TCT聯(lián)合高危型HPV-DNA檢測在宮頸病變篩查中的應(yīng)用

何秋玲 劉冬艷

河池市第一人民醫(yī)院，廣西 河池 546300

宮頸癌是女性生殖道惡性腫瘤較為常見的一種類型，早期宮頸癌患者5年治愈率高達90%，所以宮頸癌的篩查引起了醫(yī)學界的廣大關(guān)注[1]。現(xiàn)已明確HPV(Human Papilloma-Virus，HPV)感染是宮頸癌發(fā)生的主要病因[2]，TCT是采用液基薄層細胞檢測目前較為先進的一種宮頸癌細胞學檢查技術(shù)。本研究分別對單純TCT組及TCT聯(lián)合HRHPV-DNA組進行對照研究，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年1月～2011年12月在本院婦科門診行宮頸細胞學檢查者2500例，年齡 19～67歲，平均 37.7歲，無內(nèi)、外科合并癥及免疫系統(tǒng)疾病等并發(fā)癥。檢查原因有：體檢，白帶增多，性交后出血，異常陰道出血等。隨機分成單純TCT和TCT聯(lián)合HR-HPV-DNA兩組，兩組患者平均年齡、身體健康狀況等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 研究方法

檢查前3d不使用陰道內(nèi)藥物，不做陰道沖洗，24h內(nèi)禁止性行為，并在非經(jīng)期檢查。

①采用 TCT行宮頸細胞學檢查將特制的宮頸“細胞刷”插入宮頸管內(nèi)，達宮頸外口上方10mm左右，輕輕按順時針方向旋轉(zhuǎn)5周后取出，將集有宮頸口及頸管內(nèi)脫落上皮細胞的宮頸刷洗脫于保存液的小瓶中固定，且將刷頭直接放入保存液的瓶中，送檢。經(jīng)Mono GeneM2900系統(tǒng)處理后，制成直徑為1.5cm的薄層細胞涂片，95%酒精固定，HE染色。細胞學診斷采用TBS分類法。

②HR-HPV-DNA檢測對應(yīng)用熒光定量PCR（FQ-PCR）技術(shù)對宮頸分泌物進行HPV16.18-DNA定量檢測，檢查時用陰道窺器暴露宮頸，用無菌生理鹽水棉球擦去宮頸外分泌物，再用無菌棉拭子插入宮頸內(nèi)，停10 s后旋動棉拭子采集宮頸分泌物，然后將棉拭子置入無菌試管內(nèi)密閉送檢。采用中山大學達安基因股份有限公司熒光定量檢測試劑。儀器采用國產(chǎn)達安DA7600熒光定量PCR儀器，嚴格按說明書進行實驗。樣本實時定量檢測結(jié)果≥500拷貝判為HPV陽性。

③病理學檢查陰道鏡下對病變最嚴重處多點取材活檢，如無異常，則常規(guī)取移行帶第 3、6、9、12點 4處。本研究以病理組織學結(jié)果為標準∶活檢異常標準為 CIN（宮頸上皮內(nèi)瘤變）Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ、宮頸浸潤癌。

1.3 統(tǒng)計與處理

采用χ2檢驗統(tǒng)計分析結(jié)果。

2 結(jié)果

經(jīng)檢驗后，檢出HPV陽性或TCT檢測陽性，經(jīng)病理檢查證實為宮頸癌前病變或?qū)m頸癌患者的病例見表1，由表1可見：TCT聯(lián)合HR-HPV-DNA組檢出率明顯高于單純TCT組，差異有顯著性，（P＜0.01）。

3 討論

近年來，宮頸癌發(fā)生率明顯上升，且趨于年輕化，對婦女健康生命威脅甚大。國內(nèi)外學者對宮頸癌的病因進行了大量的研究3。CIN是發(fā)生在癌前期的病變，因此對CIN要高度重視并積極對癥處理[3]。TCT是國際上較為先進的一種宮頸癌細胞學檢查技術(shù)，與常規(guī)制片方法比較，改善了樣本收集率,并使細胞均勻分布在玻片上，提高了發(fā)現(xiàn)鱗狀上皮低度和高度病變的敏感度。人乳頭瘤病毒（HPV）屬嗜上皮性病毒，現(xiàn)已確定HPV型別有110種，目前，國內(nèi)外已公認HPV感染是導(dǎo)致宮頸癌的主要原因。感染了高危型的HPV就可能導(dǎo)致子宮頸癌。宮頸鱗癌中以HPV16型感染最為常見，而宮頸腺癌中HPV18型陽性率最高。HPV-DNA檢測作為初篩手段可濃縮高危人群，是宮頸病篩查最佳方法，并對檢查陽性者及時治療是逆轉(zhuǎn)宮頸炎及CIN病變、防治宮頸癌的關(guān)鍵措施[4]。只有持續(xù)的HPV感染才會發(fā)展成為不同級別的CIN或者是宮頸癌。如果細胞學和高危型HPV-DNA檢測均為陰性者，表明其發(fā)病風險很低，可將篩查間隔延長到8～10年，細胞學陰性而高危型HPV陽性者發(fā)病風險較高，應(yīng)定期隨訪[5]。高危型HPV-DNA檢測均為陽性、細胞學陽性，或僅細胞學陽性者，均應(yīng)行陰道鏡檢查及宮頸多點活組織檢查。國內(nèi)外開始將檢測高危型HPV-DNA作為宮頸癌的一種篩查手段[5]。盡管TCT能提高宮頸細胞學的敏感度及減少假陰性，但由于脫落細胞與活體細胞的特征不完全相同，無組織結(jié)構(gòu)，故脫落細胞不能作為最后的診斷依據(jù)。Olanyan[6]認為單獨細胞學篩查宮頸病變是不夠的。同樣，單一的HPV-DNA檢測顯然有不足之處。本文資料顯示，TCT聯(lián)合HR-HPV-DNA法檢出陽性結(jié)果與病理學符合率（94.87%）比單純TCT法（81.46%）高，與朱曉琴[7]相近。因此，TCT聯(lián)合HR-HPV-DNA法檢測是一種先進的且可提高宮頸病變的陽性檢出率最佳方案，值得推廣。

表1 兩組宮頸癌前病變或?qū)m頸癌檢測情況

[1]江俐.TCT聯(lián)合HPV檢測在診斷子宮頸疾病中的應(yīng)用[J].醫(yī)學研究雜志,2008,37(1)∶124.

[2]廖丹梅,黃明春,李惠珍,等.TCT聯(lián)合 HPVDNA檢測在宮頸病變中的診斷價值 [J].廣西醫(yī)科大學學報,2008,25(1)∶59.

[3]袁新榮，李紅薇.TCT、HR－HPV檢測及宮頸活檢在宮頸早期病變中的診斷價值[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2007，4(14)∶13.

[4]來菊英.辛復(fù)寧治療女性生殖道HPV感染臨床研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學雜志，2008，25(8)∶786.

[5]樂杰.婦產(chǎn)科學[M].第7版.北京∶人民衛(wèi)生出版社,2008∶408-409.

[6]Hesselink AT,Berkhor J,Heideman DA,et al.High-risk Human papillomavirus DNA load in a population-based cervical screening cohort in relation to the detection of high-grade cervical intraepithelial neoplasia and cervical cancer[J].Int J Cancer,2009,124∶381-386.

[7]朱曉琴.TCT聯(lián)合HPV DNA檢測對宮頸癌診斷的臨床意義[J].齊齊哈爾醫(yī)學院學報，2011,32(1)∶19.