柴胡皂苷d對(duì)小鼠免疫性肝損傷丙二醛、白介素-8的影響

李 嚴(yán) 王 磊

柴胡皂苷d對(duì)小鼠免疫性肝損傷丙二醛、白介素-8的影響

李 嚴(yán) 王 磊

目的觀察柴胡皂苷 d對(duì)免疫性肝損傷小鼠肝組織中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-8（IL-8）的影響。方法60只雄性昆明種小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組和柴胡皂苷組，正常對(duì)照組一次性尾靜脈注射0.9%生理鹽水（20mg/kg），模型組和柴胡皂苷組一次性尾靜脈注射刀豆蛋白A（20mg/kg），模型組給予0.9%生理鹽水（160mg/kg）灌胃，柴胡皂苷組給予柴胡皂苷d（160mg/kg）灌胃，正常對(duì)照組給予0.9%生理鹽水（160mg/kg）灌胃，每日2次，連續(xù)7d，末次給藥后4h再次尾靜脈注射ConA（20mg/kg），12h后檢測(cè)肝組織中SOD、MDA的含量和血清TNF-α、IL-8的含量。結(jié)果模型組小鼠肝組織中SOD的含量明顯低于柴胡皂苷組，柴胡皂苷組小鼠肝組織中SOD的含量明顯低于空白對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01）；柴胡皂苷組小鼠肝組織中MDA含量明顯低于空白對(duì)照組、模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01、P＜0.05）；柴胡皂苷組小鼠肝組織中TNF-α、IL-8的含量明顯低于空白對(duì)照組、模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01）。結(jié)論柴胡皂苷d對(duì)ConA所致的小鼠免疫性肝損傷有較好的保護(hù)作用。

柴胡皂苷d；肝損傷；SOD；MDA；IL-8；TNF-α

柴胡主要化學(xué)成分為揮發(fā)油、柴胡皂苷及多糖。柴胡皂苷可分為 a、b、d、e、f、h，其中最具活性的成分是柴胡皂苷d。研究發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)等作用。目前，國內(nèi)外學(xué)者把柴胡皂苷應(yīng)用于腎病、肝纖維化、腫瘤等疾病的治療，筆者從柴胡皂苷 d對(duì)免疫性小鼠免疫性肝損傷的 SOD、MDA、TNF-α、IL-8的影響來研究其對(duì)肝損傷細(xì)胞的保護(hù)作用[1]。

1 資料與方法

1.1一般資料①動(dòng)物雄性昆明種小鼠60只，清潔級(jí)，體重（25±3）g，6周齡，實(shí)驗(yàn)室溫度20～26℃，相對(duì)濕度60%～80%，定時(shí)通風(fēng)換氣，每日12h光照環(huán)境飼養(yǎng)。②藥物與試劑：刀豆蛋白A(Concanavalin,ConA)；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒，TNF-α、IL-8的ELISA檢測(cè)試劑盒，柴胡皂苷d。③儀器2K-15低溫高速離心機(jī)；玻璃勻漿器；752型紫外可見分光光度計(jì)；HH-S11.2電熱恒溫水浴器；550酶標(biāo)儀。

1.2動(dòng)物分組及處理60只小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng) 3天后，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、柴胡皂苷組，每組20只，正常對(duì)照組一次性尾靜脈注射0.9%生理鹽水（20mg/kg），模型組和柴胡皂苷組一次性尾靜脈注射ConA（20mg/kg），模型組給予0.9%生理鹽水（160mg/kg）灌胃，柴胡皂苷組給予柴胡皂苷d（160mg/kg）灌胃，正常對(duì)照組給予0.9%生理鹽水（160mg/kg）灌胃，每日2次，連續(xù)7d，末次給藥后4h再次尾靜脈注射ConA（20mg/kg）。

1.3標(biāo)本采集及處理小鼠尾靜脈末次給藥后注射ConA 12h后，摘眼球取全血，低溫條件下處死動(dòng)物，摘取肝臟觀察大體外觀后，取同一肝葉組織制成勻漿待檢。

1.4指標(biāo)檢測(cè)小鼠肝組織，剪碎后加入 0.9%氯化鈉溶液，冰浴中制肝勻漿，3500r／min離心 15 rain，取上清液，按試劑盒測(cè)肝勻漿中SOD、MDA的含量。血清 TNF-α、IL-8采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。按試劑盒說明書操作。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，所有計(jì)量資料用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

模型組小鼠肝組織中 SOD的含量明顯低于柴胡皂苷組，柴胡皂苷組小鼠肝組織中SOD的含量明顯低于正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01、P＜0.05）；柴胡皂苷組小鼠肝組織中MDA含量明顯低于正常對(duì)照組、模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01、P＜0.05）；柴胡皂苷組小鼠肝組織中TNF-α、IL-8含量明顯低于正常對(duì)照組、模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01、P＜0.05），見表1。

表1 三組小鼠肝組織中SOD、MDA、TNF-α及IL-8的比較

3 討論

ConA是一種在人體內(nèi)對(duì)肝細(xì)胞有特異性毒性作用的植物凝集素，是一種能在體外激活T細(xì)胞的絲裂原，其活化T淋巴細(xì)胞而致免疫性肝損傷是該動(dòng)物模型的基本病理特點(diǎn)。與其他中毒性肝損傷模型相比，該模型被認(rèn)為更加近似地模擬人類病毒性肝炎和自身免疫性肝病等病理過程，其病變與人類慢性肝炎非常接近，并且有肝臟特異性和靶向性。因此更適合研究人類病毒性肝炎、自身免疫性肝病等的病理機(jī)制和進(jìn)行抗肝損傷的藥物篩選[2]。綜上所述，柴胡皂苷d通過抗氧化及抑制炎癥因子保護(hù)免疫性肝損傷小鼠的肝細(xì)胞。對(duì)于柴胡皂苷d的其它方面作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

[1]祖寧,李平.柴胡皂苷的生理作用及臨床意義[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2005,12(4):94-96.

[2]張秀明,陳科力,李翰明,等.蛇葡萄根的抗肝降酶及抗自由基損傷作用[J].中國藥師,1999,2(5):225-228.

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