kg－1， 低 劑 量 組 給 予0.72g·kg－1， 雌 激 素 組 給 予 己 烯 雌 酚0.02mg·kg－1。模型組和假手術(shù)組大鼠均給予等體積生理鹽水作對(duì)照。連續(xù)給藥12周，空腹12h后，麻醉動(dòng)物取樣。

1.5 血樣的收集及檢測(cè) 大鼠稱重后，用3%戊巴比妥鈉溶液1mL·kg－1腹腔注射麻醉，采用頸總動(dòng)脈導(dǎo)管引流取血，于25℃、4h內(nèi)由專人測(cè)定全血黏度（ηb）和血漿黏度（ηP），溫氏法測(cè)量血沉（ESR）、紅細(xì)胞壓積（Hct），硫酸銨比濁法測(cè)量纖維蛋白原（Fib），其余血低溫離心分離血清，儲(chǔ)存在－80℃冰箱，次日測(cè)定血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL－C）、E2、FSH和LH。

1.6 臟器的稱量 臟器分離后除去脂肪，用冷生理鹽水沖洗后，用濾紙吸干，用電子天平稱量臟器質(zhì)量，計(jì)算臟器指數(shù)［臟器質(zhì)量（g）／體質(zhì)量（g）］。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理數(shù)據(jù)，雌性激素水平、血液流變學(xué)指標(biāo)、體質(zhì)量及臟器指數(shù)等均以±s表示，多組間樣本均數(shù)比較采用One－way ANOVA。

2 結(jié) 果

2.1 酸柏梔油軟膠囊作用下雌性去勢(shì)大鼠雌性激素的變化 與模型組比較，低劑量酸柏梔油軟膠囊組大鼠血清E2水平增高，而FSH和LH水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01），中劑量組大鼠LH水平增高（P＜0.05），作用類似雌激素組和假手?jǐn)?shù)組。見表1。

表1 各組大鼠血清雌性激素的變化Tab.1 Changes of serum estrogen of rats in various groups （±s）

表1 各組大鼠血清雌性激素的變化Tab.1 Changes of serum estrogen of rats in various groups （±s）

＊P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs model group.

）］Sham 10 120.36±32.60＊＊ 0.25±0.07＊ 0.27±0.08 Group n E2［cB／（μmol·L－1）］FSH［λB／（IU·L－1）］LH［λB／（IU·L－1＊＊Model 12 77.55±17.64 0.35±0.16 0.44±0.17 Estrogen 9 130.36±54.04＊＊ 0.06±0.04＊＊ 0.20±0.07＊＊High dosage 8 82.73±20.09 0.27±0.06 0.34±0.10 Middle dosage 8 91.31±19.91 0.26±0.07 0.32±0.07＊Low dosage 8 129.80±22.35＊＊ 0.22±0.07＊ 0.24±0.06＊＊

2.2 酸柏梔油軟膠囊作用下雌性去勢(shì)大鼠血脂水平的變化 與模型組比較，低劑量酸柏梔油軟膠囊組大鼠血清TG、TC、LDL－C和TC／HDL－C水平降低，而HDL－C水平增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），中劑量組大鼠TC／HDL－C增高 （P＜0.05），作用類似雌激素組和假手?jǐn)?shù)組。見表2。

表2 各組大鼠血脂的變化Tab.2 Changes of blood fats of rats in various groups （±s）

表2 各組大鼠血脂的變化Tab.2 Changes of blood fats of rats in various groups （±s）

＊P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs model group.

HDL－C Sham 10 1.08±0.31＊ 1.25±0.17＊ 0.48±0.28＊＊ 0.92±0.37＊＊ 1.58±0.69 Group n TG［cB／（mmol·L－1）］TC［cB／（mmol·L－1）］LDL－C［cB／（mmol·L－1）］HDL－C［cB／（mmol·L－1）］TC／＊Model 12 1.96±1.02 1.65±0.30 1.11±0.25 0.23±0.19 13.53±16.35 Estrogen 9 1.20±0.45＊ 1.30±0.34＊ 0.48±0.43＊＊ 1.33±0.72＊＊ 1.17±0.58＊High dosage 8 1.42±0.59 1.53±0.25 0.93±0.22 0.29±0.29 12.08±11.82 Middle dosage 8 1.33±0.40 1.52±0.36 0.98±0.47 0.64±0.26 2.34±1.12＊Low dosage 8 1.22±0.50＊ 1.31±0.21＊ 0.65±0.41＊ 0.73±0.22＊ 3.27±2.89＊

2.3 酸柏梔油軟膠囊作用下雌性去勢(shì)大鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)的變化 與模型組比較，低劑量酸柏梔油軟膠囊組大鼠體質(zhì)量減輕，臟器指數(shù)明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05或P＜0.01），作用類似雌激素組和假手?jǐn)?shù)組。見表3。

表3 各組大鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)的變化Tab.3 Changes of body weight and viscera indexes of rats of various groups （±s）

表3 各組大鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)的變化Tab.3 Changes of body weight and viscera indexes of rats of various groups （±s）

＊P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs model group.

Group n Body weight（m／g） Thymus（×10－4） Pituitary（×10－5） Uterus（×10－5） Adrenal gland（left 10－5）Sham 10 347.85±15.64＊ 6.75±1.58＊＊ 6.84±1.04＊＊ 15.74±0.97＊＊ 16.24±4.02＊＊Model 12 393.92±44.387 3.74±1.40 2.91±1.25 2.59±1.48 7.43±1.64 Estrogen 9 357.43±12.528＊ 6.43±2.00＊＊ 4.21±1.60＊ 4.47±1.27＊ 11.69±5.76＊High dosage 8 378.22±31.783 5.05±2.20 3.42±1.02 3.93±1.62 7.37±2.06 Middle dosage 8 381.86±37.936 4.38±1.36 3.74±1.99 3.38±0.86 9.57±1.63 Low dosage 8 316.00±17.752＊＊ 5.54±1.95＊ 6.39±0.34＊＊ 15.69±3.07＊＊ 15.24±4.00＊＊

2.4 酸柏梔油軟膠囊作用下雌性去勢(shì)大鼠血液流變性的變化 與模型組比較，低劑量酸柏梔油軟膠囊組大鼠的ηb和ηp降低，ESR增快，Hct、Fib含量減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05），中劑量組大鼠Fib含量增加 （P＜0.05），作用類似雌激素組和假手術(shù)組。見表4。

表4 各組大鼠血液流變性的變化Tab.4 Changes of on blood rheology of rats in various groups （±s）

表4 各組大鼠血液流變性的變化Tab.4 Changes of on blood rheology of rats in various groups （±s）

＊P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs model group.

）］Sham 10 5.37±0.83 7.14±1.14 15.94±3.56 1.15±0.23 1.31±0.88 58.25±5.84 0.22±0.06 Group n ηb ηp mPa·s／150s－1 mPa·s／60s－1mPa·s／10s－1 mPa·s／150s－1 ESR（mm·h－1） Hct（η／%）Fib［ρB／（g·L－1＊＊Model 12 5.96±0.61 7.89±1.10 18.02±3.82 1.47±0.82 0.67±0.51 60.17±3.76 0.35±0.09 Estrogen 9 5.03±0.67＊ 6.70±1.20＊ 13.39±3.96＊ 0.97±0.04＊ 3.86±3.57＊ 55.00±3.05＊0.32±0.07 High dosage 8 5.54±0.79 7.06±1.07 15.23±4.20 1.06±0.16＊ 1.50±0.50 58.67±3.50 0.32±0.09 Middle dosage 8 5.27±0.30 6.98±1.02 14.94±3.19 1.20±0.13 1.29±0.48 58.14±1.67 0.25±0.12＊Low dosage 8 5.03±0.46＊ 6.33±0.39＊ 13.06±1.65＊ 1.06±0.10＊ 2.52±1.26＊ 56.00±2.16＊0.24±0.06＊

3 討 論

酸柏梔油軟膠囊富含油酸、亞油酸、亞麻酸（油酸31.2%，亞油酸32.2%，亞麻酸16.4%）。油酸、亞油酸 （linoleic acid，LA）可以生成γ－亞麻酸 （γ－linolenic acid，GLA）、二 高－γ－亞麻 酸、花生四烯酸 （arachidonic acid，AA）及前列腺素（PGs）等，α－亞麻酸 （α－LNA）進(jìn)入體內(nèi)主要以二十碳五烯酸 （eicosapntemacnioc acid，EPA）和二十二碳六烯酸 （docosahexaenoic acid，DHA）形式存在［2］。

本研究發(fā)現(xiàn)：酸柏梔油軟膠囊可顯著降低雌性去勢(shì)大鼠的TG、TC、LDL－C水平，增高HDL－C水平，并能降低TC／HDL－C；顯著減輕體質(zhì)量并增加胸腺、垂體、子宮和腎上腺等臟器指數(shù)；顯著降低高、中、低切變率下的ηb和ηp，使ESR加快，Hct、Fib含量減少，以上作用可能與其增加雌激素水平和／或富含多不飽和脂肪酸有關(guān)。

已有研究［3－4］證實(shí)：內(nèi)臟脂肪與雌激素水平成反比，雌激素水平降低，食欲增加，內(nèi)臟脂肪堆積，易導(dǎo)致內(nèi)臟肥胖；圍絕經(jīng)期婦女由于卵巢萎縮，雌激素水平下降，發(fā)生胰島素分泌、糖代謝及脂肪代謝等的紊亂，使體脂分布異常［5－6］；雌激素通過受體 （ERα、ERβ）來調(diào)節(jié)食物攝取、體質(zhì)量和脂肪分布，影響機(jī)體脂質(zhì)代謝［7］，進(jìn)而減輕體質(zhì)量，增加臟器指數(shù)。酸柏梔油軟膠囊增加E2、降低FSH和LH水平的機(jī)制尚不明確，可能通過體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化為雌激素，也有可能促進(jìn)卵巢和其他腺體分泌雌激素而發(fā)揮作用。

GLA降低血脂的機(jī)制可能為：①在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為PGE2、PGI、PGF2α等降低TC；②增加TC的極性和水溶性，使TC更易被酶水解，抑制TC升高；③清除血液中TG，減少內(nèi)源性TC的生成，從而減少β－脂蛋白的生成，升高 HDL－C［8］。此外，α－LNA尚具有顯著降低血清TG和TC的作用；AA降低血TC的效果比亞油酸和亞麻酸強(qiáng)4倍［9］；EPA和DHA對(duì)于動(dòng)物的體質(zhì)量、體脂，尤其是腹部脂肪具有明顯的改善作用，機(jī)制包括降低血漿TG、游離脂肪酸以及改善底物的氧化應(yīng)激，還可降低肝臟的脂質(zhì)合成，促進(jìn)脂肪酸的β氧化［10］。因而酸柏梔油軟膠囊含有的多不飽和脂肪酸直接或間接 （體內(nèi)轉(zhuǎn)化）降低TC、TG、LDL－C和體質(zhì)量，增加臟器指數(shù)，升高HDL－C。

血液中TC和TG升高及HDL－C降低，可進(jìn)一步使細(xì)胞膜的流動(dòng)性降低，紅細(xì)胞變形能力下降，導(dǎo)致微循環(huán)瘀血、組織缺氧，血流減慢，血流量減少，血液黏稠度增大［11－12］。酸柏梔油軟膠囊通過降低TG、TC，升高 HDL－C從而降低血液黏度，改善血液流變性，增加微循環(huán)血供?？傊?，酸柏梔油軟膠囊可提高雌激素水平和／或富含的多不飽和脂肪酸調(diào)節(jié)血脂，降低體質(zhì)量，增加臟器指數(shù)，改善血液流變性，該軟膠囊的其他作用及機(jī)制尚需作進(jìn)一步的研究。

［1］李寶莉，朱 梅，符兆英，等 .酸柏梔油軟膠囊對(duì)小鼠鎮(zhèn)靜催眠促學(xué)習(xí)記憶作用的影響 ［J］.中國老年學(xué)雜志，2012，32 （8）：1639－1642.

［2］高 楓，符兆英，李寶莉.棘仁柏仁梔子油配方的安神與益智作用研究 ［J］.中國應(yīng)用生理學(xué)雜志，2011，27 （2）：240－245.

［3］Lee GG，Carr MC， Murdoch SJ，et al. Adipokines，inflammation，and visceral adiposity across the menopausal transition：aprospective study ［J］.J Clin Endocrinol Metab，2009，94 （4）：1104－1110.

［4］龔華芳，張亞興，王曉東，等.雌激素對(duì)卵巢切除大鼠血脂和血清瘦素、抵抗素表達(dá)的影響 ［J］.重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，36 （6）：693－695.

［5］Mclnnes KJ，Corbould A，Simpson ER，et al.Regulation of AMPK and lipogenesis by androgens contributes to visceral obesity in an estrogen－deficient state ［J］.Endocrinology，2006，12 （147）：5907－5913.

［6］Fu ZY，Wang YP，Chen Y.Observation of insulin exocytosis by apancreaticβcell line with total internal reflection fluorescence microscopy ［J］.Chin Med Sci J，2011，26 （1）：49－52.

［7］Ratiani L，Parkosadze G，Cheishvili M，et al. Role of estrogens in pathogenesis of age－related disease in women of menopausal age［J］.Georgian Med News，2012 （203）：11－16.

［8］周同永，任 飛，鄧 黎，等.γ－亞麻酸及其生理生化功能研究進(jìn)展 ［J］.貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39 （3）：53－58.

［9］吳素萍.亞麻籽中α－亞麻酸的保健功能及提取技術(shù) ［J］.中國釀造，2010 （2）：7－11.

［10］代玲俐，蘇 青.n－3多不飽和脂肪酸和代謝綜合征 ［J］.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2009，25 （17）：2973－2975.

［11］李宗誠，金在久，王玉寶.月見草油合劑對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血脂及血瘀證血液流變學(xué)影響的研究 ［J］.中國中醫(yī)藥科技，2008，15 （1）：30－31.

［12］Brun JF，Varlet－Marie E，F(xiàn)édou C，et al.Body composition and exercise performance as determinants of blood rheology in middle－aged patients exhibiting the metabolic syndrome ［J］.Clin Hemorheol Microcirc，2011，49 （1－4）：215－223.

Influence of Soft Capsule of Compound Oil of Jujube，Arboruitae，and Gardenia on blood rheology and blood fats in castrated rats

LI Bao－li1，GU Xiu－juan2，CHEN Ya－h(huán)ui3，ZHANG Zheng－xiang1（1.Department of Pharmacology，Medical College，Yanan University，Yanan 716000，China；
2.Department of Clinical Laboratory，Affiliated Hospital，Yanan University，Yanan 716000，China；3.Department of Physiology，Medical College，Yanan University，Yanan 716000，China）

Objective To observe the effects of Soft Capsule of Compound Oil of Jujube，Arboruitae，and Gardenia（COJAG）on serum estrogen hormone，blood rheology，blood fats，as well as body weight and viscera indexes in castrated female rats.Methods 45bilateral oophorectomy female rats were divided into COJAG high，middle and low doses groups，estrogen group，and model group；other 10rats were used as sham operation group.The blood fats，blood rheology，body weight，viscera indexes，serum estrodiol，follicle－stimulating hormone and luteinizing hormone were determined.Results Compared with model group，the serum E2was significantly increased（P＜0.01），F(xiàn)SH （P＜0.05）and LH （P＜0.01）were reduced；TG，TC，LDL，and C／HDL－C were significantly reduced（P＜0.05），HDL－C was increased（P＜0.05）；the body weight of the female castrated rats was significantly reduced and their thymus，pituitary，uterus，adrenal and other organs’viscera indexes were increased（P＜0.05orP＜0.01）.Theηb andηp in high，middle and low shear rates of whole blood viscosity，plasma viscosity were significantly lowered（P＜0.05），ESR was speeded up（P＜0.05），and the Hct and Fib were lowered（P＜0.05）in the female castrated rats in COJAG groups.Conclusion COJAG can decrease blood fat，improve blood rheology，reduce weight，and increase viscera index；these roles are probably related to the increase of estrogen content in blood and（or）its rich polyunsaturated fatty acids.

Soft Capsule of Compound Oil of Jujube，Arboruitae，and Gardenia；estrodiol；follicle－stimulating hormone；luteinizing hormone；blood lipid；body mass index；viscera index；blood rheology

R285.5

A

1671－587Ⅹ（2012）05－0927－05

2012－05－17

陜西省科技廳社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目資助課題 ［2008k16－04（6）］

李寶莉 （1968－），女，陜西省延安市人，副教授，醫(yī)學(xué)碩士，主要從事中藥藥理學(xué)研究。

李寶莉 （Tel：0911－2412293，E－mail：lbl＿0812＠163.com）