中醫(yī)外科外用散劑組方中藥體外抗菌作用的實驗研究

陸繼梅 孟建華 安 立 安紅梅

石家莊市中醫(yī)院 河北石家莊 050051

為了研究中醫(yī)外科臨床常用散劑的體外抗菌譜及抗菌力，通過對傳統(tǒng)方、各醫(yī)院的協(xié)議方檢索，在52首方劑中出現(xiàn)的60味中藥，運用臨床藥敏學(xué)檢驗學(xué)方法，對其體外抗菌作用進行細(xì)菌學(xué)研究。

1 材料與方法

1.1 材料

本實驗所用的各種中藥材，均由本院中藥房提供。培養(yǎng)基為水解酪蛋白瓊脂；增菌液；菌株來源（標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株）：綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌；藥敏紙片，將化學(xué)分析濾紙以打孔機打制成直徑5mm圓片，高壓滅菌備用。

1.2 方法

1.2.1 不易研成細(xì)末藥材的制備及抑菌實驗

主要為植物性藥材。將單味中藥粗粉碎后取藥粉3g置試管內(nèi)，加入蒸餾水浸入后至液體約3ml，經(jīng)高壓滅菌、離心沉淀后使每毫升藥液含藥量相當(dāng)生藥1g后備用。將菌株涂于M-H平板上，放入藥敏紙片，紙片中心間隔距離大于24mm。每個藥敏紙片滴入藥液5μl，將培養(yǎng)皿放入35℃孵育箱中24h測抑菌環(huán)。

1.2.2 容易研成細(xì)末藥材的制備及抑菌實驗

主要為礦物性、脂性藥材。將藥物粉碎過200目細(xì)篩得粉劑，無菌處理。取散劑2mg壓制成直徑約5mm的圓片。將菌株涂于M-H平板上，放入藥片，藥片中心間隔距離大于24mm。放入35℃孵育箱中24h測抑菌環(huán)。

1.2.3 抑菌試驗的結(jié)果判定

耐藥：細(xì)菌正常生長，無抑制現(xiàn)象，以（－）表示。中介：在藥敏紙片或藥粉片下無菌生長，邊緣為一抑菌環(huán)，其直徑小于6mm，以（＋）來表示。敏感：抑菌范圍大于6mm，記錄下其直徑；實驗中出現(xiàn)抑菌環(huán)大于24mm，且抑菌范圍連成一片無法測量其抑菌環(huán)的以“＞”表示。

1.2.4 MIC及MBC測定

單味中藥及散劑的藥物制備同前。將藥物配制成3mg/ml原液，以倍比稀釋法將其分別稀釋成每毫升含藥量1、0.5、0.25、0.125、0.0625mg，分裝于無菌試管中，每管2ml，經(jīng)6h培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控實驗菌株懸液0.01ml，植入上述試管。置35℃孵育箱24h。結(jié)果判定：含中藥量最少且無菌生長的稀釋度為該藥對試驗菌的MIC。將無菌生長試管內(nèi)的培養(yǎng)液再接種血瓊脂培養(yǎng)基24h，無細(xì)菌生長的含藥量最少的試管為該藥對試驗菌的MBC，用于中藥體外抗菌作用的定量觀察。

2 結(jié)果

2.1 抑菌試驗結(jié)果

無明顯拮抗現(xiàn)象出現(xiàn)，有明顯協(xié)同的作用。輕粉、紅粉、硼砂三種中藥在兩實驗藥片之間出現(xiàn)抑菌范圍連片，形成不對稱抑菌環(huán)。篩選的60味中藥中有32種（53%）對實驗的所有臨床菌株均無抑菌作用。植物類中藥抗菌譜窄、抗菌力低。礦物質(zhì)類除輕粉、紅粉、硼砂外，大多數(shù)抗菌譜窄、抗菌力低，甚至沒有抗菌作用。

2.2 MIC及MBC測定

經(jīng)過抑菌試驗的初步篩選，針對試驗中的抗菌作用強的紅粉、輕粉、硼砂進行了標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC及MBC測定。三種藥物抗菌譜廣，未出現(xiàn)耐藥，抗菌力強，但其MIC及MBC測定高于常用抗生素值，在10～100倍之間。

表1 不易研成細(xì)末中藥對臨床菌株的抑菌范圍（單位：mm）

表2 容易研成細(xì)末中藥對臨床菌株的抑菌范圍（單位：mm）

表3 紅粉、輕粉、硼砂對標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株的MIC與MBC結(jié)果（單位：mg/ml）

表4 中醫(yī)外科外用散劑對標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株的MIC與MBC結(jié)果（單位：mg/ml）

3 結(jié)論

活血化瘀類藥物抗菌譜廣，抗菌作用弱；礦物質(zhì)類藥材中的龍骨、滑石、石膏無抗菌作用；清熱解毒藥物類抗菌譜窄，抗菌作用差。

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